Name: Piattaforma di imaging senza lenti distribuibile sul campo per unanalisi rapida e senza marcatura dellattivazione delle cellule natural killer (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-08T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: Scopri l'analisi senza marcatori delle cellule NK con imaging senza lenti per monitorare l'attivazione immunitaria in tempo reale. Questo metodo rapido e accessibile migliora la profilazione cellulare.

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<table><tbody><tr><td>Provette per microcentrifuga da 1,7 mL</td><td>AXYGEN</td><td>MCT-175-C</td><td>Sterile, privo di DNasi/RNasi</td></tr><tr><td>Vetrino per test</td><td>Metaimmunetech</td><td>AS050-G</td><td>Vetrino dedicato per Cellytics system 50 vetrini in scatola</td></tr><tr><td>Sistema Cellytics con software</td><td>Metaimmunetech</td><td>CS001</td><td>Piattaforma di imaging delle ombre senza lenti</td></tr><tr><td>Centrifuga (rotore a secchiello oscillante)</td><td>LABOGENE</td><td>1580R</td><td>300&ndash; 500 &volte; Gamma G</td></tr><tr><td>Sensore di immagine CMOS</td><td>Incluso con il dispositivo Cellytics</td><td>Integrato</td><td>Utilizzato per l'imaging a diffrazione</td></tr><tr><td>Centrifuga Cytospin</td><td>Nasco corea</td><td>TXT3 Cyto Centrifuga</td><td>Per colorazione con citospin</td></tr><tr><td>Blocco riscaldante digitale (37 &deg; C)</td><td>Daihan Scientifico</td><td>DH. WHB00349</td><td>Per incubazione cellulare</td></tr><tr><td>Kit ELISA (IFN-&gamma;)</td><td>R& Sistema D</td><td>DIF50C</td><td>IFN umano-&gamma; Kit ELISA</td></tr><tr><td>Citometro a flusso Guava easyCyte</td><td>Millipore</td><td>0500-5005</td><td>Per l'analisi dell'espressione di CD107a</td></tr><tr><td>Pacchetto statistiche Hema 3</td><td>ThermoFisher</td><td>122-911</td><td>Per colorazione con citospin</td></tr><tr><td>IL-12 (Umano ricombinante)</td><td>R& Sistema D</td><td></td><td>Componente di ASC</td></tr><tr><td>IL-2 (umano ricombinante)</td><td>Peprotech</td><td>200-02</td><td>Componente di ASC</td></tr><tr><td>Rack di separazione magnetico</td><td>Metaimmunetech</td><td>Motore M13R8</td><td>Per la separazione delle microsfere</td></tr><tr><td>Vetrini per microscopio</td><td>Marienfeld</td><td>1000612</td><td>Per preparazioni di citospin</td></tr><tr><td>Kit di attivazione NK</td><td>Metaimmunetech</td><td>MIT2301V, MIT2301A</td><td>Per l'attivazione delle cellule NK</td></tr><tr><td>Kit NK Set</td><td>Metaimmunetech</td><td>MIT2301-500</td><td>Per l'isolamento delle cellule NK</td></tr><tr><td>PE Topo Anti-Umano CD107a, 100test</td><td>BD bioscienze</td><td>555801</td><td>Per l'analisi dell'espressione di CD107a</td></tr><tr><td>Apertura stenopeica</td><td>Incluso con il dispositivo Cellytics</td><td>Integrato</td><td>Utilizzato nel percorso di illuminazione LSIT</td></tr><tr><td>Pipette (2&ndash; 20 &micro; L, 20&ndash; 200 &micro; L)</td><td>AXYGEN</td><td>T-200-Y</td><td>Volume regolabile</td></tr><tr><td>Diapositiva di calibrazione delle ombre</td><td>Metaimmunetech</td><td>AS050-G</td><td>Per la calibrazione del dispositivo. 1 vetrino di calibrazione in 1 scatola di vetrini per saggi</td></tr><tr><td>Miscelatore a vortice</td><td>Merck</td><td>SI-0246A</td><td>Per la risospensione</td></tr></tbody></table>

piattaforma di imaging senza lenti distribuibile sul campo per un'analisi rapida e senza marcatura dell'attivazione delle cellule natural killer

Field-Deployable Lens-Free Imaging Platform for Rapid Label-Free Analysis of Natural Killer Cell Activation

Seguendo questo protocollo, la piattaforma LSIT consente una valutazione quantitativa e senza marcatura dell'attivazione delle cellule NK in base ai cambiamenti morfologici nelle cellule. La Figura 2A mostra le preparazioni di citospin colorate con Hema-3 di cellule NK primarie da donatori sani dopo 2 ore di incubazione con o senza ASC. L'attivazione da parte dell'ASC provoca cambiamenti marcati, principalmente l'allargamento cellulare e un aumento della complessità o granularità interna, ri...

Piattaforma di imaging senza lenti distribuibile sul campo per un'analisi rapida e senza marcatura dell'attivazione delle cellule natural killer

Natural killer (NK) cells are important effectors of innate immunity that eliminate virus-infected and malignant cells. Monitoring NK cell activity is ...

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Bioengineering

Bioingegneria

Lensfree on-chip di imaging e caratterizzazione di cellule è illustrata. Questo approccio on-chip di imaging cellulare fornisce uno strumento compatto e conveniente per la diagnostica medica e applicazioni ad elevato throughput biologia cellulare, che lo rende particolarmente adatto per le impostazioni delle risorse poveri.

Senza lenti on-chip Imaging di celle fornisce un nuovo strumento per High-throughput Cell-Biologia e diagnostica medica

Qui, descriviamo un non-invasiva a due fotoni (2P) approccio microscopia per lo studio dei leucociti homing nella zampa del mouse. Discutiamo gli aspetti tecnici della nostra preparazione dei tessuti di imaging e camminare il lettore attraverso un tipico esperimento di configurazione iniziale di esecuzione e di raccolta dei dati.

Non invasiva di imaging di homing dei leucociti e la migrazione In vivo</em

In questo video, descriviamo la tecnica di microscopia a foglio di luce reticolare per visualizzare le interazioni tra cellule T vive e cellule presentanti l'antigene. Il metodo prevede la focalizzazione di un foglio di luce reticolare ultrasottile su una coppia di celle interagenti per ottenere una serie di immagini bidimensionali, che vengono combinate per ottenere immagini quadridimensionali ad alta risoluzione che rivelano le dinamiche spaziotemporali dell'interazione cellula-cellula.

Microscopia a foglio di luce reticolare per visualizzare le interazioni recettore-ligando nelle cellule vive

Questo video mostra una tecnica per visualizzare la formazione della sinapsi immunologica nelle cellule natural killer (NK) su un doppio strato lipidico supportato (SLB). L'SLB viene prima marcato con un ligando del recettore attivante delle cellule NK marcato con fluoroforo, seguito dall'incubazione con cellule NK. Successivamente, le cellule vengono colorate per l'actina polimerizzata e i granuli litici perforin-positivi. Questo approccio consente la visualizzazione della formazione delle...

Imaging a super-risoluzione della formazione di sinapsi immunologiche delle cellule NK su un doppio strato lipidico supportato

Qui illustriamo il protocollo per l'imaging a due colori STED nanoscopia il citotossica sinapsi immunitaria delle cellule NK ricapitolato su vetro. Usando questo metodo si ottiene nm risoluzione sub-100 di proteine ​​sinaptiche e il citoscheletro.

Visualizzazione della immunologica Synapse da Dual Color Time-gated emissione stimolata Depletion (STED) Nanoscopia

Descriviamo qui una combinazione della tecnica del doppio strato lipidico supportato da vetro per formare sinapsi immunologiche con la tecnica di imaging a super-risoluzione della microscopia STED (Stimulated Emission Depletion). L'obiettivo di questo protocollo è fornire agli utenti le istruzioni necessarie per eseguire con successo queste due tecniche.

Super-Resolution Imaging di cellule Natural Killer immunologica Sinapsi su un vetro supportato Planar doppio strato lipidico

Comunicazione intercellulare è fondamentale per controllare varie attività fisiologiche all'interno e all'esterno della cellula. Questo documento descrive un protocollo per misurare la natura spazio-temporale delle secrezioni unicellulari. Per raggiungere questo obiettivo, è usato un approccio multidisciplinare che integra nanoplasmonic label-free sensing con imaging cellulare dal vivo.

Una tecnica senza etichetta per l&#39;Imaging spazio-temporale delle secrezioni monocellulari

Lente-libero video microscopia permette di monitorare le colture cellulari direttamente all'interno dell'incubatrice. Qui descriviamo il protocollo completo utilizzato per acquisire e analizzare un'acquisizione di 2,7 giorni lunghi delle cellule coltivate di HeLa, che conduce a un dataset di 2.2 x 106 misurazioni della morfologia delle cellule individuali e ciclo cellulare 10584 tracce.

Lente-free Video microscopia per la dinamica e analisi quantitativa della coltura delle cellule aderenti

Descriviamo un protocollo per l'identificazione di sottotipi del linfocita usando formazione immagine fase quantitativa e un algoritmo di apprendimento automatico privo di etichetta. Misurazioni dell'indice di rifrazione 3D tomogrammi dei linfociti presentano 3D informazioni morfologiche e biochimiche per le singole celle, che viene quindi analizzati con un algoritmo di apprendimento automatico per l'identificazione di tipi delle cellule.

Identificazione dei sottotipi del linfocita usando la formazione immagine tridimensionale fase quantitativa privo di etichetta e Machine Learning

L'obiettivo di questo protocollo è quello di mostrare come utilizzare la microscopia Lattice Light-Sheet per visualizzare in modo quadridimensionale le dinamiche del recettore superficiale nelle cellule vive. Qui vengono mostrati i recettori delle cellule T su CD4- cellule T primarie.

Visualizzazione delle dinamiche del recettore a cellule T di superficie in modo quad-dimensionale utilizzando la microscopia A fogli di luce a reticolo

Scopri l'analisi senza marcatori delle cellule NK con imaging senza lenti per monitorare l'attivazione immunitaria in tempo reale. Questo metodo rapido e accessibile migliora la profilazione cellulare.

Piattaforma di imaging senza lenti distribuibile sul campo per unanalisi rapida e senza marcatura dellattivazione delle cellule natural killer (Video) | JoVE Journal

Piattaforma di imaging senza lenti distribuibile sul campo per un'analisi rapida e senza marcatura dell'attivazione delle cellule natural killer

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