Name: Istituzione di un sistema di allevamento per il controllo della virulenza dei funghi entomopatogeni (Scirtothrips dorsalis hood) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-18T15:50:00.000+00:00
Duration: 11 min 35 s
Description: Impara un protocollo di bioassay su foglia staccata per allevare Scirtothrips dorsalis in contenitori di vetro con agar. Questo metodo garantisce alta sopravvivenza e sviluppo sincronizzato delle larve di II stadio per lo screening della virulenza dei funghi entomopatogeni.

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<ol><li>Kumar, V., Kakkar, G., McKenzie, C. L., Seal, D. R., Osborne, L. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKumar%2C+V+%22Weed+and+pest+control-conventional+and+new+challenges%22">Weed and pest control-conventional and new challenges</a>. , 53-77 (2013).</li>
<li>Hoddle, M. Scirtothrips dorsalis (chilli thrips). <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHoddle%2C+M+%22CABI+Compendium%22">CABI Compendium</a>. , Wallingford, CT, USA. (2022).</li>
<li>Liburd, O. E., Panthi, B. R., Phillips, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chilli+thrips+on+blueberries+in+Florida%3A+ENY2053%2FIN1298%5BTitle%5D)+AND+%22EDIS%22%5BJournal%5D)">Chilli thrips on blueberries in Florida: ENY2053/IN1298.</a> EDIS. 2020 (6), (2020).</li>
<li>Gopal, K., Krishna Reddy, M., Reddy, M., Muniyappa, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transmission+of+peanut+yellow+spot+virus+%28PYSV%29+by+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+in+groundnut%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Phytopathol+Plant+Prot%22%5BJournal%5D)">Transmission of peanut yellow spot virus (PYSV) by thrips, Scirtothrips dorsalis Hood in groundnut.</a> Arch Phytopathol Plant Prot. 43 (5), 421-429 (2010).</li>
<li>Prasada Rao, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+host+range+of+tobacco+streak+virus+in+India+and+transmission+by+thrips%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Appl+Biol%22%5BJournal%5D)">The host range of tobacco streak virus in India and transmission by thrips.</a> Ann Appl Biol. 142 (3), 365-368 (2003).</li>
<li>Chang, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Construction+and+selection+of+an+entomopathogenic+fungal+library+from+soil+samples+for+controlling+Spodoptera+litura%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Sustain+Food+Syst%22%5BJournal%5D)">Construction and selection of an entomopathogenic fungal library from soil samples for controlling Spodoptera litura.</a> Front Sustain Food Syst. 5, 596316(2021).</li>
<li>Yang, C. J., Nai, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+aphidicidal+effect+of+entomopathogenic+fungi+against+mustard+aphid%2C+Lipaphis+erysimi+%28Kalt.%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Assessment of aphidicidal effect of entomopathogenic fungi against mustard aphid, Lipaphis erysimi (Kalt.).</a> J Vis Exp. (197), e65312(2023).</li>
<li>Liu, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+selection+of+entomopathogenic+fungi+from+soil+samples+and+evaluation+of+fungal+virulence+against+insect+pests%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation and selection of entomopathogenic fungi from soil samples and evaluation of fungal virulence against insect pests.</a> J Vis Exp. (175), e62882(2021).</li>
<li>Aristizábal, L., Chen, Y., Cherry, R., Cave, R., Arthurs, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+biorational+insecticides+against+chilli+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%2C+infesting+roses+under+nursery+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Entomol%22%5BJournal%5D)">Efficacy of biorational insecticides against chilli thrips, Scirtothrips dorsalis (Thysanoptera: Thripidae), infesting roses under nursery conditions.</a> J Appl Entomol. 141 (4), 274-284 (2017).</li>
<li>Francis, J. R., Manchegowda, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+phylogenetic+identification+of+Metarhizium+and+Beauveria+and+their+bio-efficacy+against+chilli+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Trop+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">Molecular phylogenetic identification of Metarhizium and Beauveria and their bio-efficacy against chilli thrips, Scirtothrips dorsalis.</a> Int J Trop Insect Sci. 43 (3), 909-918 (2023).</li>
<li>Arthurs, S. P., Aristizábal, L. F., Avery, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+entomopathogenic+fungi+against+chilli+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of entomopathogenic fungi against chilli thrips, Scirtothrips dorsalis.</a> J Insect Sci. 13 (1), 31(2013).</li>
<li>Subramaniam, M. S. R., Babu, A., Deka, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lecanicillium+lecanii+%28Zimmermann%29+Zare+%26+Gams+as+an+efficient+biocontrol+agent+of+tea+thrips%2C+Scirtothrips+bispinosus+Bagnall+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Egypt+J+Biol+Pest+Control%22%5BJournal%5D)">Lecanicillium lecanii (Zimmermann) Zare & Gams as an efficient biocontrol agent of tea thrips, Scirtothrips bispinosus Bagnall (Thysanoptera: Thripidae).</a> Egypt J Biol Pest Control. 31, 1-14 (2021).</li>
<li>Panyasiri, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+efficacy+of+Purpureocillium+lilacinum+against+chilli+thrips+%28Scirtothrips+dorsalis%29+on+chili+plant%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Control efficacy of Purpureocillium lilacinum against chilli thrips (Scirtothrips dorsalis) on chili plant.</a> Insects. 13 (8), 684(2022).</li>
<li>Perera, M., Senanayake, N., Dissanayake, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+Amblyseius+swirskii+%28predatory+mite%29+and+Orius+laevigatus+as+biological+control+agents+of+chilli+thrips+%28Scirtothrips+dorsalis%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ceylon+J+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of Amblyseius swirskii (predatory mite) and Orius laevigatus as biological control agents of chilli thrips (Scirtothrips dorsalis).</a> Ceylon J Sci. 50 (4), 541(2021).</li>
<li>Han, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+pupation+environment+on+pupal+development+and+eclosion+of+chilli+thrips+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Entomol%22%5BJournal%5D)">Effect of pupation environment on pupal development and eclosion of chilli thrips (Thysanoptera: Thripidae).</a> Environ Entomol. 54 (1), 223-230 (2025).</li>
<li>Tatara, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+temperature+and+host+plant+on+the+development%2C+fertility+and+longevity+of+Scirtothrips+dorsalis+Hood+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Entomol+Zool%22%5BJournal%5D)">Effect of temperature and host plant on the development, fertility and longevity of Scirtothrips dorsalis Hood (Thysanoptera: Thripidae).</a> Appl Entomol Zool. 29 (1), 31-37 (1994).</li>
<li>Kumar, V., Seal, D. R., Osborne, L. S., McKenzie, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coupling+scanning+electron+microscopy+with+DNA+barcoding%3A+a+novel+approach+for+thrips+identification%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Entomol+Zool%22%5BJournal%5D)">Coupling scanning electron microscopy with DNA barcoding: a novel approach for thrips identification.</a> Appl Entomol Zool. 49, 403-409 (2014).</li>
<li>Silva, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seasonal+abundance+of+cotton+thrips+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+across+crop+and+non-crop+vegetation+in+an+Australian+cotton-producing+region%5BTitle%5D)+AND+%22Agric+Ecosyst+Environ%22%5BJournal%5D)">Seasonal abundance of cotton thrips (Thysanoptera: Thripidae) across crop and non-crop vegetation in an Australian cotton-producing region.</a> Agric Ecosyst Environ. 256, 226-238 (2018).</li>
<li>Venette, R., Davis, E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVenette%2C+R+%22Chilli+thrips%2Fyellow+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+mini+pest+risk+assessment%22">Chilli thrips/yellow thrips, Scirtothrips dorsalis Hood (Thysanoptera: Thripidae) mini pest risk assessment</a>. , Univ Minnesota Tech Bull. (2004).</li>
<li>Mandi, N., Senapati, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+chemical%2C+botanical+and+microbial+insecticides+for+control+of+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+infesting+chilli%5BTitle%5D)+AND+%22J+Plant+Prot+Sci%22%5BJournal%5D)">Integration of chemical, botanical and microbial insecticides for control of thrips, Scirtothrips dorsalis Hood infesting chilli.</a> J Plant Prot Sci. 1 (1), 92-95 (2009).</li>
<li>Samota, R., Jat, B., Choudhary, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+newer+insecticides+and+biopesticides+against+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+in+chilli%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacogn+Phytochem%22%5BJournal%5D)">Efficacy of newer insecticides and biopesticides against thrips, Scirtothrips dorsalis Hood in chilli.</a> J Pharmacogn Phytochem. 6 (4), 1458-1462 (2017).</li>
<li>Panthi, B. R., Renkema, J. M., Lahiri, S., Liburd, O. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+short-range+movement+of+Scirtothrips+dorsalis+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+and+rate+of+spread+of+feeding+injury+among+strawberry+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Entomol%22%5BJournal%5D)">The short-range movement of Scirtothrips dorsalis (Thysanoptera: Thripidae) and rate of spread of feeding injury among strawberry plants.</a> Environ Entomol. 50 (1), 12-18 (2021).</li>
<li>Priyanka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology+and+morphometrics+of+Thrips+parvispinus+%28Karny%29+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+on+chilli%2C+Capsicum+annuum+L%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Hortic+Ecosyst%22%5BJournal%5D)">Biology and morphometrics of Thrips parvispinus (Karny) (Thysanoptera: Thripidae) on chilli, Capsicum annuum L.</a> Pest Manag Hortic Ecosyst. 30 (1), 85-92 (2024).</li>
<li>Hemalatha, S., Ramaraju, K., Jeyarani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+entomopathogenic+fungi+and+delivery+methods+for+management+of+thrips+in+chillies%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Veg+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of entomopathogenic fungi and delivery methods for management of thrips in chillies.</a> Int J Veg Sci. 23 (3), 246-259 (2017).</li>
<li>Xu, X. M., Guerin, L., Robinson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+temperature+and+relative+humidity+on+conidial+germination+and+viability%2C+colonization+and+sporulation+of+Monilinia+fructigena%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">Effects of temperature and relative humidity on conidial germination and viability, colonization and sporulation of Monilinia fructigena.</a> Plant Pathol. 50 (5), 561-568 (2001).</li>
<li>Lee, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+response+of+bean+bug+%28Riptortus+pedestris%29+upon+infection+with+entomopathogenic+fungus%2C+Beauveria+bassiana+JEF-007%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Sci%22%5BJournal%5D)">Transcriptional response of bean bug (Riptortus pedestris) upon infection with entomopathogenic fungus, Beauveria bassiana JEF-007.</a> Pest Manag Sci. 75 (2), 333-345 (2019).</li>
<li>Yang, Y. -T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Up-regulation+of+carbon+metabolism-related+glyoxylate+cycle+and+toxin+production+in+Beauveria+bassiana+JEF-007+during+infection+of+bean+bug%2C+Riptortus+pedestris+%28Hemiptera%3A+Alydidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Fungal+Biol%22%5BJournal%5D)">Up-regulation of carbon metabolism-related glyoxylate cycle and toxin production in Beauveria bassiana JEF-007 during infection of bean bug, Riptortus pedestris (Hemiptera: Alydidae).</a> Fungal Biol. 120 (10), 1236-1248 (2016).</li>
<li>Qayyum, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Entomopathogenic+fungi%3A+prospects+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Entomopathogenic+Fungi%3A+Prospects+and+Challenges%22%5BJournal%5D)">Entomopathogenic fungi: prospects and challenges.</a> Entomopathogenic Fungi: Prospects and Challenges. , 57-79 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>#00 spilla per insetti</td><td>Entosfinge</td><td>DMM0220</td><td>Prodotto nel Regno Unito</td></tr><tr><td>Provetta da centrifuga da 1,5 mL</td><td>Corning incorporata</td><td>MCT-175-C</td><td>Prodotto negli Stati Uniti</td></tr><tr><td>10 &mu; L Ansa di inoculazione</td><td>NEST Scientifico</td><td>718201</td><td>Prodotto negli Stati Uniti</td></tr><tr><td>Scala DNA 100 bp III</td><td>Geneaid</td><td>DL007</td><td>Prodotto a Taiwan.</td></tr><tr><td>2x SuperRed PCR Master Mix</td><td>Strumenti biologici</td><td>TE-SR01</td><td>Prodotto a Taiwan</td></tr><tr><td>Piastra di Petri da 6 cm</td><td>Alpha Plus Scientifico</td><td>16021</td><td>Prodotto a Taiwan</td></tr><tr><td>agar</td><td>Bioman Scientifico</td><td>AGR001.1</td><td>Grado microbiologico</td></tr><tr><td>agarosio</td><td>Bioman Scientifico</td><td>PB1200</td><td>Prodotto a Taiwan</td></tr><tr><td>BioGreen Safe DNA Gel Buffer</td><td>Bioman Scientifico</td><td>SDB001T</td><td>Prodotto a Taiwan</td></tr><tr><td>Kit di tessuti per l'estrazione ad alta velocità Easy DNA</td><td>Fisher Biotec</td><td>ET-100</td><td>https://www.fisherbiotec.com.au/wp-content/uploads/2021/11/FB-EDNA-DNA-Kits-flyer-11Nov21.pdf (Prodotto in Australia)</td></tr><tr><td>Innesco anteriore: LCO 1490</td><td>Genomica&nbsp;</td><td>PO-PR220919G6</td><td>Sequenza: 5'-GGT CAA CAA ATC ATA AAG ATA TTG G-3'</td></tr><tr><td>GenepHlow Gel/PCR Kit</td><td>Geneaid</td><td>DFH300</td><td>http://www.protech-bio.com/UserFiles/file/Gene-Spin%20Genomic%20DNA%20Kit.pdf</td></tr><tr><td>contenitore di allevamento in vetro&nbsp;</td><td>Azienda di attrezzature Sunshine Lab</td><td></td><td>Dimensioni: 35 mm di altezza, 45 mm di diametro interno. Può essere sostituito da qualsiasi dimensione simulata di tazza di plastica o vetro.</td></tr><tr><td>Emocitometro</td><td>Paul Marienfeld</td><td>640030</td><td>Prodotto in Germania</td></tr><tr><td>incubatrice</td><td>Hipoint</td><td>F740</td><td>Prodotto a Taiwan</td></tr><tr><td>taglierina per pelle</td><td>Vero laboratorio artigianale</td><td></td><td><a href="https://shopee.tw/jj891004?categoryId=100636&amp; entryPoint=ShopByPDP& itemId=16023929406">https://shopee.tw/jj891004? categoryId=100636& entryPoint=ShopByPDP& itemId=16023929406</a></td></tr><tr><td>MiniAmp Termociclatore</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>Codice: A37834</td><td>Prodotto negli Stati Uniti</td></tr><tr><td>microscopio ottico&nbsp;</td><td>Nikon</td><td>&nbsp; Ci-L</td><td>Prodotto in Giappone</td></tr><tr><td>pennello da pittura</td><td>Azienda di spazzole Tian Cheng</td><td>4716608400352</td><td>Può essere sostituito da un pennello per acquerello a punta fine, equivalente a un pennello rotondo di misura 0 o 1.</td></tr><tr><td>scottex</td><td>Fioritura di maggio</td><td>BLS007-8</td><td>Prodotto a Taiwan</td></tr><tr><td>Parafilm M</td><td>Bemis</td><td>PM-996</td><td>Prodotto negli Stati Uniti</td></tr><tr><td>pestello a pellet</td><td>Bioman Scientifico</td><td>GT100R</td><td>Prodotto a Taiwan</td></tr><tr><td>Innesco inverso: HCO 2198</td><td>Genomica&nbsp;</td><td>PO-PR220919G6</td><td>Sequenza: 5'-TAA ACT TCA GGG TGA CCA AAA AAT CA-3'</td></tr><tr><td>Sabouraud Brodo di destrosio</td><td>HiMedia</td><td>MH033-500G</td><td>Prodotto in India</td></tr><tr><td>Stereomicroscopio</td><td>Soptop</td><td>SZN71</td><td>Prodotto a Taiwan</td></tr><tr><td>tampone TAE 50X</td><td>Bioman Scientifico</td><td>TAE501000</td><td>Prodotto a Taiwan</td></tr><tr><td>Interpolazione 80</td><td>PanReac AppliChem</td><td>142050.1661</td><td>Prodotto a Taiwan</td></tr><tr><td>borsa con cerniera</td><td>Azienda di plastica Wenchen</td><td>1809000061</td><td>Dimensioni: 12 cm di larghezza e 17 centimetri di lunghezza. (Prodotto a Taiwan)</td></tr></tbody></table>

istituzione di un sistema di allevamento per il controllo della virulenza dei funghi entomopatogeni (scirtothrips dorsalis hood)

Establishment of a Chilli Thrips (Scirtothrips dorsalis Hood) Rearing System for Virulence Screening of Entomopathogenic Fungi

Il diagramma di flusso sperimentale presentato in questo studio ha dimostrato che il sistema di allevamento stabile dei tripidi di peperoncino potrebbe essere stabilito, a partire dalla raccolta in campo fino allo screening della virulenza degli isolati di EPF (Figura 1). Sebbene l'osservazione morfologica possa distinguere i tripidi del peperoncino dagli altri tripidi dei fiori, l'uso della sequenza COI parziale come marcatore molecolare, comprese le dimensi...

Istituzione di un sistema di allevamento per il controllo della virulenza dei funghi entomopatogeni (Scirtothrips dorsalis hood)

The chilli thrips (Scirtothrips dorsalis Hood) is an economically significant pest of ornamental and food crops in Taiwan. Entomopathogenic fungi (EPF) ...

I tripidi del peperoncino sono un parassita ben studiato su più colture. La nostra ricerca è focalizzata sul miglioramento del sistema di allevamento dei tripidi del peperoncino e sull'estensione delle sue applicazioni sullo screening fungino entomopatogeno per esperimenti futuri. Recenti studi si sono concentrati sull'allevamento di massa di tripidi del peperoncino su piante intere all'interno di gabbie. Alcuni stanno esplorando alternative come le foglie staccate, ma i metodi chiari e dettagliati non sono ancora ben descritti.Questo studio ha stabilito un nuovo metodo di allevamento di massa dei tripidi basato su foglie staccate, che può garantire colonie stabili di tripidi di peperoncino. Inoltre, è stato sviluppato un sistema di biodosaggio stabile e riproducibile per lo screening della virulenza dei funghi entomopatogeni. Questo protocollo affronta la mancanza di un metodo standardizzato chiaro per la padronanza dei tripidi utilizzando il disco fogliare, concentrandosi sul miglioramento della gestione degli stadi e sulla riduzione dell'uso delle risorse.Questo protocollo semplifica il controllo della fase di sviluppo, riduce lo spazio e le esigenze di manodopera e fornisce una fornitura costante di tripidi adatta per saggi biologici affidabili e su larga scala. Il nostro laboratorio si concentrerà sull'ottimizzazione dei metodi di allevamento di massa e sull'applicazione di questo protocollo a varie specie di tripidi, migliorando le condizioni ambientali e di manipolazione per garantire popolazioni coerenti e sane per i test biologici. Inoltre, il sistema di allevamento di massa può essere esteso per utilizzare la prova in serra.Per iniziare, taglia foglie e fiori infestati da tripidi al peperoncino. Trasferiscili in un sacchetto di plastica con cerniera, assicurandoti di sigillare il sacchetto con un po' d'aria all'interno per mantenere vivi gli strappi. Successivamente, procurati un contenitore di vetro di 35 millimetri di altezza e 45 millimetri di diametro interno.Metti tre strati di carta assorbente circolare, ciascuno di 40 millimetri di diametro, sul fondo del contenitore. Aggiungi da 8 a 10 gocce di acqua filtrata sui tovaglioli di carta per mantenere l'umidità. Ora, lava accuratamente una giovane foglia di mango.Esaminalo al microscopio ottico per verificare la presenza di uova di insetti o altre contaminazioni di insetti. Con l'aiuto di un tagliapelle, tagliate la foglia di mango in un disco circolare di 40 millimetri di diametro e posizionatela sulla carta assorbente bagnata all'interno del contenitore di vetro. Osserva i tripidi del peperoncino al microscopio ottico con un ingrandimento 10X.Usando un pennello da pittura fine, trasferisci 10 tripidi adulti, di cui cinque maschi e cinque femmine, nel contenitore di vetro preparato. Quindi sigillare ogni contenitore di allevamento in vetro con due strati di Parafilm. Crea circa 40 piccoli fori nel Parafilm usando uno spillo per insetti numero 0-0 per garantire una corretta ventilazione.Mettere il contenitore di vetro sigillato in un'incubatrice per 48 ore. Osservare i tessuti fogliari al microscopio stereoscopico per confermare la presenza di uova che indicano la posizione degli ovuli. Quindi posiziona un disco di foglie di mango fresche sulla foglia con le uova e aggiungi da 8 a 10 gocce di acqua filtrata sul tovagliolo di carta per mantenere l'umidità.Per il mantenimento dei tripidi, trasferire direttamente la foglia contenente le larve di primo stadio in un nuovo contenitore di vetro. Osserva i tripidi del peperoncino ogni giorno. Per l'allevamento di massa dei tripidi del peperoncino, raccogliere prima le femmine adulte di tripidi dalla popolazione mantenuta.Trasferire 10 tripidi femmine adulte in un contenitore di allevamento preparato per ottenere le uova. Quindi trasferire delicatamente circa 120 larve di primo stadio in un nuovo contenitore di vetro utilizzando un pennello fine. Per l'identificazione molecolare, raccogliere un tripide di peperoncino adulto in una provetta da centrifuga da 1,5 millilitri.Omogeneizzare i tripidi al peperoncino usando un pestello a pellet. Quindi isolare il DNA genomico utilizzando un kit commerciale secondo il protocollo del produttore e amplificare utilizzando PCR Master Mix. Controllare l'amplicone PCR mediante elettroforesi in un gel di agarosio all'1% per verificare il risultato dell'amplificazione.Eliminare la banda target di circa 658 paia di basi dal gel. Esegui una ricerca esplosiva sul database NCBI utilizzando i parametri predefiniti per confermare l'identità della specie. Per la preparazione di funghi entomopatogeni, aggiungere da due a tre millilitri di Tween 80 allo 0,03% sulla superficie di una coltura fungina di 10-14 giorni coltivata con agar destrosio di Sabouraud con forza di 1/4.Raschiare delicatamente i conidi utilizzando un anello sterile. Trasferire la sospensione fungina in una provetta da centrifuga pulita da 15 millilitri. Quindi omogeneizzare le sospensioni vorticando alla massima velocità.Filtrare la sospensione con carta da filtro per rimuovere i detriti di hyfil e ottenere una sospensione di conidi puri. Utilizzare un emocitometro per controllare il numero di conidi al microscopio ottico. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione di 10 alla potenza di 8 conidi per millilitro.Quindi trasferire la sospensione di conidi in un microspruzzatore sterilizzato con luce ultravioletta per la successiva applicazione del biodosaggio. Raccogli e lava le giovani foglie di mirtillo da una fattoria di mirtilli. Dopo averli asciugati all'aria, esamina la loro superficie con uno stereomicroscopio per verificare la presenza di eventuali artropodi o uova rimanenti e rimuovili se presenti.Ora, tagliate un disco di foglie di 2,8 centimetri di diametro usando un tagliapelle. Quindi disinfettare il disco fogliare in una soluzione di ipoclorito di sodio all'1%. E tre lo sciacquano due volte con acqua sterilizzata per rimuovere eventuali residui di candeggina.Successivamente, versare tre millilitri di agar d'acqua al 2,5% in piccoli contenitori di vetro all'interno di una cappa a flusso laminare. Quindi trasferire delicatamente il disco fogliare con il lato adassiale rivolto verso l'alto sull'agar e incorporarlo leggermente in modo che solo una piccola parte rimanga esposta sopra la superficie. Una volta che l'agar si è solidificato completamente, considerare i contenitori di vetro pronti per il biotest.Prima dell'applicazione, agitare accuratamente la sospensione conidiale. Utilizzando un microspruzzatore, applicare uniformemente 0,1 millilitri di sospensione sulla superficie di ciascun disco fogliare da una distanza di circa 10 centimetri all'interno del contenitore di vetro. Ora usa un pennello fine per trasferire le larve di 10 secondi stadi in ogni contenitore di vetro.Sigillare ogni contenitore con due strati di Parafilm. Crea circa 30 piccoli fori per la ventilazione nel Parafilm usando uno spillo per insetti numero 0-0. Quindi mettere i contenitori in un'incubatrice per sette giorni.Osserva e registra la mortalità dei tripidi del peperoncino con uno stereomicroscopio a un ingrandimento 10X ogni giorno per sette giorni. Conservare le larve morte all'interno del contenitore di vetro per l'osservazione della micosi per confermare l'infezione fungina endopatogena. Per il biodosaggio di funghi entomopatogeni selezionati, preparare tre concentrazioni di sospensioni conidiali.Inoculare le sospensioni in diversi contenitori di allevamento. Trasforma i dati di mortalità di ciascun ceppo fungino utilizzando una trasformazione arcsine prima di eseguire l'ANOVA unidirezionale per determinare le differenze significative tra i trattamenti. Quindi calcola i valori mediani del tempo letale e della concentrazione letale mediana utilizzando l'analisi di regressione della successione.Sono state osservate distintamente le caratteristiche morfologiche dei tripidi del peperoncino in varie fasi della vita, tra cui lo stadio larvale iniziale, lo stadio larvale successivo e lo stadio adulto. L'amplificazione della reazione a catena della polimerasi che ha come bersaglio il gene COI parziale ha prodotto una banda che conferma l'identità dei tripidi raccolti sul campo come tripidi del peperoncino. Il sistema di allevamento delle foglie staccate ha supportato con successo l'insediamento di colonie di tripidi di peperoncino con un tasso di sopravvivenza del 90% osservato nel gruppo di controllo durante il periodo di osservazione di sette giorni.Tra gli isolati fungini entomopatogeni testati, il Cordyceps cateniannulata NCHU-213 ha causato la più alta mortalità nelle larve di tripidi di peperoncino a sette giorni dall'inoculazione, seguito dal Cordyceps cateniannulata NCHU-298, mentre la Beauveria bassiana ha mostrato una virulenza inferiore. Il valore LT50 di 10 alla potenza di 8 conidi per millilitro di Cordyceps cateniannulata NCHU-213 e Cordyceps cateniannulata NCHU-298 ha mostrato valori simili e ha mostrato giorni più corti rispetto a Beauveria bassiana. La micosi è stata visibilmente osservata su cadaveri di tripidi infettati con isolati di Cordyceps, come si vede nella crescita fungina che ricopre i loro corpi.Un aumento dose-dipendente della mortalità è stato evidente nei tripidi trattati con Cordyceps cateniannulata NCHU-213 a quattro e cinque giorni dopo l'inoculazione, mentre la mortalità più alta del 71,4% è stata osservata a 10 alla potenza di 7 conidi per millilitro dopo sette giorni, seguita dal 58,9% a 10 alla potenza di 8 conidi per millilitro e dal 44,4% a 10 alla potenza di 6 conidi per millilitro.

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Istituzione di un sistema di allevamento per il controllo della virulenza dei funghi entomopatogeni (Scirtothrips dorsalis hood) (Video) | JoVE Journal

Istituzione di un sistema di allevamento per il controllo della virulenza dei funghi entomopatogeni (Scirtothrips dorsalis hood)

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