Name: Clearing ottico transitorio utilizzando molecole assorbenti per limaging ex vivo e in vivo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T16:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: Scopri il clearing ottico transitorio con molecole assorbenti per l'imaging ex vivo e in vivo. Il tartrazina migliora profondità e chiarezza delle immagini in modo rapido e reversibile nei tessuti e negli animali.

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<ol><li>Yun, S. H., Kwok, S. J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light+in+diagnosis%2C+therapy+and+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Light in diagnosis, therapy and surgery.</a> Nat Biomed Eng. 1 (1), 0008(2017).</li>
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<li>Ertürk, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+3D+histology+powered+by+tissue+clearing%2C+omics+and+AI%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Deep 3D histology powered by tissue clearing, omics and AI.</a> Nat Methods. 21 (7), 1153-1165 (2024).</li>
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<li>Costantini, I., Cicchi, R., Silvestri, L., Vanzi, F., Pavone, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+and+ex+vivo+optical+clearing+methods+for+biological+tissues%3A+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">In vivo and ex vivo optical clearing methods for biological tissues: Review.</a> Biomed Opt Express. 10 (10), 5251-5267 (2019).</li>
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<li>Miller, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+penetration+depth+in+optical+coherence+tomography+and+photoacoustic+microscopy+in+vivo+enabled+by+absorbing+dye+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22Optica%22%5BJournal%5D)">Enhanced penetration depth in optical coherence tomography and photoacoustic microscopy in vivo enabled by absorbing dye molecules.</a> Optica. 12 (1), 24-30 (2025).</li>
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<li>Zuo, T., Tao, C., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absorbing+molecules+as+optical+clearing+agents+improve+the+resolution+and+sensitivity+of+photoacoustic+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Opt+Lett%22%5BJournal%5D)">Absorbing molecules as optical clearing agents improve the resolution and sensitivity of photoacoustic microscopy.</a> Opt Lett. 50 (7), 2282-2285 (2025).</li>
<li>Narawane, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+clearing+with+Tartrazine+enables+deep+transscleral+imaging+with+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Photonics+Eng%22%5BJournal%5D)">Optical clearing with Tartrazine enables deep transscleral imaging with optical coherence tomography.</a> J Biomed Photonics Eng. 29 (12), 120501(2024).</li>
<li>Ueda, H. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+clearing+and+its+applications+in+neuroscience%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Tissue clearing and its applications in neuroscience.</a> Nat Rev Neurosci. 21 (2), 61-79 (2020).</li>
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<li>Ou, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Achieving+optical+transparency+in+live+animals+with+absorbing+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Achieving optical transparency in live animals with absorbing molecules.</a> Science. 385 (6713), eadm6869(2024).</li>
<li>Sai, T., Saba, M., Dufresne, E. R., Steiner, U., Wilts, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Designing+refractive+index+fluids+using+the+Kramers-Kronig+relations%5BTitle%5D)+AND+%22Faraday+Discuss%22%5BJournal%5D)">Designing refractive index fluids using the Kramers-Kronig relations.</a> Faraday Discuss. 223, 136-144 (2020).</li>
<li>Yu, T., Zhu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strongly+absorbing+molecules+make+tissue+transparent%3A+A+new+insight+for+understanding+tissue+optical+clearing%5BTitle%5D)+AND+%22Light+Sci+Appl%22%5BJournal%5D)">Strongly absorbing molecules make tissue transparent: A new insight for understanding tissue optical clearing.</a> Light Sci Appl. 14 (1), 10(2025).</li>
<li>Drexler, W., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDrexler%2C+W+%22Optical+coherence+tomography%3A+Technology+and+applications%22">Optical coherence tomography: Technology and applications</a>. Drexler, W., Fujimoto, J. G. , Springer International Publishing. Cham. 277-318 (2015).</li>
<li>Wang, F., Zhou, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transparent+mice%27%3A+Deep-tissue+live+imaging+using+food+dyes%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Transparent mice': Deep-tissue live imaging using food dyes.</a> Commun Biol. 7 (1), 1307(2024).</li>
<li>Yu, H., Liu, J. -B., Ma, Y. -S., Fu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transparent+live+mice+offer+more+possibilities+for+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Innov+Med%22%5BJournal%5D)">Transparent live mice offer more possibilities for biomedical research.</a> Innov Med. 2 (4), 100098(2024).</li>
<li>Shabbir, M. W., Biswas, S., Kajla, R., Nadella, S., Ou, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Designing+refractive+index+fluids+of+food+dye+for+light+propagation+through+scattering+media%5BTitle%5D)+AND+%22MRS+Commun%22%5BJournal%5D)">Designing refractive index fluids of food dye for light propagation through scattering media.</a> MRS Commun. , (2025).</li>
<li>Scheele, C. L. G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiphoton+intravital+microscopy+of+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Methods+Primers%22%5BJournal%5D)">Multiphoton intravital microscopy of rodents.</a> Nat Rev Methods Primers. 2 (1), 89(2022).</li>
<li>Schmidt, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Near-infrared+II+fluorescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Methods+Primers%22%5BJournal%5D)">Near-infrared II fluorescence imaging.</a> Nat Rev Methods Primers. 4 (1), 23(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Bilancia analitica</td><td>HZK</td><td>FA220S</td><td></td></tr><tr><td>Macchina per anestesia animale</td><td>RWD scienze della vita co</td><td>TAIJI-IE</td><td>Anestetici per inalazione</td></tr><tr><td>Atipamezolo HCL iniettabile 5 mg/mL</td><td>Covertus</td><td>82124</td><td>Anestesia iniettabile</td></tr><tr><td>Fotocamera CMOS</td><td>Laboratori Thor</td><td>CS165CU/M, Zelux</td><td></td></tr><tr><td>Dexmedetomidina HCL iniettabile 5 mg/10 ml</td><td>Covertus</td><td>72960</td><td>Anestesia iniettabile</td></tr><tr><td>Illuminatore a fibra ottica</td><td>RWD scienze della vita co</td><td>76301</td><td>Sorgente luminosa per l'illuminazione superiore</td></tr><tr><td>Vetrini</td><td>CravitySci</td><td>0303-2122</td><td>Vetrini per microscopio di qualità eccellente</td></tr><tr><td>Coperta Omeotermica</td><td>RWD scienze della vita co</td><td>69027</td><td>Regolatore di temperatura per animali</td></tr><tr><td>Elaborazione di immagini</td><td>OpenCV</td><td>Pitone</td><td>Software</td></tr><tr><td>Siringa da insulina 0,5 mL 29 g</td><td>Punto di comfort</td><td>26028</td><td>Anestesia iniettabile</td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Covertus</td><td>Codice SKU 029405</td><td>Anestetici per inalazione</td></tr><tr><td>Ketmina HCL iniezione 100 mg/mL</td><td>Dechra</td><td>20042240</td><td>Anestesia iniettabile</td></tr><tr><td>Fonte luminosa a LED</td><td>GGE corp</td><td>TLB-01</td><td>Sorgente luminosa per l'illuminazione superiore</td></tr><tr><td>Lente</td><td>Laboratori Thor</td><td>MVL4WA</td><td>Lunghezza focale di 3,5 mm e apertura f/1,4</td></tr><tr><td>Nair</td><td>Chiesa & Dwight</td><td>L 1224</td><td>Crema depilatoria</td></tr><tr><td>PBS ph 7,4 (1x)</td><td>Gibco</td><td>2902869</td><td>Anestesia iniettabile</td></tr><tr><td>Cotton fioc</td><td>Azienda di prodotti medici puritani</td><td>806-WC Ospedale</td><td></td></tr><tr><td>SeaPlaque Agarosio</td><td>Lonza</td><td>50101</td><td>Chimico</td></tr><tr><td>Tartrazina</td><td>MilliporeSigma</td><td>Numero CAS: 1934-21-0</td><td>Chimico</td></tr><tr><td>Pipetta di trasferimento</td><td>Fisherbrand</td><td>13-711-9AMMD</td><td></td></tr><tr><td>Spettrofotometro UV-VIS-NIR</td><td>Shimadzu</td><td>SolidSpec-3700i</td><td>Strumento</td></tr><tr><td>Flaconcini</td><td>Distretto di Qorpak</td><td>242633</td><td></td></tr><tr><td>Pipette volumetriche</td><td>Eppendorf research plus</td><td>3123000063</td><td>100-1000&micro; L</td></tr><tr><td>Sistema di purificazione dell'acqua</td><td>Scienza dell'avidità</td><td>SOLO S</td><td>Strumento</td></tr></tbody></table>

clearing ottico transitorio utilizzando molecole assorbenti per l'imaging ex vivo e in vivo

Transient Optical Clearing Using Absorbing Molecules for Ex Vivo and In Vivo Imaging

Dimostrazione della trasparenza ottica nel tessuto di petto di pollo ex vivo Per studiare la propagazione della luce attraverso il tessuto ex vivo , abbiamo utilizzato pezzi affettati di petto di pollo crudo disossato con spessori di 1,5 mm, 2,5 mm e 3,5 mm (Figura 2B). I tessuti sono stati tagliati parallelamente alle fibre di collagene, garantendo un orientamento costante delle fibre m...

Clearing ottico transitorio utilizzando molecole assorbenti per l'imaging ex vivo e in vivo

Dynamic imaging is a foundational tool in biology and medicine, but it is limited by light scattering in live tissues caused by refractive index ...

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Descriviamo gli approcci di imaging usiamo per indagare la distribuzione e la mobilità delle proteine ​​fluorescenti trasfettate residenti nel reticolo endoplasmatico (ER) mediante la microscopia confocale di cellule viventi. Abbiamo anche ultrastrutturalmente di analizzare l'effetto della loro espressione sulla architettura di questo comparto subcellulare.

Visualizzazione del reticolo endoplasmatico sottodomini in cellule in coltura

Per ottenere immagini ad alta risoluzione di cellule marcate in fluorescenza all'interno di tessuti di grandi dimensioni, idealmente, i campioni biologici dovrebbero essere ripresi senza sezionamento. 3DISCO è una semplice procedura di pulizia dei tessuti basata sull'incubazione sequenziale con solventi organici. Dopo l'eliminazione, gli organi diventano trasparenti consentendo una scansione laser end-to-end del campione.

Imaging Azzerato Sistemi Biologici intatti a livello cellulare da 3DISCO

L'uso di fluorofori per l'imaging in vivo può essere notevolmente limitato dall'opsonizzazione, dalla rapida eliminazione, dalla bassa sensibilità di rilevamento e dagli effetti citotossici sull'ospite. L'incapsulamento dei fluorofori nei liposomi mediante idratazione ed estrusione del film porta al quenching e alla protezione della fluorescenza, consentendo l'imaging in vivo con un'elevata sensibilità di rilevamento.

Fluorescenza tempra di un vicino infrarosso Fluoroforo incapsulata all'interno di liposomi come strumento per In Vivo Optical Imaging

Le tecniche di pulizia ottica stanno rivoluzionando il modo in cui i tessuti vengono visualizzati. In questo rapporto descriviamo le modifiche del protocollo originale Clear Lipid-exchanged Acrylamide-hybridized Acrylamide-hybridized Imaging compatible Tissue-hYdrogel (CLARITY) che produce risultati più coerenti e meno costosi.

Clearing ottica del sistema nervoso centrale del mouse Utilizzando CHIAREZZA passivo

A causa del contenuto elevato del lipido, tessuto adiposo è stato impegnativo per visualizzare usando i metodi istologici tradizionali. Adipo-Clear è un tessuto tecnica che permette di etichettatura robusto e imaging fluorescente volumetrica ad alta risoluzione del tessuto adiposo di compensazione. Qui, descriviamo i metodi per la preparazione del campione, pretrattamento, colorazione, compensazione e montaggio per l'imaging.

Adipo-Clear: Un tessuto metodo di compensazione per l'Imaging tridimensionale del tessuto adiposo

La combinazione di etichettatura anticorpale, compensazione ottica e microscopia luminosa avanzata consente l'analisi tridimensionale di strutture o organi completi. Descritto qui è un metodo semplice per combinare l'etichettatura di fette renali spesse, la compensazione ottica con il cinnamate etilico e l'imaging confocale che consente la visualizzazione e la quantificazione delle strutture renali tridimensionali.

Cancellazione ottica e imaging del tessuto renale immunoetichettato

L'imaging in vivo è un potente strumento per lo studio della biologia in salute e malattia. Questo protocollo descrive l'imaging transpupillare della retina del topo con un microscopio standard a due fotoni. Dimostra anche diversi metodi di imaging in vivoimaging per marcare in modo fluorescente più coorti cellulari della retina.

Transpupillare Due fotoni In vivo Imaging della retina del topo

La microscopia A scattering Raman stimolato (SRS) consente l'imaging senza etichette di biomolecole in base alla loro vibrazione intrinseca di specifici legami chimici. In questo protocollo, viene descritta la configurazione strumentale di un microscopio integrato SRS e fluorescenza a due fotoni per visualizzare le strutture cellulari nel midollo spinale di topi vivi.

In vivo Imaging di tessuti biologici con fluorescenza combinata a due fotoni e microscopia a dispersione Raman stimolata

Qui, viene descritto un metodo per rendere trasparenti i tessuti vegetali mantenendo la stabilità delle proteine fluorescenti. Questa tecnica facilita l'imaging profondo dei tessuti vegetali eliminati senza sezionamento fisico.

Clearing ottico dei tessuti vegetali per l'imaging a fluorescenza

Questo protocollo combina la chiarificazione ottica e l'immunomarcatura per l'imaging confocale a volume completo di organoidi retinici a montaggio intero. Preserva la struttura 3D, consentendo la visualizzazione dettagliata dei percorsi neuronali chiave, migliorando lo studio della maturazione retinica, l'organizzazione spaziale e le sue potenziali applicazioni nella modellazione delle malattie e nella medicina personalizzata.

Visualizzazione di organoidi retinici a montaggio intero con risoluzione cellulare

Scopri il clearing ottico transitorio con molecole assorbenti per l'imaging ex vivo e in vivo. Il tartrazina migliora profondità e chiarezza delle immagini in modo rapido e reversibile nei tessuti e negli animali.

Clearing ottico transitorio utilizzando molecole assorbenti per l'imaging ex vivo e in vivo

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