Conservazione a freddo e trapianto di fegato negli scoiattoli di terra di Dauria adattabili al freddo

Studiamo mammiferi adattati al freddo, come la DGS, per creare metodi migliori di conservazione degli organi. Il nostro obiettivo è comprendere la loro conservazione naturale a freddo e migliorare la conservazione degli organi umani. Il nostro lavoro futuro esplorerà come il livello di ibernazione, il freddo estremo e lo stress utilizzeranno queste conoscenze per migliorare la conservazione degli organi, prolungare i tempi di conservazione e rendere i trapianti più efficaci.

Per cominciare, effettuare l'incisione necessaria che si estenda dal processo xifoide alla simfisi pubica sull'animale anestetizzato. Utilizzare cotton fibs per liberare con cura la vena cava inferiore infraepatica sopra la vena renale destra dai tessuti circostanti dell'animale. Poi, lega le vene surrenali e lombari destre che drenano nella vena cava inferiore vicino al fegato usando suture 7-0.

Isolare l'arteria epatica corretta, l'arteria gastroduodenale e l'arteria epatica comune dai tessuti circostanti usando micropinze. Inserisci un ago endovenoso a sette gauge nell'aorta e fissalo con una pinza. Successivamente, incisi il diaframma per esporre l'aorta toracica e posiziona una pinza vascolare sull'aorta toracica.

Dopo aver perfuso il fegato, incidere la vena cava intratoracica e la vena cava inferiore infraepatica sopra la vena renale destra per permettere al perfuso di drenare. Durante la perfusione, rimuovere la cistifellea usando forbici chirurgiche. Fai una piccola incisione sulla parete anteriore del dotto biliare comune e inserisci lo stent del dotto biliare nel dotto fissandolo con una sutura di seta 7-0.

Ora, usando microforze, isola la vena porta dal tessuto connettivo circostante. Legare e trasettare la vena pilorica con una sutura 7-0 e transettare il tronco della vena porta al livello della vena splenica. Legare e trasettare distalmente l'arteria gastroduodenale e creare una piccola incisione sulla parete anteriore dell'arteria epatica comune.

Inserire lo stent dell'arteria epatica nella comune arteria epatica e fissarla con una sutura di seta 7-0. Isolare la vena diaframmatica sinistra dalla vena cava inferiore sopraepatica e legarla con una sutura 7-0. Dissezionare la vena cava inferiore sopraepatica il più vicino possibile al diaframma utilizzando strumenti chirurgici di precisione.

Lega il legamento epatosplenico usando una sutura 7-0. Fissa la maniglia del bracciale della vena porta con una pinza vascolare e stabilizzala usando le pinze antizanzare. Infila con cura la vena porta attraverso il bracciale, assicurandoti che non sia torta, e piega la vena porta sopra la manetta fissandola con un punto di sutura 7-0.

Lega saldamente il dotto cistico. Posizionare una singola sutura di seta 7-0 attorno alla vena cava inferiore infraepatica tra il braccio attaccato e il lobo inferiore destro del fegato. Inserisci 8-0 suture di sostanza su entrambi gli angoli laterali della vena cava inferiore sopraepatica dall'esterno all'interno.

Passa con attenzione le pinze smussate dietro la vena cava inferiore sopraepatica e posiziona una sutura di seta 7-0 intorno ad essa. Legare il dotto biliare comune prossimalmente con una sutura di seta 7-0 e trasettarlo sopra la legatura. Dopo aver separato il dotto biliare, si trasmette l'arteria gastroduodenale e l'arteria epatica corretta tra le legature.

All'estremità dell'arteria epatica comune, si forma una biforcazione a forma di Y e si lascia una sutura di due centimetri sulla legatura dell'arteria epatica corretta per un uso successivo. Liberare i rami destro e sinistro della vena porta. Poi, posiziona suture di sospensione 7-0 da cinque centimetri su ogni ramo per facilitare la maneggiamento successivo.

Ora si clampa la vena cava inferiore infraepatica sopra la vena renale destra, seguita da una pinzatura della vena portale sopra la vena pilorica. Iniettare 1,5 millilitri di soluzione fisiologica nella vena porta destra entro 10 secondi usando una siringa da due millilitri per eliminare il sangue dal fegato. Per ritrarre il diaframma, tira delicatamente la sutura di seta 7-0 posta attorno alla vena cava inferiore sopraepatica.

Successivamente, applica una pinza bulldog sulla vena cava inferiore sopraepatica, inclusa la porzione del diaframma presente nella pinza. Successivamente, si trasetta la vena cava inferiore sopraepatica appena sopra il fegato. Fissa le suture di sospensione 7-0 su entrambi i rami della vena porta e trasetta la vena porta sopra queste legature.

Successivamente, si trasetta la vena cava inferiore infraepatica vicino al parenchima epatico e si rimuove immediatamente il fegato tagliando eventuali attacchi ligamentosi residui. Sutura la parete posteriore con otto a dieci punti continui a partire dall'angolo sinistro. Continua con la chiusura anteriore della parete usando 10-12 punti spostandosi da destra a sinistra con la stessa sutura.

Per la ricostruzione della vena porta, utilizzare le suture di fermo da cinque centimetri precedentemente posizionate per sollevare delicatamente entrambe le biforcazioni della vena porta applicando una trazione verso l'alto con pinze vasali. Risciacquare il lumen della vena porta con soluzione salina eparinizzata a una concentrazione di 300 unità internazionali per millilitro. Inserisci il bracciale nella vena porta e fissalo usando una sutura di seta 7-0.

Rilasciare sequenzialmente le pinze sulla vena porta e sulla vena cava inferiore sopraepatica per ristabilire la perfusione dell'innesto e concludere la fase anepatica. Successivamente, si effettua una piccola incisione nella biforcazione della configurazione a Y al termine dell'arteria epatica comune del ricevente. Lavare il comune lumen dell'arteria epatica con soluzione salina eparinizzata a 300 unità internazionali per millilitro.

Inserisci lo stent arterioso nell'arteria epatica comune e fissala con un punto di sutura di seta 7-0. Lega i punti di sutura a sstay sia sul lato donatore che su quello ricevente per stabilizzare lo stent e prevenirne lo spostamento. Rilascia la clip microvascolare per ripristinare il flusso sanguigno arterioso.

Successivamente, si effettua una piccola incisione sulla parete anteriore del dotto biliare comune del ricevente. Inserisci lo stent del dotto biliare nel lumen e fissalo usando una sutura di seta 7-0. Infine, lega i punti di sstay sia sui dotti biliari del donatore che di quelli riceventi per mantenere saldamente lo stent in posizione e prevenire lo spostamento.

I destinatari di innesti epatici conservati in soluzione fredda di UW per 24 ore hanno mostrato un tasso di sopravvivenza del 100% a sette giorni dal trapianto, indipendentemente dal fatto che fossero in stato di ibernazione prima del trapianto o meno. Al contrario, tutti i ratti SD che ricevevano innesti epatici da altri ratti SD conservati per 24 ore in soluzione fredda UW sono deceduti entro 12 ore dal trapianto.