Name: Un saggio microscopico sul cloruro di 2,3,5-trifeniltetrazolio per unanalisi accurata e affidabile della lesione miocardica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-28T12:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 17 s
Description: Impara un saggio microscopico TTC per analizzare lesioni miocardiche con elevata precisione. Questo metodo migliora la qualità delle immagini e consente una valutazione accurata della viabilità dei cardiomiociti.

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<ol><li>Bolli, R., Becker, L., Gross, G., Mentzer, R., Balshaw, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+protection+at+a+crossroads%3A+the+need+for+translation+into+clinical+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Myocardial protection at a crossroads: the need for translation into clinical therapy.</a> Circ Res. 95 (2), 125-134 (2004).</li>
<li>Murphy, E., Steenbergen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+acute+protection+from+cardiac+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying acute protection from cardiac ischemia-reperfusion injury.</a> Physiol Rev. 88 (2), 581-609 (2008).</li>
<li>Bohl, S., Medway, D. J., Schulz-Menger, J., Schneider, J. E., Neubauer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+approach+for+quantification+of+in+vivo+ischemia-reperfusion+injury+in+the+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Refined approach for quantification of in vivo ischemia-reperfusion injury in the mouse heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (6), H2054-H2058 (2009).</li>
<li>Liepinsh, E., Kuka, J., Zvejniece, L., Vilskersts, R., Dambrova, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+heart+and+brain+tissue+preparation+for+digital+macro+photography+after+ischemia-reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rodent heart and brain tissue preparation for digital macro photography after ischemia-reperfusion.</a> J Vis Exp. (180), e62942(2022).</li>
<li>Kim, S. -C., Boehm, O., Meyer, R., Hoeft, A., Knüfermann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> J Vis Exp. (65), e3896(2012).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+experimental+models+of+myocardial+ischemia+and+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for experimental models of myocardial ischemia and infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 314 (4), H812-H838 (2018).</li>
<li>Ding, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+refined+TTC+assay+precisely+detects+cardiac+injury+and+cellular+viability+in+the+infarcted+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A refined TTC assay precisely detects cardiac injury and cellular viability in the infarcted mouse heart.</a> Sci Rep. 14 (1), 25214(2024).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-6+coaxes+cellular+dedifferentiation+as+a+pro-regenerative+intermediate+that+contributes+to+pericardial+ADSC-induced+cardiac+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">IL-6 coaxes cellular dedifferentiation as a pro-regenerative intermediate that contributes to pericardial ADSC-induced cardiac repair.</a> Stem Cell Res Ther. 13 (1), 44(2022).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sfrp1+as+a+pivotal+paracrine+factor+in+the+trained+pericardial+stem+cells+that+foster+reparative+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Sfrp1 as a pivotal paracrine factor in the trained pericardial stem cells that foster reparative activity.</a> Stem Cells Transl Med. 13 (2), 137-150 (2023).</li>
<li>Yellon, D. M., Hausenloy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Myocardial reperfusion injury.</a> N Engl J Med. 357, 1121-1135 (2007).</li>
<li>Li, C., Chen, M., Zhang, D., Xu, T., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+injury+induced+by+obstructive+jaundice%3A+a+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiac injury induced by obstructive jaundice: a comprehensive review.</a> Perioper Precis Med. 28 (1), 28-38 (2025).</li>
<li>Chang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%C3%9F-tubulin+contributes+to+Tongyang+Huoxue+decoction-induced+protection+against+hypoxia%2Freoxygenation-induced+injury+of+sinoatrial+node+cells+through+SIRT1-mediated+regulation+of+mitochondrial+quality+surveillance%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">ß-tubulin contributes to Tongyang Huoxue decoction-induced protection against hypoxia/reoxygenation-induced injury of sinoatrial node cells through SIRT1-mediated regulation of mitochondrial quality surveillance.</a> Phytomedicine. 108, 154502(2023).</li>
<li>Li, Z., Hu, B., Zou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+advances+in+understanding+the+role+and+mechanism+of+pyroptosis+in+myocardial+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Research advances in understanding the role and mechanism of pyroptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Perioper Precis Med. 2 (2), 52-63 (2024).</li>
<li>Ouyang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+immunostaining-based+approach+for+assessing+myocardial+viability+in+the+infarcted+mouse+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">An immunostaining-based approach for assessing myocardial viability in the infarcted mouse hearts.</a> Front Cardiovasc Med. 12, 1598314(2025).</li>
<li>Benedek, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+TTC+staining+for+the+evaluation+of+tissue+injury+in+the+early+phases+of+reperfusion+after+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats.</a> Brain Res. 1116 (1), 159-165 (2006).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+in+vivo+mouse+models+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for in vivo mouse models of myocardial infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 321 (6), H1056-H1073 (2021).</li>
<li>Lujan, H. L., Janbaih, H., Feng, H. -Z., Jin, J. -P., DiCarlo, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+ischemia%2C+reperfusion%2C+and+infarction+in+chronically+instrumented%2C+intact%2C+conscious%2C+and+unrestrained+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial ischemia, reperfusion, and infarction in chronically instrumented, intact, conscious, and unrestrained mice.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 302 (12), R1384-R1400 (2012).</li>
<li>Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarct+size+and+area+at+risk+assessment+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarct size and area at risk assessment in mice.</a> Exp Clin Cardiol. 17 (4), 268-272 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Obiettivo 1,25x</td><td>Olympus</td><td>PlanApo 1.25X/0.04</td><td>Imaging</td></tr><tr><td>Siringhe da 10 mL</td><td>B.Braum</td><td>4617100V</td><td>Retroperfusione</td></tr><tr><td>2,3,5-cloruro trifeniltetrazolio</td><td>Milipore</td><td>1.08380.0100</td><td>Sostanze chimiche</td></tr><tr><td>Cannula da 20 G</td><td>BD</td><td>305895</td><td>Retroperfusione</td></tr><tr><td>3&nbsp; mL Siringhe</td><td>B.Braum</td><td>4617022V</td><td>Retroperfusione</td></tr><tr><td>Rubinetto di fermata a 3 vie</td><td>B.Braum</td><td>16494C</td><td>Retroperfusione</td></tr><tr><td>Aquamount&nbsp;</td><td>BDH</td><td>362262H</td><td>Cirosezione</td></tr><tr><td>Bilanciamento</td><td>Ohaus</td><td>N/A</td><td>Pesatura dei prodotti chimici</td></tr><tr><td>Microscopio binocolo</td><td>Leica</td><td>MZ6</td><td>Canulazione</td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>Janvier</td><td>N/A</td><td>Animali</td></tr><tr><td>Fotocamera</td><td>Olympus</td><td>UC30</td><td>Imaging</td></tr><tr><td>Scoperte di copertura</td><td>Epredia</td><td>BB02400500A113MN20</td><td>Cirosezione</td></tr><tr><td>Criostato</td><td>Leica</td><td>M850</td><td>Cirosezione</td></tr><tr><td>Acqua Doppia Distillata</td><td>MIlipore</td><td>N/A</td><td>Sostanze chimiche dissolventi</td></tr><tr><td>Forbici fine per sezionare</td><td>AESCULAP</td><td>BC702R</td><td>Strumenti chirurgici</td></tr><tr><td>Pinza fine microdissezionale &nbsp;</td><td>AESCULAP</td><td>FM001R</td><td>Strumenti chirurgici</td></tr><tr><td>Vetri per microscopio in vetro</td><td>Engelbrecht</td><td>11102</td><td>Cirosezione</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td>1,54g</td><td>Elaborazione dell'imaging</td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Piramal</td><td>14150097146754</td><td>Sostanze chimiche</td></tr><tr><td>Isopropanolo</td><td>Roth</td><td>&nbsp; 0733.1</td><td>Sostanze chimiche</td></tr><tr><td>Microscopio ottico</td><td>Olympus</td><td>BX61</td><td>Imaging</td></tr><tr><td>Micro-dissezionamento delle pinzeps &nbsp;</td><td>F.S.T</td><td>11152-10</td><td>Strumenti chirurgici</td></tr><tr><td>Composto OCT</td><td>Sakura</td><td>4583</td><td>Sostanze chimiche</td></tr><tr><td>Piastra di Petri</td><td>Therno Scientific</td><td>172931</td><td>Retroperfusione</td></tr><tr><td>Soluzione salina tamponata con fosfato</td><td>Roth</td><td>9143.1</td><td>Sostanze chimiche</td></tr><tr><td>Rstudio</td><td>Posit Software</td><td>2024.09.0</td><td>Elaborazione dell'imaging</td></tr><tr><td>Sutura di seta</td><td>F.S.T</td><td>18020-60</td><td>Retroperfusione</td></tr><tr><td>Software</td><td>Olympus</td><td>CellSens V3.2</td><td>Imaging</td></tr><tr><td>Forbici in acciaio inox per dissezione</td><td>AESCULAP</td><td>BC257R</td><td>Strumenti chirurgici</td></tr><tr><td>Soluzione di Zamboni</td><td>Morphisto</td><td>12773.0050</td><td>Sostanze chimiche</td></tr></tbody></table>

un saggio microscopico sul cloruro di 2,3,5-trifeniltetrazolio per un'analisi accurata e affidabile della lesione miocardica

A Microscopic 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride Assay for Accurate and Reliable Analysis of Myocardial Injury

Un saggio microscopico sul cloruro di 2,3,5-trifeniltetrazolio per un'analisi accurata e affidabile della lesione miocardica

In this protocol, we present a refined 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride (TTC)-based method for the accurate and reliable analysis of myocardial ...

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Biomarcatori di misura in campioni biologici complessi è sempre più guidando il processo decisionale clinico. Descriviamo un metodo altamente sensibile per misurare simultaneamente miosina cardiaca legame proteina-C, creatina chinasi MB e troponina I cardiaca in campioni di siero di soggetti con infarto miocardico e di soggetti sani di controllo.

Un metodo di quantificazione sensibile e specifico per la determinazione del siero miosina cardiaca Binding Protein-C da elettrochemiluminescenza immunoenzimatico

Viene descritto un modello altamente riproducibile per l'infarto del miocardio nei topi con manipolazioni minimamente invasive. Il modello può essere facilmente eseguito, con conseguente elevata riproducibilità e tasso di sopravvivenza. Pertanto, il modello descritto ridurrà il numero di animali necessari come richiesto dal principio delle 3R (Sostituzione, Perfezionamento e Riduzione).

Minimal procedura chirurgica invasiva di indurre infarto miocardico nei topi

Questo metodo delinea l'uso della tomografia micro-computerizzata quantistica (MicroCT) per valutare la morfologia cardiaca, la funzione, la perfusione, il metabolismo e la vitalità con l'agente di contrasto iodato nei topi con ischemia miocardica indotta sperimentalmente. La tecnica può essere applicata per l'imaging longitudinale in vivo non distruttivo ad alto rendimento di vari modelli animali di cardiopatia umana.

In Vivo quantitativa valutazione della struttura del miocardio, la funzione, la perfusione e sostenibilità Utilizzando cardiaca micro-tomografia computerizzata

Viene descritto un modello di ratto di costrizione dell'aorta addominale che induce ipertrofia cardiaca e rimodellamento. Un metodo efficiente, altamente riproducibile e minimamente invasivo viene utilizzato per fornire una piattaforma semplice ma utile per la ricerca sull'ipertrofia e la disfunzione miocardica.

Un modello di rimodellamento cardiaco Attraverso Costrizione del Aorta addominale in Rats

La valutazione post-mortem dell'infarto del miocardio (MI) nei roditori si basa sulla quantificazione dell'infarto su sezioni di cuore colorate. Descriviamo un metodo accurato per quantificare le dimensioni dell'infarto utilizzando il campionamento sistematico di cuori di ratto raccolti dalla base all'apice e l'analisi delle immagini di sezioni istologiche colorate con tricrombi.

Quantificazione istologica di cronica Myocardial Infarto in Rats

Questo protocollo descrive un nuovo metodo per il confronto 3D del tessuto miocardico con tutto il cuore con la risonanza magnetica. Questo è progettato per la valutazione accurata di iniezioni intramiocardici nella zona infartuata confine di un modello suino cronica di infarto miocardico.

3D Whole-cuore Analisi tessuto miocardico

Qui dimostriamo un protocollo per standardizzare le procedure di campionamento di un modello porcino stabilito di infarto miocardico acuto al fine di aumentarne il valore traslazionale nella comprensione della patofisiologia della lesione del miocardio di ischemia/riperfusione e per testare nuovi farmaci candidati.

Miglioramento di un modello di infarto miocardico porcina cassa chiusa tramite la normalizzazione del tessuto e le procedure di campionamento di sangue

Qui, presentiamo un protocollo che utilizza la tintura JC-1 per valutare il potenziale di membrana mitocondriale delle cellule dopo l'esposizione all'ipossia/riossigenazione con o senza un agente protettivo.

Un'analisi basata su citometria a flusso per misurare il potenziale di membrana mitocondriale in miociti cardiaci dopo ipossia/riossigenazione

In anestesia adeguata, il cuore del topo è stato esternalizzato attraverso lo spazio intercostale e l'infarto del miocardio è stato indotto con successo legando l'arteria discendente anteriore sinistra (LAD) utilizzando materiali prontamente disponibili nella maggior parte dei laboratori.

Un metodo semplice modificato per l'induzione dell'infarto miocardico nei topi

Questo studio indaga gli effetti cardioprotettivi di Munziq, un preparato erboristico tradizionale uiguro, sul danno da ischemia-riperfusione miocardica (MIRI) nei ratti con fluidi corporei anormali. Attraverso metodi sperimentali completi, dimostriamo il potenziale di Munziq nel mitigare la MIRI sopprimendo la via di segnalazione NF-κB.

Il Munziq a base di erbe migliora il danno da ischemia-riperfusione miocardica inibendo l'infiammazione

La ricostruzione tridimensionale (3D) del danno cardiaco nell'infarto miocardico acuto riperfuso (repAMI) consente una quantificazione e una co-localizzazione fedeli dei modelli associati che influenzano la malattia. In questo caso, viene fornito un approccio automatizzabile di imaging guidato da foglio luminoso per la misurazione contemporanea del danno cardiaco, dell'area a rischio e della risposta delle cellule immunitarie.

Analisi 3D simultanea del danno cardiaco e della risposta immunitaria nell'infarto miocardico acuto riperfuso mediante microscopia a fluorescenza a foglio di luce

Impara un saggio microscopico TTC per analizzare lesioni miocardiche con elevata precisione. Questo metodo migliora la qualità delle immagini e consente una valutazione accurata della viabilità dei cardiomiociti.

Un saggio microscopico sul cloruro di 2,3,5-trifeniltetrazolio per un'analisi accurata e affidabile della lesione miocardica

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