Name: Estrazione di saliva, emolinfa, ghiandole salivari e intestino medio da singole zecche (Acari: Ixodidae) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-31T13:20:00.000+00:00
Duration: 3 min 22 s
Description: Impara a estrarre saliva, emolinfa, ghiandole salivari e intestino medio da singole zecche Ixodidae. Questo protocollo consente di studiare la localizzazione tissutale dei patogeni trasmessi dalle zecche.

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<ol><li>de la Fuente, J., Villar, M., Cabezas-Cruz, A., Estrada-Peña, A., Ayllón, N., Alberdi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tick-host-pathogen+interactions%3A+Conflict+and+cooperation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Tick-host-pathogen interactions: Conflict and cooperation.</a> PLoS Pathog. 12 (4), e1005488(2016).</li>
<li>Michalik, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diversity+of+Borrelia+burgdorferi+sensu+lato+species+in+Ixodes+ticks+%28Acari%3A+Ixodidae%29+associated+with+cave-dwelling+bats+from+Poland+and+Romania%5BTitle%5D)+AND+%22Ticks+Tick+Borne+Dis%22%5BJournal%5D)">Diversity of Borrelia burgdorferi sensu lato species in Ixodes ticks (Acari: Ixodidae) associated with cave-dwelling bats from Poland and Romania.</a> Ticks Tick Borne Dis. 11 (1), 101300(2020).</li>
<li>Lu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+survey+of+vector-borne+pathogens+in+ticks%2C+sheep+keds%2C+and+domestic+animals+from+Ngawa%2C+Southwest+China%5BTitle%5D)+AND+%22Pathogens%22%5BJournal%5D)">Molecular survey of vector-borne pathogens in ticks, sheep keds, and domestic animals from Ngawa, Southwest China.</a> Pathogens. 11 (5), 606(2022).</li>
<li>Boulanger, N., Boyer, P., Talagrand-Reboul, E., Hansmann, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ticks+and+tick-borne+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Mal+Infect%22%5BJournal%5D)">Ticks and tick-borne diseases.</a> Med Mal Infect. 49 (2), 87-97 (2019).</li>
<li>Scholl, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunomodulatory+effects+of+tick+saliva+on+dermal+cells+exposed+to+Borrelia+burgdorferi%2C+the+agent+of+Lyme+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Parasit+Vectors%22%5BJournal%5D)">Immunomodulatory effects of tick saliva on dermal cells exposed to Borrelia burgdorferi, the agent of Lyme disease.</a> Parasit Vectors. 9 (1), 394(2016).</li>
<li>Nuttall, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wonders+of+tick+saliva%5BTitle%5D)+AND+%22Ticks+Tick+Borne+Dis%22%5BJournal%5D)">Wonders of tick saliva.</a> Ticks Tick Borne Dis. 10 (2), 470-481 (2019).</li>
<li>Lejal, E., Moutailler, S., Šimo, L., Vayssier-Taussat, M., Pollet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tick-borne+pathogen+detection+in+midgut+and+salivary+glands+of+adult+Ixodes+ricinus%5BTitle%5D)+AND+%22Parasit+Vectors%22%5BJournal%5D)">Tick-borne pathogen detection in midgut and salivary glands of adult Ixodes ricinus.</a> Parasit Vectors. 12 (1), 152(2019).</li>
<li>Gudderra, N. P., Sonenshine, D. E., Apperson, C. S., Roe, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+distribution+and+characterization+of+predominant+hemolymph+carrier+proteins+from+Dermacentor+variabilis+and+Ornithodoros+parkeri%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Tissue distribution and characterization of predominant hemolymph carrier proteins from Dermacentor variabilis and Ornithodoros parkeri.</a> J Insect Physiol. 48 (2), 161-170 (2002).</li>
<li>Liu, L., Yan, F., Zhang, L., Wu, Z. F., Duan, D. Y., Cheng, T. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+profiling+of+hemolymph+in+Haemaphysalis+flava+ticks%5BTitle%5D)+AND+%22Parasit+Vectors%22%5BJournal%5D)">Protein profiling of hemolymph in Haemaphysalis flava ticks.</a> Parasit Vectors. 15 (1), 179(2022).</li>
<li>Moreira, H. N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+deep+insight+into+the+whole+transcriptome+of+midguts%2C+ovaries+and+salivary+glands+of+the+Amblyomma+sculptum+tick%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitol+Int%22%5BJournal%5D)">A deep insight into the whole transcriptome of midguts, ovaries and salivary glands of the Amblyomma sculptum tick.</a> Parasitol Int. 66 (2), 64-73 (2017).</li>
<li>Šimo, L., Kazimirova, M., Richardson, J., Bonnet, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+essential+role+of+tick+salivary+glands+and+saliva+in+tick+feeding+and+pathogen+transmission%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The essential role of tick salivary glands and saliva in tick feeding and pathogen transmission.</a> Front Cell Infect Microbiol. 7, 281(2017).</li>
<li>Khanal, S., Taank, V., Anderson, J. F., Sultana, H., Neelakanta, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rickettsial+pathogen+perturbs+tick+circadian+gene+to+infect+the+vertebrate+host%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Rickettsial pathogen perturbs tick circadian gene to infect the vertebrate host.</a> Int J Mol Sci. 23 (7), 3545(2022).</li>
<li>Khogali, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-specific+localization+of+tick-borne+pathogens+in+ticks+collected+from+camels+in+Kenya%3A+Insights+into+vector+competence%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Tissue-specific localization of tick-borne pathogens in ticks collected from camels in Kenya: Insights into vector competence.</a> Front Cell Infect Microbiol. 14, 1382228(2024).</li>
<li>Patton, T. G., Dietrich, G., Brandt, K., Dolan, M. C., Piesman, J., Gilmore, R. D. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saliva%2C+salivary+gland%2C+and+hemolymph+collection+from+Ixodes+scapularis+ticks%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Saliva, salivary gland, and hemolymph collection from Ixodes scapularis ticks.</a> J Vis Exp. (60), e3894(2012).</li>
<li>Tirloni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saliva+from+nymph+and+adult+females+of+Haemaphysalis+longicornis%3A+A+proteomic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Parasit+Vectors%22%5BJournal%5D)">Saliva from nymph and adult females of Haemaphysalis longicornis: A proteomic study.</a> Parasit Vectors. 8, 338(2015).</li>
<li>Binetruy, F., Dupraz, M., Buysse, M., Duron, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+sterilization+methods+impact+measures+of+internal+microbial+diversity+in+ticks%5BTitle%5D)+AND+%22Parasit+Vectors%22%5BJournal%5D)">Surface sterilization methods impact measures of internal microbial diversity in ticks.</a> Parasit Vectors. 12 (1), 268(2019).</li>
<li>Oliveira, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteome+of+Rhipicephalus+sanguineus+tick+saliva+induced+by+the+secretagogues+pilocarpine+and+dopamine%5BTitle%5D)+AND+%22Ticks+Tick+Borne+Dis%22%5BJournal%5D)">Proteome of Rhipicephalus sanguineus tick saliva induced by the secretagogues pilocarpine and dopamine.</a> Ticks Tick Borne Dis. 4 (6), 469-477 (2013).</li>
<li>Edwards, K. T., Goddard, J., Varela-Stokes, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Examination+of+the+internal+morphology+of+the+ixodid+tick%2C+Amblyomma+maculatum+Koch+%28Acari%3A+Ixodidae%29%3A+A+%26%2334%3Bhow-to%26%2334%3B+pictorial+dissection+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Midsouth+Entomol%22%5BJournal%5D)">Examination of the internal morphology of the ixodid tick, Amblyomma maculatum Koch (Acari: Ixodidae): A &#34;how-to&#34; pictorial dissection guide.</a> Midsouth Entomol. 2 (1), 28-39 (2009).</li>
<li>Khogali, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+the+microbiomes+of+camel+ticks+to+infer+vector+competence%3A+Insights+from+tissue-level+symbiont-pathogen+relationships%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Exploring the microbiomes of camel ticks to infer vector competence: Insights from tissue-level symbiont-pathogen relationships.</a> Sci Rep. 15 (1), 5574(2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.5&ndash; 10 & micro; L pipette&nbsp;</td><td>Eppendorf&nbsp;</td><td>3123000020</td><td></td></tr><tr><td>10-micro; L tips</td><td>Biologix</td><td>23-0010A</td><td></td></tr><tr><td>Ago ultra-fine BD 1,0 mL 31 G, 12,7 mm</td><td>Becton Dickinson (BD) Scuola di Biologie</td><td>328411</td><td></td></tr><tr><td>Software BioRender</td><td>BioRender</td><td>https://biorender.com</td><td></td></tr><tr><td>Etanolo Assoluto (AR)</td><td>Sigma-Aldrich Chemie GmbH&nbsp;</td><td>107017</td><td></td></tr><tr><td>Fine forceps stile #5</td><td>Sigma Aldrich & nbsp;</td><td>T4537</td><td></td></tr><tr><td>Software GraphPad Prism 8</td><td>GraphPad Software</td><td>https://www.graphpad.com</td><td></td></tr><tr><td>JIK Bleach Regular&nbsp;</td><td>Reckitt Benckiser Ltd</td><td>Kikuubo Online</td><td></td></tr><tr><td>Vedute per microscopio</td><td>Sigma Aldrich & nbsp;</td><td>CLS294875X25</td><td></td></tr><tr><td>Spettrofotometro a microvolume</td><td>Spettrofotometro UV-Vis a microvolume</td><td>Thermo Scientific NanoDrop One/OneC Microvolume UV-Vis Spectrophotometro | Fisher Scientific</td><td></td></tr><tr><td>Paraplast Plus Paraffin Wax&nbsp;</td><td>LEICA BIOSYSTEMS&nbsp;</td><td>39602004</td><td></td></tr><tr><td>Acqua PCR Ambion & nbsp;</td><td>Ambion</td><td>AM9935</td><td></td></tr><tr><td>piastra di Petri, vetro, 100 mm e acuto; 15 mm</td><td>Duran</td><td>237554608</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina tamponata con fosfato (PBS)</td><td>Sigma Aldrich & nbsp;</td><td>79378</td><td></td></tr><tr><td>Plastilina (argilla da modellazione non tossica) & nbsp;</td><td>Il Magazzino del Laboratorio & nbsp;</td><td>SE180-45</td><td></td></tr><tr><td>Lame da bisturi, n. 11</td><td>Sigma Aldrich & nbsp;</td><td>S2771</td><td></td></tr><tr><td>Manico a bisturi</td><td>Sigma Aldrich & nbsp;</td><td>S2896</td><td></td></tr><tr><td>STEMI 2000-C MICROSCOPIO STEREO</td><td>Zeiss, Oberkochen, Germania</td><td>455053-0000-000</td><td></td></tr><tr><td>Nastro transperant</td><td>Scotch Magic</td><td>MID 70005189280</td><td></td></tr></tbody></table>

estrazione di saliva, emolinfa, ghiandole salivari e intestino medio da singole zecche (acari: ixodidae)

Extraction of Saliva, Haemolymph, Salivary Glands, and Midgut from Individual Ticks (Acari: Ixodidae)

Questo protocollo ha facilitato la raccolta di campioni di zecche e tessuti biologici necessari per lo screening dei patogeni e altre analisi a valle. La Figura 1, la Figura 2 e la Figura 3 illustrano la raccolta di saliva, emolinfa, ghiandole salivari e intestino medio da zecche femmine di Hy. rufipes parzialmente e completamente gonfie. Queste zecche sono state ottenute da una colonia di zecche allevata in condizioni cont...

Estrazione di saliva, emolinfa, ghiandole salivari e intestino medio da singole zecche (Acari: Ixodidae)

Ticks are blood-feeding ectoparasites recognised for their ability to transmit several infectious pathogens to humans and animals. Tick-borne pathogen ...

extraction-saliva-haemolymph-salivary-glands-midgut-from-individual

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Immunology and Infection

Immunologia e Infezioni

Il midgut zanzara e delle ghiandole salivari sono di entrata e di uscita principali per il vettore di agenti patogeni come il Plasmodium falciparum ed il virus dengue. Questo video mostra le tecniche di dissezione per la rimozione delle ghiandole salivari e midgut da zanzare Aedes aegypti.

Dissezione delle ghiandole salivari e midgut da Ae. aegypti zanzare

Malattia di Lyme studi di ricerca spesso richiedono la generazione di zecche infette dal patogeno Borrelia burgdorferi, un processo che richiede in genere diverse settimane. Qui si dimostrano una microiniezione procedura basata infezione zecca che può essere compiuto entro poche ore. Abbiamo anche dimostrare un metodo di immunofluorescenza per la localizzazione in situ di B. burgdorferi in zecche.

Metodi per il trasferimento rapido e localizzazione di agenti patogeni malattia di Lyme All&#39;interno della Gut Tick

La raccolta di emolinfa zecca infetta, ghiandole salivari, e la saliva è importante studiare come zecche patogeni causare la malattia. In questo protocollo si dimostra come raccogliere emolinfa ghiandole salivari e di...

Saliva, le ghiandole salivari, e Collection emolinfa dalle zecche Ixodes scapularis

La malattia di Lyme è la più comunemente riportati vector-borne malattia in Nord America. L'agente eziologico, Borrelia burgdorferi è un batterio spirocheta trasmessa da zecche ixodid. Trasmissione e rilevamento di un'infezione in modelli animali è ottimizzata dall'utilizzo di alimentazione tick, che descriveremo qui.

Alimentazione di zecche su animali per trasmissione e Xenodiagnosis a Lyme Disease Research

La produzione di zecche allevate in laboratorio sano è essenziale per gli studi di biologia tick, tick e-patogeno interazioni. Qui mostriamo un semplice protocollo per l'alimentazione tick immaturo che è costo-efficace e meno stressante per i topi.

impennata<em&gt; Ixodes scapularis,</em&gt; Il Tick Black-legged: Alimentazione stadi immaturi sui topi

Una metodologia basata sulla gradiente di centrifugazione a densità modificata è stata utilizzata per isolare le cellule epiteliali del tessuto intestinale di Rhipicephalus microplus . Le proteine ​​legate alle superfici sono state biotinilate e purificate mediante perline magnetiche di streptavidina per l'utilizzo nelle applicazioni a valle.

Purificazione delle proteine ​​superficiali delle cellule biotinilate da<em&gt; Rhipicephalus microplus</em&gt; Cellule epiteliali delle ghiandole

Qui, presentiamo un protocollo per spazialmente e temporalmente valutare la presenza del microbiota praticabile nelle viscere di segno di spunta utilizzando un approccio modificato intero-monta l'ibridazione in situ.

Visualizzazione del Microbiota in Tick budella di intero-monta In Situ di ibridazione

L'analisi di tick emolinfa rappresenta un'importante fonte di informazioni su come alcuni patogeni causano malattie e come le zecche rispondono immunologicamente a questa infezione. Il presente studio dimostra come inoculare propagule fungine e raccogliere emolinfa da Rhipicephalus MicroPlus femmine gonfio.

Rivelare la raccolta di hemolymph e l'inoculo di Metarhizium blastospores in Rhipicephalus MicroPlus zecche verso gli studi di patologia degli invertebrati

Il presente protocollo descrive l'isolamento dei microRNA dalle ghiandole salivari delle zecche e dalle vescicole extracellulari purificate. Questa è una procedura universale che combina reagenti e forniture comunemente usati. Il metodo consente anche l'uso di un piccolo numero di zecche, con conseguente microRNA di qualità che possono essere facilmente sequenziati.

Isolamento di microRNA da colture di ghiandole salivari Tick Ex Vivo e vescicole extracellulari

Questo articolo presenta la metodologia per esporre l'uomo alla larva di Ixodes scapularis per la ricerca clinica. La tecnica è relativamente semplice, tollerabile dai volontari della ricerca e può essere modificata in base alle esigenze sperimentali. Tale ricerca che coinvolge soggetti umani deve essere condotta secondo protocolli di studio clinico approvati dalle autorità regolatorie competenti.

Un modello per l'esposizione sperimentale dell'uomo alle zecche larvali di Ixodes scapularis

Questo metodo delinea lo sviluppo di un sistema di alimentazione del sangue con zecche in vitro che incorpora una camera stampata in 3D e una membrana in silicone fabbricata in laboratorio. Il sistema consente l'alimentazione artificiale delle zecche, consentendo un facile campionamento in varie fasi di alimentazione e utilizzando bassi volumi di sangue, fornendo uno strumento prezioso per studiare le zecche ixodidi.

Sangue di zecca che si alimenta attraverso una membrana artificiale su una camera stampata in 3D nella ricerca sulle zecche Ixodid

Impara a estrarre saliva, emolinfa, ghiandole salivari e intestino medio da singole zecche Ixodidae. Questo protocollo consente di studiare la localizzazione tissutale dei patogeni trasmessi dalle zecche.

Estrazione di saliva, emolinfa, ghiandole salivari e intestino medio da singole zecche (Acari: Ixodidae)

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