3 luglio 2025
La microscopia confocale in vivo è una tecnica di imaging promettente ad alta risoluzione. Presentiamo la seguente procedura per i medici per rilevare Demodex al margine palpebrale in vivo.
Stiamo sviluppando un protocollo standardizzato di microscopia confocale in vivo per rilevare la palpebra degli acari demodex per espanderne l'adozione clinica. Stiamo regolando il protocollo IVCM standardizzato, che limita il rilevamento degli acari demodex in vivo nella pratica clinica. Fornisce un rilevamento in vivo non invasivo, indolore e rapido con un facile follow-up, eliminando il dolore dell'appellativo e i problemi lievi residui.
[Narratore] Per iniziare, pulire l'obiettivo del dispositivo utilizzando salviette per la pulizia delle lenti. Utilizzare batuffoli di cotone imbevuti di alcol per disinfettare accuratamente il poggiatesta e la mentoniera. Premere insieme le due leve nere e tirare in avanti la mentoniera finché non si blocca per assicurarsi che sia nella posizione orizzontale corretta. Ora, ruotare la vite di regolazione per allontanare la telecamera dal paziente prima dell'esame. Applicare circa 0,02 millilitri di gel oftalmico a base di carbomero sulla superficie anteriore della lente del microscopio del dispositivo. Quindi, rimuovere un tappo sterile monouso in polimetilmetacrilato dal suo coperchio protettivo. Premere saldamente i lati del cappuccio sulla lente del microscopio senza toccare la superficie anteriore. Quindi, applicare una goccia di sostituto lacrimale in gel sulla superficie anteriore del cappuccio. Creare una nuova cartella del paziente nel software. Ora, applicare una goccia di proparacaina cloridrato sul margine della palpebra da esaminare. Spostare la telecamera di scansione a sinistra dal punto di vista dell'operatore. Quindi, ruotare l'obiettivo della telecamera CCD per regolare l'immagine di controllo perpendicolarmente all'asse ottico della telecamera laser dello scanner. Inizia un nuovo esame utilizzando il software. Nella scheda Dati esame, selezionare Heidelberg Retina Tomograph Cornea dall'elenco a discesa Dispositivo e osservare la finestra di dialogo Impostazioni modulo cornea. Scegliere FOV 400 dall'elenco a discesa Obiettivo campo e fare clic su OK per confermare. Quindi, attendere l'apertura della finestra di acquisizione e verificare la visualizzazione dell'immagine dal vivo della telecamera laser a scansione e dell'immagine di controllo. Quindi, imposta i fattori nella finestra di acquisizione. Selezionare 1x dal menu a discesa Fattore di zoom CCD per impostare la dimensione dell'immagine di controllo. Selezionare le caselle di luminosità automatica e automatica per abilitare il controllo automatico della luminosità. Assicurarsi che la sezione Tipo di scansione sia selezionata. Per acquisire un'immagine di riferimento, disattivare il controllo automatico della luminosità. Quindi regolare il piano focale con il perno di regolazione fino a quando l'immagine dal vivo non si scurisce e, successivamente, appare un riflesso luminoso, che indica la superficie anteriore del cappuccio in polimetilmetacrilato. Fare clic su Ripristina nella sezione Micrometro posizione di messa a fuoco e attendere che il valore raggiunga lo 0. Quindi, seleziona la casella Luminosità automatica e disattiva il ripristino automatico. A questo punto, regolare l'altezza del lettino da visita. Posizionare il mento del paziente sulla mentoniera e la fronte contro il poggiafronte. Regolare l'elevazione della mentoniera utilizzando la vite nera in modo che le palpebre superiori del paziente siano allineate con i segni rossi sulla colonna del poggiatesta. Istruire il paziente a guardare verso il basso verso la fonte di luce fissa e a mantenere uno sguardo fisso. Con un batuffolo di cotone, capovolgere la palpebra superiore ed esporre completamente la radice delle ciglia e il margine palpebrale. Ruotare la vite di regolazione per allineare la riflessione del raggio laser all'altezza della palpebra superiore. Quindi, spostare la fotocamera laser a scansione fino a quando il margine superiore della palpebra non tocca delicatamente il centro del cappuccio in polimetilmetacrilato. Scansiona attentamente la radice delle ciglia dal lato temporale a quello nasale utilizzando minuti movimenti orizzontali del margine palpebrale. Ruotare la lente del microscopio in senso orario o antiorario per modificare la messa a fuoco e osservare interi follicoli e radici. Registrare tutte le immagini sospette di demodex utilizzando il pedale. Dopo aver terminato l'esame, selezionare Ordina per tempo di acquisizione veloce nella finestra di dialogo Opzioni per visualizzare le immagini dal lato temporale a quello nasale. Nel 2024, il numero di soggetti sottoposti a microscopia confocale in vivo per il rilevamento del demodex è aumentato significativamente in tutte le fasce d'età rispetto al 2023, con il numero più alto osservato nella fascia di età compresa tra i 21 e i 30 anni. La procedura operativa standard introdotta nel 2024 ha consentito l'inclusione di soggetti di età compresa tra i quattro anni e gli oltre 90 anni.
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Questo articolo presenta un protocollo standardizzato di microscopia confocale in vivo per la rilevazione degli acari Demodex al margine palpebrale. Il metodo è non invasivo e mira a favorire l'adozione clinica.
La microscopia confocale in vivo (IVCM) standardizzata per il rilevamento degli acari Demodex al margine palpebrale soddisfa un'esigenza fondamentale di imaging non invasivo, riproducibile e quantitativo nella ricerca sulla superficie oculare. Questo protocollo consente una valutazione rapida e indolore su un'ampia gamma di età, favorendo la continuità traslazionale e riducendo la variabilità procedurale nei flussi di lavoro della scoperta precoce e della validazione clinica. L'adozione dell'IVCM migliora la fiducia predittiva nei modelli di malattia oculare e facilita la standardizzazione su scala aziendale per garantire la comparabilità tra studi.
IVCM si integra nel percorso dalla scoperta alla fase preclinica fornendo una modalità di imaging standardizzata e quantitativa per la ricerca sulla superficie oculare e per lo screening anti-parassitario.