Name: Misurazione della guanosina monofosfato ciclico (cGMP) nei tessuti solidi mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico competitivo (ELISA) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-03T13:25:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: Scopri come misurare il cGMP nei tessuti solidi mediante ELISA competitivo. Questo protocollo semplice e riproducibile utilizza campioni di tessuto suino per studiare il metabolismo dell'ossido nitrico e i suoi effetti fisiologici.

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<ol><li>Dierks, E. A., Burstyn, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide+%28NO%29%2C+the+only+nitrogen+monoxide+redox+form+capable+of+activating+soluble+guanylyl+cyclase%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide (NO), the only nitrogen monoxide redox form capable of activating soluble guanylyl cyclase.</a> Biochem Pharmacol. 51 (12), 1593-1600 (1996).</li>
<li>Koglin, M., Behrends, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+functional+domain+of+the+alpha1+subunit+of+soluble+guanylyl+cyclase+is+necessary+for+activation+of+the+enzyme+by+nitric+oxide+and+YC-1+but+is+not+involved+in+heme+binding%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">A functional domain of the alpha1 subunit of soluble guanylyl cyclase is necessary for activation of the enzyme by nitric oxide and YC-1 but is not involved in heme binding.</a> J Biol Chem. 278 (14), 12590-12597 (2003).</li>
<li>Olson, L. J., Knych, E. T., Herzig, T. C., Drewett, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+guanylyl+cyclase+inhibitor+reverses+nitric+oxide-induced+vasorelaxation%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Selective guanylyl cyclase inhibitor reverses nitric oxide-induced vasorelaxation.</a> Hypertension. 29 (1), 254-261 (1997).</li>
<li>Bailey, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+nitrate+supplementation+reduces+the+O2+cost+of+low-intensity+exercise+and+enhances+tolerance+to+high-intensity+exercise+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">Dietary nitrate supplementation reduces the O2 cost of low-intensity exercise and enhances tolerance to high-intensity exercise in humans.</a> J Appl Physiol (1985). 107 (4), 1144-1155 (2009).</li>
<li>Vanhatalo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+and+chronic+effects+of+dietary+nitrate+supplementation+on+blood+pressure+and+the+physiological+responses+to+moderate-intensity+and+incremental+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Acute and chronic effects of dietary nitrate supplementation on blood pressure and the physiological responses to moderate-intensity and incremental exercise.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 299 (4), R1121-R1131 (2010).</li>
<li>Qin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Balancing+role+of+nitric+oxide+in+complement-mediated+activation+of+platelets+from+mcd59a+and+mcd59b+double-knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Hematol%22%5BJournal%5D)">Balancing role of nitric oxide in complement-mediated activation of platelets from mcd59a and mcd59b double-knockout mice.</a> Am J Hematol. 84 (4), 221-227 (2009).</li>
<li>Radomski, M. W., Palmer, R. M., Moncada, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+l-arginine%2Fnitric+oxide+pathway+present+in+human+platelets+regulates+aggregation%5BTitle%5D)+AND+%22PNAS%22%5BJournal%5D)">An l-arginine/nitric oxide pathway present in human platelets regulates aggregation.</a> PNAS. 87 (13), 5193-5197 (1990).</li>
<li>Thomas, D. D., Liu, X., Kantrow, S. P., Lancaster, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biological+lifetime+of+nitric+oxide%3A+Implications+for+the+perivascular+dynamics+of+NO+and+O2%5BTitle%5D)+AND+%22PNAS%22%5BJournal%5D)">The biological lifetime of nitric oxide: Implications for the perivascular dynamics of NO and O2.</a> PNAS. 98 (1), 355-360 (2001).</li>
<li>Park, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+rat+skeletal+muscle+homogenates+for+nitrate+and+nitrite+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Preparation of rat skeletal muscle homogenates for nitrate and nitrite measurements.</a> J Vis Exp. (173), e62427(2021).</li>
<li>Park, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+roles+of+nitrate+and+nitrite+in+nitric+oxide+metabolism+in+the+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Potential roles of nitrate and nitrite in nitric oxide metabolism in the eye.</a> Sci Rep. 10 (1), 13166(2020).</li>
<li>Srihirun, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitrate+uptake+and+metabolism+in+human+skeletal+muscle+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Nitric+Oxide%22%5BJournal%5D)">Nitrate uptake and metabolism in human skeletal muscle cell cultures.</a> Nitric Oxide. 94, 1-8 (2020).</li>
<li>Montoliu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+of+nitric+oxide+and+atrial+natriuretic+peptide+changes+with+altered+cGMP+homeostasis+in+liver+cirrhosis%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Int%22%5BJournal%5D)">Correlation of nitric oxide and atrial natriuretic peptide changes with altered cGMP homeostasis in liver cirrhosis.</a> Liver Int. 25, 787-795 (2005).</li>
<li>Origlia, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+cGMP+inversely+correlates+with+age+in+healthy+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22J+Endocrinol+Invest%22%5BJournal%5D)">Platelet cGMP inversely correlates with age in healthy subjects.</a> J Endocrinol Invest. 27 (2), RC1-RC4 (2004).</li>
<li>Calamera, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fret-based+cyclic+GMP+biosensors+measure+low+cGMP+concentrations+in+cardiomyocytes+and+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Fret-based cyclic GMP biosensors measure low cGMP concentrations in cardiomyocytes and neurons.</a> Commun Biol. 2, 394(2019).</li>
<li>Rutkowski, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+imaging+of+cGMP+signaling+shows+pronounced+differences+between+glomerular+endothelial+cells+and+podocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Real-time imaging of cGMP signaling shows pronounced differences between glomerular endothelial cells and podocytes.</a> Sci Rep. 14, 26099(2024).</li>
<li>Straub, A. C., Beuve, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+primer+for+measuring+cGMP+signaling+and+cGMP-mediated+vascular+relaxation%5BTitle%5D)+AND+%22Nitric+Oxide%22%5BJournal%5D)">A primer for measuring cGMP signaling and cGMP-mediated vascular relaxation.</a> Nitric Oxide. 117, 40-45 (2021).</li>
<li>Huang, K. T., Lin, T. J., Hsu, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+cyclic+GMP+concentration+using+a+gold+nanoparticle-modified+optical+fiber%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">Determination of cyclic GMP concentration using a gold nanoparticle-modified optical fiber.</a> Biosens Bioelectron. 26 (1), 11-15 (2010).</li>
<li>Cyclic gmp elisa kit. , 
 <a target="_blank" href="https://cdn.caymanchem.com/cdn/seawolf/insert/581021.pdf">https://cdn.caymanchem.com/cdn/seawolf/insert/581021.pdf</a> (2024).</li>
<li>Park, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+nitrate+metabolism+in+porcine+ocular+tissues+determined+using+15N-labeled+sodium+nitrate+supplementation%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Dietary nitrate metabolism in porcine ocular tissues determined using 15N-labeled sodium nitrate supplementation.</a> Nutrients. 16 (8), 1154(2024).</li>
<li>Cgmp enzyme immunoassay kit, direct technical bulletin. , 
 <a target="_blank" href="https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/289/571/cg200bul.pdf?srsltid=AfmBOoqWnOVurQ549ESXk_E7DJoqNs7v268ktTabHHYc6I_6NZkc-j_V">https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/289/571/cg200bul.pdf?srsltid=AfmBOoqWnOVurQ549ESXk_E7DJoqNs7v268ktTabHHYc6I_6NZkc-j_V</a> (2025).</li>
<li>Cyclic gmp competitive elisa lysate and homogenate samples. , 
 <a target="_blank" href="https://assets.thermofisher.com/TFS Assets/LSG/certificate/Certificates%20of%20Analysis/RA229061_EMSCGMPL.pdf">https://assets.thermofisher.com/TFS Assets/LSG/certificate/Certificates%20of%20Analysis/RA229061_EMSCGMPL.pdf</a> (2025).</li>
<li>Hamad, A. M., Range, S., Holland, E., Knox, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+cGMP+by+soluble+and+particulate+guanylyl+cyclases+in+cultured+human+airway+smooth+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Regulation of cGMP by soluble and particulate guanylyl cyclases in cultured human airway smooth muscle.</a> Am J Physiol. 273 (4), L807-L813 (1997).</li>
<li>Mo, E., Amin, H., Bianco, I. H., Garthwaite, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetics+of+a+cellular+nitric+oxide%2FcGMP%2Fphosphodiesterase-5+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Kinetics of a cellular nitric oxide/cGMP/phosphodiesterase-5 pathway.</a> J Biol Chem. 279 (25), 26149-26158 (2004).</li>
<li>Corbin, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%5B3h%5Dsildenafil+binding+to+phosphodiesterase-5+is+specific%2C+kinetically+heterogeneous%2C+and+stimulated+by+cGMP%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">[3h]sildenafil binding to phosphodiesterase-5 is specific, kinetically heterogeneous, and stimulated by cGMP.</a> Mol Pharmacol. 63 (6), 1364-1372 (2003).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 mL di siringa orale BD Clear</td><td>Becton Dickinson</td><td>50382903052177</td><td></td></tr><tr><td>Provetta a fondo tondo da 14 mL</td><td>Falcone</td><td>352059</td><td></td></tr><tr><td>Microprovette da 2,0 ml, assortite</td><td>Olympus Plastics</td><td>24-283A</td><td></td></tr><tr><td>30-300 & micro; L pipetta multicanale&nbsp;</td><td>Eppendorf</td><td>3125000052</td><td></td></tr><tr><td>Anidride acetica (nel kit cGMP)</td><td>Azienda chimica delle Cayman</td><td>400031</td><td>98% puro <forte>Pericolo</forte>: Infiammabile, Corrosivo: ustiona grave della pelle, lesioni agli occhi, tossicità acuta <forte>Manipolazione sicura</forte>: Tenere lontano da fonti di accensione, lavorare in un'area ventilata, indossare guanti</td></tr><tr><td>Tracciante cGMP acetilcolinesterasi (in kit cGMP)</td><td>Azienda chimica delle Cayman</td><td>481020</td><td>fosfato di potassio bibasico, cloruro di sodio,&nbsp; fosfato di potassio monobasico, albumina bovina, azoturo di sodio, EDTA, tracciante AChE cGMP Pericolo</forte>: pericolo per la salute: tossicità d'organo da esposizione ripetuta, Corrosivo: lesioni oculari, irritante per la pelle e le vie respiratorie Manipolazione sicura</forte>: lavorare in un'area ventilata, Indossa i guanti</td></tr><tr><td>Antisiero ELISA cGMP (nel kit cGMP)</td><td>Azienda chimica delle Cayman</td><td>481022</td><td>fosfato di potassio bibasico, cloruro di sodio,&nbsp; fosfato di potassio monobasico, albumina bovina,&nbsp; sodio azide, EDTA, policlonale anti-cGMP di coniglio Antisiero Pericolo</forte>: Pericolo per la salute: tossicità d'organo da esposizione ripetuta, Corrosivo: lesioni oculari, Irritante per la pelle e le vie respiratorie, Tossicità acuta Manipolazione sicura: Lavorare in un'area ventilata, indossare guanti</td></tr><tr><td>Standard ELISA cGMP (nel kit cGMP)</td><td>Azienda chimica delle Cayman</td><td>481024</td><td>fosfato di potassio bibasico, cloruro di sodio,&nbsp; fosfato di potassio monobasico, albumina bovina,&nbsp; sodio azide, EDTA, standard cGMP Pericolo: Pericolo per la salute: tossicità d'organo da esposizione ripetuta, Corrosivo: danni agli occhi, Irritante per la pelle e le vie respiratorie Manipolazione sicura: lavorare in un'area ventilata, indossare guanti</td></tr><tr><td>Kit ELISA GMP ciclico</td><td>Azienda chimica delle Cayman</td><td>581021</td><td></td></tr><tr><td>Concentrato tampone ELISA 10X (nel kit cGMP)</td><td>Azienda chimica delle Cayman</td><td>400060</td><td>1 M fosfato, 1% BSA, 4 M cloruro di sodio, 10 mM EDTA, 0,1% sodio azide <forte>Pericolo</forte>: Pericolo per la salute: tossicità d'organo da esposizione ripetuta, Corrosivo: lesioni oculari, Irritante per la pelle e le vie respiratorie <forte>Manipolazione sicura</forte>: Lavorare in un'area ventilata, conservare in un contenitore con coperchio richiudibile, indossare i guanti</td></tr><tr><td>Serbatoio reagenti ELISA</td><td>Pierce (ora Thermo Fisher Scientific)</td><td>15075</td><td></td></tr><tr><td>Reagente di Ellman (in kit cGMP)</td><td>Azienda chimica delle Cayman</td><td>400050</td><td>fosfato di potassio bibasico, cloruro di sodio, fosfato di potassio monobasico, acetiltiocolina (ioduro), 5,5'-ditiobis-(acido 2-nitrobenzoico) Pericolo</forte>: Tossicità acuta, Pericolo per la salute: tossicità d'organo, Corrosivo: lesioni oculari, irritante per la pelle, irritante per la respirazione Manipolazione sicura</forte>: lavorare in un'area ventilata, indossare guanti</td></tr><tr><td>Acido cloridrico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>320331</td><td><forte>Pericolo</forte>: Corrosivo: corrode il metallo, ustiona gravemente la pelle, lesioni agli occhi, irritante per le vie respiratorie <forte>Manipolazione sicura</forte>: lavorare in un'area ventilata, indossare guanti</td></tr><tr><td>Azoto liquido</td><td>L'ossigeno di Robert</td><td></td><td>Azoto <forte>Pericolo</forte>: Gas compresso: Rischio di ustioni criogeniche, congelamento, soffocamento <forte>Manipolazione sicura</forte>: Lavorare in un'area ventilata, indossare guanti</td></tr><tr><td>Piastra rivestita IgG anti-coniglio per topi (in kit cGMP)</td><td>Azienda chimica delle Cayman</td><td>400006</td><td> Pericolo: Nessuno</td></tr><tr><td>Nuovo bilanciamento MF classico</td><td>Mettler Toledo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Agitatore orbitale&nbsp;</td><td>Stovall Life Science Inc. (ora IBI Scientific)</td><td>15-453-211 (Variabile)</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Azienda Bemis, Inc.</td><td>3023-4526 (Variabile)</td><td></td></tr><tr><td>Polisorbato 20 (in kit cGMP)</td><td>Azienda chimica delle Cayman</td><td>400035</td><td> Pericolo: Nessuno</td></tr><tr><td>Idrossido di potassio (in kit cGMP)</td><td>Azienda chimica delle Cayman</td><td>400029</td><td>85% puro <forte>Pericolo</forte>: Corrosivo: corrode i metalli e la pelle, Danni agli occhi, Tossicità acuta <forte>Manipolazione sicura</forte>: Lavorare in un'area ventilata, indossare i guanti</td></tr><tr><td>Omogeneizzatore Precellys Evolution</td><td>Bertin Tecnologie</td><td>PE000062-PEVO0-A</td><td></td></tr><tr><td>Precellys Kit di lisi Omogeneizzazione dei tessuti duri</td><td>Bertin Tecnologie</td><td>P000911-LYSK0-A</td><td></td></tr><tr><td>Lettore di micropiastre Sense</td><td>HIDEX</td><td>425-301</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuga Sorvall Legend Micro 17R</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>75002441</td><td></td></tr><tr><td>Polverizzatore per tessuti</td><td>Frantumatore di celle</td><td>Kit Cellcrusher</td><td></td></tr><tr><td>Genio del vortice 2</td><td>Industrie scientifiche&nbsp;</td><td>SI-0246</td><td></td></tr><tr><td>Bottiglia di lavaggio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z423092</td><td></td></tr><tr><td>Concentrato tampone di lavaggio 400X (in kit cGMP)</td><td>Azienda chimica delle Cayman</td><td>400062</td><td>fosfato di potassio bibasico, fosfato di potassio monobasico, acqua <forte>Pericolo</forte>: Corrosivo: Lesioni oculari, Tossicità acuta,Irritante per la pelle, Tossicità d'organo <forte>Manipolazione sicura</forte>: Lavorare in un'area ventilata, indossare guanti</td></tr></tbody></table>

misurazione della guanosina monofosfato ciclico (cgmp) nei tessuti solidi mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico competitivo (elisa)

Measurement of Cyclic Guanosine Monophosphate (cGMP) in Solid Tissues using Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

I suini domestici dello Yorkshire trattati con cloruro di sodio alimentare (0,15 mmol/kg) o nitrato marcato con 15N (0,15 mmol/kg) somministrato una volta al giorno per cinque giorni consecutivi come bolo in chow sono stati perfusi con una soluzione di eparina sodica (cloruro di sodio allo 0,9%) prima della raccolta dei tessuti; Tutti i dettagli della collezione sono stati precedentemente pubblicati19. Le concentrazioni di cGMP nei glutei, nei muscoli e nel fegato di quattro suini domestici dello Yorkshire sono state misurate in conformità con il protocollo ELISA descritto. I tessuti epatici sono stati diluiti in un rapporto di diluizione 1:5 e i muscoli glutei in un rapporto di diluizione 1:10, con acido cloridrico (HCl) 0,1 N per precipitare le proteine. Gli omogenati diluiti con HCl sono stati acetilati e quindi diluiti con tampone ELISA in un rapporto di diluizione 1:2 e 1:3 sia per i campioni di fegato che di muscolo gluteo. Le concentrazioni di cGMP sono state misurate come descritto sopra. Le assorbanze sono state convertite in picomoli di cGMP per millilitro di campione preparato e quindi in nanomoli di cGMP per grammo di tessuto (nmol/g di tessuto) come indicato nel protocollo di cui sopra.
Le concentrazioni di cGMP misurate nei tessuti epatici hanno prodotto risultati sperimentali ottimali nelle condizioni di cui sopra. Le concentrazioni di cGMP nel gruppo di controllo e nel gruppo trattato con nitrati nel fegato suino sono rispettivamente 0,0202 nmol/g ± 0,003 nmol/g di tessuto e 0,0364 nmol/g ± 0,011 nmol/g di tessuto (Figura 3). Diversi valori confermano l'affidabilità dei risultati. Le assorbanze dei pozzetti B0 con i bianchi sottratti, che vanno da 0,466 a 0,475, rientrano nell'intervallo da 0,3 UA a 1,0 UA, verificando un sufficiente sviluppo di micropiastre con il reagente di Ellman. L'alta qualità della curva standard è dimostrata sia dagli aumenti incrementali delle assorbanze dallo standard 1 allo standard 8 sia dalla linearità della curva standard, verificata da un coefficiente di determinazione di 0,99. La percentuale <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/68432/68432eq001.jpg" style="margin: auto;"> per ogni pozzetto misurato (31,5%-71,2%) è compresa tra il 20% e l'80%, a conferma del fatto che tutti i campioni rientrano nella curva standard. I campioni che possiedono le caratteristiche indicate sono adatti all'interpretazione.
Le concentrazioni di cGMP misurate nei tessuti muscolari glutei hanno prodotto risultati sperimentali non ottimali. L'etichetta subottimale viene assegnata ai risultati del muscolo gluteo perché la maggior parte dei valori percentuali <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/68432/68432eq001.jpg" style="margin: auto;"> dei pozzetti del muscolo gluteo (3,69%-27,3%) è scesa al di sotto del 20%, indicando che erano necessari campioni più diluiti affinché le assorbanze scendessero sulla curva standard. Le concentrazioni di cGMP nel gruppo di controllo e nel gruppo trattato con nitrati nel muscolo gluteo suino sono rispettivamente di 1,22 nmol/g ± 0,49 nmol/g di tessuto e 0,732 nmol/g ± 0,18 nmol/g di tessuto (grafico non mostrato). I campioni di muscolo gluteo condividono le assorbanze dei pozzetti e degli standard B0 dei campioni di fegato. L'utilizzo di questi campioni non ottimali può portare a conclusioni errate; pertanto, è necessaria la preparazione di campioni più diluiti e la rimisurazione delle concentrazioni di cGMP.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68432/68432fig3v2.jpg"> 
Figura 3: concentrazione di cGMP nel tessuto epatico. La concentrazione media di cGMP di fegato suino trattato con cloruro di sodio (0,15 mmol/kg) o nitrato marcato con 15N (0,15 mmol/kg) in nmol/g di tessuto. n = 4; le barre di errore indicano la deviazione standard; i dati sono stati analizzati dal t-test di Welch; NS sta per nessun significato. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68432/68432fig3v2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

Misurazione della guanosina monofosfato ciclico (cGMP) nei tessuti solidi mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico competitivo (ELISA)

A major pathway that produces cyclic guanosine monophosphate (cGMP) is the nitric oxide (NO)-cGMP pathway. In this pathway, NO stimulates the catalytic ...

measurement-cyclic-guanosine-monophosphate-cgmp-solid-tissues-using

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E 'ampiamente compreso che le forze meccaniche nel corpo può influenzare la differenziazione e proliferazione cellulare. Qui vi presentiamo un protocollo di video che illustra l'uso di una custom-built bioreattore per la distribuzione di tensione uniassiale di trazione ciclica alle cellule staminali coltivate su substrati flessibili micropatterned.

La stimolazione meccanica delle cellule staminali Utilizzando ciclica deformazione uniassiale

Scopri come misurare il cGMP nei tessuti solidi mediante ELISA competitivo. Questo protocollo semplice e riproducibile utilizza campioni di tessuto suino per studiare il metabolismo dell'ossido nitrico e i suoi effetti fisiologici.

Misurazione della guanosina monofosfato ciclico (cGMP) nei tessuti solidi mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico competitivo (ELISA) (Video) | JoVE Journal

Misurazione della guanosina monofosfato ciclico (cGMP) nei tessuti solidi mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico competitivo (ELISA)

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