Name: Raccolta di liquidi per il lavaggio nasale muino senza contaminazione del sangue (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T15:10:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: Impara un metodo innovativo per raccogliere liquido di lavaggio nasale nei topi senza contaminazione ematica. Questa tecnica faringea con tamponi di cotone garantisce elevati volumi e rilevazione accurata di patogeni respiratori.

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<ol><li>Cortegano, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+nasal+immune+responses+in+non-hospitalized+bronchiolitis+children%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Age-dependent nasal immune responses in non-hospitalized bronchiolitis children.</a> Front Immunol. 13, 1011607(2022).</li>
<li>Yao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+pathogenic+effector+T-cell+activities+in+situ+by+PD-L1+expression+on+respiratory+inflammatory+dendritic+cells+during+respiratory+syncytial+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Control of pathogenic effector T-cell activities in situ by PD-L1 expression on respiratory inflammatory dendritic cells during respiratory syncytial virus infection.</a> Mucosal Immunol. 8 (4), 746-759 (2015).</li>
<li>Gould, V. M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+IgA+provides+protection+against+human+influenza+challenge+in+volunteers+with+low+serum+influenza+antibody+titre%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Nasal IgA provides protection against human influenza challenge in volunteers with low serum influenza antibody titre.</a> Front Microbiol. 8, 900(2017).</li>
<li>Casado, B., Pannell, L. K., Viglio, S., Iadarola, P., Baraniuk, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+sinusitis+nasal+lavage+fluid+proteome+using+capillary+liquid+chromatography+interfaced+to+electrospray+ionization-quadrupole+time+of+flight-tandem+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Analysis of the sinusitis nasal lavage fluid proteome using capillary liquid chromatography interfaced to electrospray ionization-quadrupole time of flight-tandem mass spectrometry.</a> Electrophoresis. 25 (8), 1386-1393 (2004).</li>
<li>Hull, J., Skinner, W., Robertson, C., Phelan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elemental+content+of+airway+surface+liquid+from+infants+with+cystic+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Elemental content of airway surface liquid from infants with cystic fibrosis.</a> Am J Respir Crit Care Med. 157 (1), 10-14 (1998).</li>
<li>Roponen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+mediators+in+nasal+lavage%2C+induced+sputum+and+serum+of+employees+with+rheumatic+and+respiratory+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Inflammatory mediators in nasal lavage, induced sputum and serum of employees with rheumatic and respiratory disorders.</a> Eur Respir J. 18 (3), 542-548 (2001).</li>
<li>Santos Galvão, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+mediators+in+nasal+lavage+among+school-age+children+from+urban+and+rural+areas+in+S%C3%A3o+Paulo%2C+Brazil%5BTitle%5D)+AND+%22S%C3%A3o+Paulo+Med+J%22%5BJournal%5D)">Inflammatory mediators in nasal lavage among school-age children from urban and rural areas in São Paulo, Brazil.</a> São Paulo Med J. 122 (5), 204(2004).</li>
<li>Winkler, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SARS-CoV-2+causes+lung+infection+without+severe+disease+in+human+ACE2+knock-in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">SARS-CoV-2 causes lung infection without severe disease in human ACE2 knock-in mice.</a> J Virol. 96 (1), e01511-e01521 (2022).</li>
<li>Kieran, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+associations+between+viral+titer+measurements+and+disease+outcomes+in+ferrets+inoculated+with+125+contemporary+influenza+A+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Exploring associations between viral titer measurements and disease outcomes in ferrets inoculated with 125 contemporary influenza A viruses.</a> J Virol. 98 (2), e01661-e01723 (2024).</li>
<li>Peden, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+nasal+lavage+for+objective+measurement+of+irritant-induced+nasal+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Regul+Toxicol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The use of nasal lavage for objective measurement of irritant-induced nasal inflammation.</a> Regul Toxicol Pharmacol. 24 (1 II), 68-75 (1996).</li>
<li>Rusznak, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+pollution-induced+allergy+and+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Fr+Allergol+Immunol+Clin%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of pollution-induced allergy and asthma.</a> Rev Fr Allergol Immunol Clin. 38 (7 Suppl. 1), 397-402 (1998).</li>
<li>Laumbach, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+effects+of+a+mixture+of+volatile+organic+compounds+and+their+ozone+oxidation+products%5BTitle%5D)+AND+%22J+Occup+Environ+Med%22%5BJournal%5D)">Nasal effects of a mixture of volatile organic compounds and their ozone oxidation products.</a> J Occup Environ Med. 47 (11), 1182-1189 (2005).</li>
<li>Kawai, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+of+neuraminidase+as+an+antigen+for+nasal+vaccines+to+increase+cross-protection+against+influenza+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">The potential of neuraminidase as an antigen for nasal vaccines to increase cross-protection against influenza viruses.</a> J Virol. 95 (20), 1180-1201 (2021).</li>
<li>Cho, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+eosinophilic+nasal+inflammation+in+a+genetically-mutant+mouse%3A+Comparative+study+with+an+allergic+inflammation+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Spontaneous eosinophilic nasal inflammation in a genetically-mutant mouse: Comparative study with an allergic inflammation model.</a> PLoS One. 7 (4), e35114(2012).</li>
<li>Puchta, A., Verschoor, C. P., Thurn, T., Bowdish, D. M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+inflammatory+responses+during+intranasal+colonization+with+Streptococcus+pneumoniae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Characterization of inflammatory responses during intranasal colonization with Streptococcus pneumoniae.</a> J Vis Exp. (83), e50490(2014).</li>
<li>Ghafouri, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+proteomics+of+nasal+fluid+in+seasonal+allergic+rhinitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">Comparative proteomics of nasal fluid in seasonal allergic rhinitis.</a> J Proteome Res. 5 (2), 330-338 (2006).</li>
<li>Lindahl, M., Ståhlbom, B., Svartz, J., Tagesson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+patterns+of+human+nasal+and+bronchoalveolar+lavage+fluids+analyzed+with+two-dimensional+gel+electrophoresis%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Protein patterns of human nasal and bronchoalveolar lavage fluids analyzed with two-dimensional gel electrophoresis.</a> Electrophoresis. 19 (18), 3222-3229 (1998).</li>
<li>Lindahl, M., Ståhlbom, B., Tagesson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+new+potential+airway+irritation+marker%2C+palate+lung+nasal+epithelial+clone+protein%2C+in+human+nasal+lavage+fluid+with+two-dimensional+electrophoresis+and+matrix-assisted+laser+desorption%2Fionization-time+of+flight%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Identification of a new potential airway irritation marker, palate lung nasal epithelial clone protein, in human nasal lavage fluid with two-dimensional electrophoresis and matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight.</a> Electrophoresis. 22 (9), 1795-1800 (2001).</li>
<li>Schoenebeck, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+preparation+of+nasal+lavage+fluid+%28NLF%29+as+a+noninvasive+sample+for+proteomic+biomarker+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Proteins+Proteomics%22%5BJournal%5D)">Improved preparation of nasal lavage fluid (NLF) as a noninvasive sample for proteomic biomarker discovery.</a> Biochim Biophys Acta Proteins Proteomics. 1854 (7), 741-745 (2015).</li>
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<li>Webb, J. L., Creamer, J. I., Quickenden, T. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+the+presumptive+luminol+test+for+blood+with+four+non-chemiluminescent+forensic+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Luminescence%22%5BJournal%5D)">A comparison of the presumptive luminol test for blood with four non-chemiluminescent forensic techniques.</a> Luminescence. 21 (4), 214-220 (2006).</li>
<li>Ahmad, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+the+role+of+platelets+in+virus-induced+inflammatory+demyelinating+disease+and+myocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Exploring the role of platelets in virus-induced inflammatory demyelinating disease and myocarditis.</a> Int J Mol Sci. 25 (6), 3460(2024).</li>
<li>Olsson, T., Bergström, K., Thore, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sensitive+method+for+determination+of+serum+hemoglobin+based+on+iso-luminol+chemiluminescence%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Chim+Acta%22%5BJournal%5D)">A sensitive method for determination of serum hemoglobin based on iso-luminol chemiluminescence.</a> Clin Chim Acta. 122 (2), 125-133 (1982).</li>
<li>Van der Meer, W., Dinnissen, J. M. B., de Keijzer, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+Sysmex+XT-2000i%2C+a+new+automated+haematology+analyser%5BTitle%5D)+AND+%22Sysmex%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the Sysmex XT-2000i, a new automated haematology analyser.</a> Sysmex. (2002), Available at: https://www.sysmex.co.jp/en/products_solutions/library/journal/vol12_no2/summary03.html (2002).</li>
<li>Oshiro, I., Takenaka, T., Maeda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+method+for+hemoglobin+determination+by+using+sodium+lauryl+sulfate+%28SLS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Biochem%22%5BJournal%5D)">New method for hemoglobin determination by using sodium lauryl sulfate (SLS).</a> Clin Biochem. 15 (2), 83-88 (1982).</li>
<li>Hamaguchi, Y., Oshiro, I., Maeda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+study+on+reaction+mechanism+of+sodium+lauryl+sulfate-hemoglobin+%28SLS-Hb%29%2C+Part+1%5BTitle%5D)+AND+%22Rinsho+Byori%22%5BJournal%5D)">A study on reaction mechanism of sodium lauryl sulfate-hemoglobin (SLS-Hb), Part 1.</a> Rinsho Byori. 40 (6), 649-654 (1992).</li>
<li>McGee, D. W., McMurray, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+protein+malnutrition+on+the+IgA+immune+response+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">The effect of protein malnutrition on the IgA immune response in mice.</a> Immunology. 63 (1), 25(1988).</li>
<li>Castigli, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+IgA+class+switching+in+APRIL-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Impaired IgA class switching in APRIL-deficient mice.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (11), 3903-3908 (2004).</li>
<li>Matsuo, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CCL28-deficient+mice+have+reduced+IgA+antibody-secreting+cells+and+an+altered+microbiota+in+the+colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">CCL28-deficient mice have reduced IgA antibody-secreting cells and an altered microbiota in the colon.</a> J Immunol. 200 (2), 800-809 (2018).</li>
<li>McDonald, K. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+impacts+isolated+lymphoid+follicle+development+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Immun+Ageing%22%5BJournal%5D)">Aging impacts isolated lymphoid follicle development and function.</a> Immun Ageing. 8 (1), 1-12 (2011).</li>
<li>Abolins, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+comparative+immunology+of+wild+and+laboratory+mice%2C+Mus+musculus+domesticus%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">The comparative immunology of wild and laboratory mice, Mus musculus domesticus.</a> Nat Commun. 8 (1), 1-13 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Ago per fissazione animale</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd., Tokyo, Giappone</td><td>KN-358-A</td><td>Abbiamo fissato un topo con aghi per la fissazione animale. Acciaio inossidabile; lunghezza totale, 23 mm; e punta dell'ago, 15 mm.</td></tr><tr><td>BD OptEIATM&nbsp; Set di reagenti per substrato TMB</td><td>BD Biosciences, San Diego, CA, USA</td><td>555214</td><td>Abbiamo aggiunto 100 &mu; L di soluzione di substrato TMB per pozzetto.</td></tr><tr><td>Campana di vetro</td><td>NA</td><td>NA Abbiamo</td><td>usato una campana di vetro per l'anestesia.</td></tr><tr><td>Piastre a 96 pozzetti trasparenti a fondo piatto non sterili&nbsp;</td><td>ThermoFisher Scientific, Rochester, NY, USA</td><td>442404</td><td>Abbiamo utilizzato piastre a 96 pozzetti Clear Flat-Bottom Immuno Nonsterile con trattamento superficiale MaxiSorp per saggi di immunoassorbimento enzimatico.</td></tr><tr><td>Batuffolo di cotone</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Giappone</td><td>94-1951</td><td>Abbiamo usato batuffoli di cotone per evitare la contaminazione del sangue. Il diametro dei batuffoli di cotone era di 7 mm.</td></tr><tr><td>Siero fetale bovino</td><td>Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA</td><td>172012-500 ML</td><td>Abbiamo aggiunto il 10% di siero fetale bovino al diluente del saggio.</td></tr><tr><td>Forcipe (Micro pinzette per esperimenti di ricerca, punta curva)</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Giappone</td><td>91-1506</td><td>Abbiamo usato le pinze per la dissezione. Modello, HSC 551-10; e su tutta la lunghezza, 105 mm.</td></tr><tr><td>Forcipe (pinzette di precisione)</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Giappone</td><td>91-2772</td><td>Abbiamo usato il forcipe per la dissezione. Modello, HSC 607-12; tutta la lunghezza complessiva, 120 mm; e diametro della punta, 0,3 mm.</td></tr><tr><td>Capra Anti-Topo IgA-UNLB</td><td>SouthernBiotech, Birmingham, AL, USA</td><td>1040-01</td><td>Abbiamo rivestito Clear-Flat-Bottom Immuno Nonsterile 96-Well Plates con 100 &mu; L/pozzetto (20 ng/pozzetto) di immunoglobulina A totale.</td></tr><tr><td>Isoflurano&nbsp;</td><td>Viatris Inc., Canonsburg, PA, USA</td><td>NA</td><td>Abbiamo usato l'isoflurano per l'anestesia.</td></tr><tr><td>Set di reagenti per la retrazione del luminol</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation, Osaka, Giappone</td><td>124-06511</td><td>Abbiamo utilizzato un set di reagenti per la reazione del luminol per rilevare l'emoglobina nei campioni NLF.</td></tr><tr><td>Microtube</td><td>Watson Co., Ltd., Tokyo, Giappone</td><td>131-7155C</td><td>Abbiamo utilizzato microprovette per la raccolta di NLF e BALF (microprovette da 1,5 mL con tappo di bloccaggio, fondo rotondo, tappo soft touch).</td></tr><tr><td>Milli-Q acqua</td><td>Merck KGaA, Darmstadt, Germania</td><td>Milli-Q Direct 8</td><td>Abbiamo utilizzato l'acqua MilliQ per realizzare una soluzione di rezione in luminol.</td></tr><tr><td>Mini-Shaker PSU-2T</td><td>Biosan Ltd., Riga, Lettonia</td><td>PSU-2T</td><td>Abbiamo agitato piastre a 96 pozzetti utilizzando il Mini-Shaler PSU-2T.</td></tr><tr><td>Ceppo di topo</td><td>CLEA Japan, Inc., Tokyo, Giappone</td><td>NA</td><td>abbiamo usato topi maschi C57BL/6 di 4 mesi.</td></tr><tr><td>Nunc MicroWell 96-Well, Nunclon Delta-Treatated, Micropiastra a fondo piatto</td><td>Thermo Fisher Scientific Nunc A/S . Kamstrupvej,Roskilde, Danimarca</td><td>136101</td><td>Per il test del luminol abbiamo utilizzato la micropiastra NuncTM MicroWellTM 96-Well, Nunclon con trattamento Delta, a fondo piatto.</td></tr><tr><td>AffiniAffiniPure F(ab')2 Frammento di capra IgG anti-topo, F(ab')2 Frammento specifico (reazione crociata minima alle proteine del siero umano, bovino e cavallo)</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc., West Grove, PA, USA</td><td>115-036-072</td><td>Abbiamo aggiunto 100 &mu; L del frammento AffiniPure F(ab')2 coniugato con perossidasi anti-topo IgG di capra, F(ab')2 frammento specifico, come anticorpo di rilevamento (diluizione di 10.000 volte) per ciascun pozzetto.</td></tr><tr><td>Soluzione salina tamponata con fosfato</td><td>Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA</td><td>D8537-500ML</td><td>Abbiamo utilizzato la soluzione salina tamponata con fosfato di Dulbecco (modificata senza cloruro di calcio e cloruro di magnesio, liquida, filtrata in modo sterile, adatta per la coltura cellulare) per la raccolta di NLF e BALF.</td></tr><tr><td>Pipetta&nbsp;</td><td>Watson Co., Ltd., Tokyo, Giappone</td><td>NA</td><td>Abbiamo usato un 200-&mu; L. pipetta per lavaggio nasale.</td></tr><tr><td>Puntale per pipetta</td><td>Watson Co., Ltd., Tokyo, Giappone</td><td>NA</td><td>Abbiamo usato un 200-&mu; L punta per pipetta multifit per lavaggio nasale.</td></tr><tr><td>Poliossietilene(20) Monolaurato di sorbitano (Tween 20)</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation, Osaka, Giappone</td><td>167-11515</td><td>Abbiamo aggiunto lo 0,05% di Tween 20 al tampone di lavaggio e lo 0,2% di Tween 20 al diluente del saggio.</td></tr><tr><td>Anticorpo IgG (reattività x minima) di capra purificata</td><td>BioLegend, San Diego, CA, USA</td><td>405301</td><td>Abbiamo rivestito piastre a 96 pozzetti Clear Flat-Bottom Immuno Nonsterile con 100 &mu; L/pozzetto (10 ng/pozzetto) di immunoglobulina totale G.</td></tr><tr><td>Forbici piccole, a doppia punta</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Giappone</td><td>91-7005</td><td>Abbiamo usato le forbici per la dissezione. Modello, S-4A; e complessivamente tutta la lunghezza, 115 mm.</td></tr><tr><td>Acido solforico</td><td>Wako Pure Chemical Industries, Ltd, Tokyo, Giappone</td><td>192-04755</td><td>Abbiamo aggiunto 50 &mu; L di acido solforico 2 N a ciascun pozzetto per fermare la reazione.</td></tr><tr><td>Catetere endovenoso Surflo&nbsp;</td><td>Terumo Corporation, Tokyo, Giappone</td><td>SR-FS2032</td><td>Abbiamo utilizzato un catetere endovenoso surflo e iniettato PBS nella trachea per il lavaggio broncoalveolare. Catetere, 20G; lunghezza del catetere, 32 mm; diametro interno del catetere, 0,80 mm; diametro esterno del catetere, 1,1 mm; e needel interno, 22G.</td></tr><tr><td>Forbici diritte chirurgiche</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Giappone</td><td>91-7004</td><td>Abbiamo usato le forbici per la dissezione. Modello, S-3B; e su tutta la lunghezza, 120 mm.</td></tr><tr><td>Piastra chirurgica</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd., Tokyo, Giappone</td><td>KN-321-B</td><td>Abbiamo usato un pannello di sughero per la dissezione. Profondità, 20 cm; larghezza, 15 cm; e altezza 3 cm.</td></tr><tr><td>Lettore di micropiastre multimodale ibrido Synergy H1&nbsp;</td><td>Agilent Technologies, Inc., Santa Clara, CA, USA</td><td>NA</td><td>Abbiamo misurato l'assorbanza dei campioni a 450 nm, utilizzando il lettore di micropiastre multimodale ibrido Synergy H1.</td></tr><tr><td>Siringa</td><td>Terumo Corporation, Tokyo, Giappone&nbsp;</td><td>SS-01T</td><td>Abbiamo utilizzato una siringa da 1 ml per il prelievo di sangue dal cuore.</td></tr><tr><td>Filettatura</td><td>&nbsp; Niccho Kogyo Co., Ltd. Tokyo Giappone</td><td>NA</td><td>Abbiamo legato un catetere con un filo per garantire il corretto posizionamento durante la procedura.</td></tr></tbody></table>

raccolta di liquidi per il lavaggio nasale muino senza contaminazione del sangue

Murine Nasal Lavage Fluid Collection without Blood Contamination

Utilizzando il metodo convenzionale o innovativo, i campioni di NLF sono stati raccolti da topi C57BL/6 attraverso la via transfaringea. Come mostrato nella Figura 1, i campioni NLF raccolti con il metodo convenzionale erano leggermente sfumati di rosa (Figura 1A); i campioni di NLF raccolti con il nuovo metodo erano chiari (Figura 1B). Poiché la differenza sembrava derivare dalla contaminazione del sangue nei campioni NLF con il me...

Raccolta di liquidi per il lavaggio nasale muino senza contaminazione del sangue

Upper airway samples, including nasal lavage fluid (NLF) and nasal swabs, are useful in detecting pathogens, including viruses and bacteria, which can ...

murine-nasal-lavage-fluid-collection-without-blood-contamination

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Immunology and Infection

Immunologia e Infezioni

Fonte: Venuprasad, K., et al. Somministrazione intratracheale di Haemophilus influenzae in modelli murini per studiare l'infiammazione delle vie aeree. J. Vis. Exp. (2016)Questo video mostra la raccolta e l'elaborazione del liquido di lavaggio broncoalveolare da un topo eutanasia infetto da Haemophilus influenzae non tipizzabile per l'analisi a valle.

Raccolta di liquido di lavaggio broncoalveolare da un modello murino infetto da Haemophilus influenzae non tipizzabile

Questo video dimostra l'uso della citometria a flusso per identificare e contare varie cellule immunitarie nel liquido di lavaggio broncoalveolare. Inizialmente, le singole cellule immunitarie vengono identificate utilizzando un colorante di vitalità, seguito dalla colorazione differenziale delle proteine marcatrici di superficie, consentendo l'enumerazione precisa di ciascun tipo di cellula.

Identificazione ed enumerazione delle cellule immunitarie nel liquido di lavaggio broncoalveolare mediante citometria a flusso

Viene descritta la colonizzazione del nasofaringe murino con streptococco pneumoniae e la successiva estrazione di cellule aderenti o reclutate. Questa tecnica prevede il lavaggio del nasofaringe e la raccolta del fluido attraverso i nares ed è adattabile per varie letture, tra cui la quantificazione differenziale delle cellule e l'analisi dell'espressione dell'mRNA in situ.

Caratterizzazione delle risposte infiammatorie durante la colonizzazione intranasale con streptococco pneumoniae

Lo stato di salute del polmone si riflette il tipo e il numero di cellule immunitarie che sono presenti nei bronchioli dei polmoni. Descriviamo una tecnica di lavaggio broncoalveolare che consente di isolare e studio delle cellule non aderenti e fattori solubili dal tratto respiratorio inferiore dei topi.

Lavaggio broncoalveolare murini di polmoni per analizzare infiammatoria infiltrazione cellulare

Questo protocollo descrive una tecnica non invasiva per il campionamento del liquido di rivestimento mucoso indisturbati dalle vie respiratorie superiori. Può essere utilizzato per eseguire la quantificazione dei livelli in vivo dei mediatori di proteina, quali citochine e chemochine, in soggetti di tutte le età.

Campionamento non invasivo del rivestimento mucoso fluido per la quantificazione dei livelli di Immune-mediatore In Vivo delle vie respiratorie superiore

Questo manoscritto descrive l'uso di tecniche di assorbimento nasali e bronchiali, in particolare utilizzando matrici assorbenti sintetici (SAM) per assaggiare il liquido di rivestimento mucoso (MLF) delle vie respiratorie superiori e inferiori. Questi metodi forniscono maggiore standardizzazione e tollerabilità rispetto alle tecniche respiratorie campionamento esistenti.

Assorbimento di liquidi nasali e bronchiali: precisione campionamento della Mucosa respiratoria umana e laboratorio di lavorazione dei campioni

Questo protocollo descrive una tecnica migliore per la raccolta abbondante di liquido cerebrospinale (CSF) senza contaminazione da sangue. Con una maggiore raccolta di campioni e purezza, altre analisi possono essere eseguite utilizzando CSF per avanzare la nostra comprensione delle malattie che colpiscono il cervello e il midollo spinale.

Un metodo migliore per la raccolta di liquido cerebrospinale da topi anestetizzati

La presente comunicazione descrive le metodologie di isolamento e coltura dei macrofagi alveolari da esseri umani e modelli murini per scopi sperimentali.

Isolamento e coltura In Vitro dei macrofagi alveolari murini ed umani

Il lavaggio nasale salino può essere utilizzato per campionare il microambiente immunitario nasale canino. Poiché l'approccio è relativamente non invasivo e non interrompe i tessuti nasali, può essere eseguito in serie. Le cellule e le proteine raccolte con la tecnica di lavaggio nasale possono essere processate per varie analisi di laboratorio.

Lavaggio salino per il campionamento del microambiente immunitario nasale canino

Qui, presentiamo un protocollo per una tecnica di raccolta del sangue ottimizzata in soggetti murini attraverso la venipuntura venosa facciale utilizzando una lancetta. Utilizziamo questa tecnica insieme alla valutazione citofluorimetrica per caratterizzare i fenotipi cellulari di ceppi transgenici, congenici e reporter. È adatto anche per l'analisi delle citochine sieriche e gli studi sul diabete.

Vena facciale Venipuncture per la raccolta del sangue murino

Impara un metodo innovativo per raccogliere liquido di lavaggio nasale nei topi senza contaminazione ematica. Questa tecnica faringea con tamponi di cotone garantisce elevati volumi e rilevazione accurata di patogeni respiratori.

Raccolta di liquidi per il lavaggio nasale muino senza contaminazione del sangue

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