Name: Modellazione della riparazione alveolare polmonare displastica e funzionale dopo linfezione influenzale (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-19T14:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 45 s
Description: Scopri la modellazione della riparazione alveolare polmonare dopo infezione influenzale nei topi. Questo metodo analizza risposte cellulari e cambiamenti trascrittionali per studiare meccanismi di riparazione del tessuto polmonare.

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<ol><li>Mammoto, A., Mammoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+niche+in+lung+alveolar+development%2C+homeostasis%2C+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Vascular niche in lung alveolar development, homeostasis, and regeneration.</a> Front Bioeng Biotechnol. 7, 318(2019).</li>
<li>Tsikis, S. T., Hirsch, T. I., Fligor, S. C., Quigley, M., Puder, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+the+lung+endothelial+niche+to+promote+angiogenesis+and+regeneration%3A+a+review+of+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Biosci%22%5BJournal%5D)">Targeting the lung endothelial niche to promote angiogenesis and regeneration: a review of applications.</a> Front Mol Biosci. 9, 1093369(2022).</li>
<li>Torrego, A., Pajares, V., Mola, A., Lerma, E., Franquet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+A+%28H1N1%29+organising+pneumonia%3A+figure+1%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Case+Rep%22%5BJournal%5D)">Influenza A (H1N1) organising pneumonia: figure 1.</a> BMJ Case Rep. 2010, bcr1220092531(2010).</li>
<li>Murota, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+H1N1+virus-associated+pneumonia+often+resembles+rapidly+progressive+interstitial+lung+disease+seen+in+collagen+vascular+diseases+and+COVID-19+pneumonia%3B+CT-pathologic+correlation+in+24+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Radiol+Open%22%5BJournal%5D)">Influenza H1N1 virus-associated pneumonia often resembles rapidly progressive interstitial lung disease seen in collagen vascular diseases and COVID-19 pneumonia; CT-pathologic correlation in 24 patients.</a> Eur J Radiol Open. 7, 100297(2020).</li>
<li>Niethamer, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+the+role+of+pulmonary+endothelial+cell+heterogeneity+in+the+response+to+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Defining the role of pulmonary endothelial cell heterogeneity in the response to acute lung injury.</a> eLife. 9, e53072(2020).</li>
<li>Klomp, M., Ghosh, S., Mohammed, S., Khan, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+virus+to+inflammation%2C+how+influenza+promotes+lung+damage%5BTitle%5D)+AND+%22J+Leukoc+Biol%22%5BJournal%5D)">From virus to inflammation, how influenza promotes lung damage.</a> J Leukoc Biol. 110 (1), 115-122 (2021).</li>
<li>Newton, A. H., Cardani, A., Braciale, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+host+immune+response+in+respiratory+virus+infection%3A+balancing+virus+clearance+and+immunopathology%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunopathol%22%5BJournal%5D)">The host immune response in respiratory virus infection: balancing virus clearance and immunopathology.</a> Semin Immunopathol. 38 (4), 471-482 (2016).</li>
<li>Jones, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+injury-induced+mesenchymal-epithelial+cell+niche+coordinates+regenerative+responses+in+the+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">An injury-induced mesenchymal-epithelial cell niche coordinates regenerative responses in the lung.</a> Science. 386 (6727), eado5561(2024).</li>
<li>Niethamer, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+single-cell+profiles+of+lung+regeneration+after+viral+infection+reveal+persistent+injury-associated+cell+states%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Longitudinal single-cell profiles of lung regeneration after viral infection reveal persistent injury-associated cell states.</a> Cell Stem Cell. 32 (2), 302-321.e6 (2025).</li>
<li>Belser, J. A., Gustin, K. M., Katz, J. M., Maines, T. R., Tumpey, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+traditional+intranasal+and+aerosol+inhalation+inoculation+of+mice+with+influenza+A+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Virology%22%5BJournal%5D)">Comparison of traditional intranasal and aerosol inhalation inoculation of mice with influenza A viruses.</a> Virology. 481, 107-112 (2015).</li>
<li>Oltean, T., Maelfait, J., Saelens, X., Vandenabeele, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Need+for+standardization+of+influenza+A+virus-induced+cell+death+in+vivo+to+improve+consistency+of+inter-laboratory+research+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Discov%22%5BJournal%5D)">Need for standardization of influenza A virus-induced cell death in vivo to improve consistency of inter-laboratory research findings.</a> Cell Death Discov. 10 (1), 247(2024).</li>
<li>Nguyen, T. -Q., Rollon, R., Choi, Y. -K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+influenza+research%3A+strengths+and+weaknesses%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Animal models for influenza research: strengths and weaknesses.</a> Viruses. 13 (6), 1011(2021).</li>
<li>Jin, X. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+pathogenicity+of+influenza+virus-induced+pneumonia+mouse+model+following+intranasal+and+aerosolized+intratracheal+inoculation%5BTitle%5D)+AND+%22Virol+J%22%5BJournal%5D)">Comparative pathogenicity of influenza virus-induced pneumonia mouse model following intranasal and aerosolized intratracheal inoculation.</a> Virol J. 21 (1), 240(2024).</li>
<li>Revelli, D. A., Boylan, J. A., Gherardini, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-invasive+intratracheal+inoculation+method+for+the+study+of+pulmonary+melioidosis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">A non-invasive intratracheal inoculation method for the study of pulmonary melioidosis.</a> Front Cell Infect Microbiol. 2, 164(2012).</li>
<li>Cantu, A., Gutierrez, M. C., Dong, X., Leek, C., Anguera, M., Lingappan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+recovery+from+neonatal+hyperoxic+lung+injury+by+sex+as+a+biological+variable%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biol%22%5BJournal%5D)">Modulation of recovery from neonatal hyperoxic lung injury by sex as a biological variable.</a> Redox Biol. 68, 102933(2023).</li>
<li>Sunagar, R., Kumar, S., Namjoshi, P., Rosa, S. J., Hazlett, K. R. O., Gosselin, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+an+outbred+mouse+model+for+Francisella+tularensis+vaccine+development+and+testing%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Evaluation of an outbred mouse model for Francisella tularensis vaccine development and testing.</a> PLoS One. 13 (12), e0207587(2018).</li>
<li>Cowley, P. M., Roberts, C. R., Baker, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+the+health+status+of+mice+with+bleomycin-induced+lung+injury+by+using+body+condition+scoring%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Monitoring the health status of mice with bleomycin-induced lung injury by using body condition scoring.</a> Comp Med. 69 (2), 95-102 (2019).</li>
<li>Gonzalez, A. J., Ijezie, E. C., Balemba, O. B., Miura, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attenuation+of+influenza+A+virus+disease+severity+by+viral+coinfection+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Attenuation of influenza A virus disease severity by viral coinfection in a mouse model.</a> J Virol. 92 (23), e00881-e00918 (2018).</li>
<li>Lv, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetics+of+pulmonary+immune+cells%2C+antibody+responses+and+their+correlations+with+the+viral+clearance+of+influenza+A+fatal+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Virol+J%22%5BJournal%5D)">Kinetics of pulmonary immune cells, antibody responses and their correlations with the viral clearance of influenza A fatal infection in mice.</a> Virol J. 11, 57(2014).</li>
<li>Liberti, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+epithelial+cell+fate+is+maintained+in+a+spatially+restricted+manner+to+promote+lung+regeneration+after+acute+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Alveolar epithelial cell fate is maintained in a spatially restricted manner to promote lung regeneration after acute injury.</a> Cell Rep. 35 (6), 109092(2021).</li>
<li>Cipolla, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhalable+and+nasal+biologics%3A+analytical%2C+formulation%2C+development%2C+and+regulatory+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Aerosol+Med+Pulm+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Inhalable and nasal biologics: analytical, formulation, development, and regulatory considerations.</a> J Aerosol Med Pulm Drug Deliv. 2024, (2025).</li>
<li>Cardiff, R. D., Miller, C. H., Munn, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manual+hematoxylin+and+eosin+staining+of+mouse+tissue+sections%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Protoc%22%5BJournal%5D)">Manual hematoxylin and eosin staining of mouse tissue sections.</a> Cold Spring Harb Protoc. 2014 (6), (2014).</li>
<li>Bouvier, N. M., Lowen, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+influenza+virus+pathogenesis+and+transmission%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Animal models for influenza virus pathogenesis and transmission.</a> Viruses. 2 (8), 1530-1563 (2010).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1,5 mL tubo &nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-682-557</td><td></td></tr><tr><td>100 & micro; Filtro per cellule M</td><td>Falcone</td><td>352360</td><td></td></tr><tr><td>Valvola conica da 15 mL</td><td>Falcone</td><td>352196</td><td></td></tr><tr><td>1x PBS</td><td>Gibc0</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>40 & micro; Filtro per cellule M</td><td>Falcone</td><td>352340</td><td></td></tr><tr><td>Tubo da 5 mL</td><td>Globe</td><td>6101C</td><td></td></tr><tr><td>Tubo conico da 50 mL</td><td>Falcone</td><td>352098</td><td></td></tr><tr><td>Stock A/PR/8/34 Virus Influenzale</td><td>ATCC&nbsp;</td><td>VR-95PQ</td><td>Lotti diversi hanno titoli virali differenti</td></tr><tr><td>Buffer di lisi ACK</td><td>Qualità Biologica</td><td>118-156-101</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo anti-TRKB</td><td>R& Sistemi D</td><td>AF1494</td><td></td></tr><tr><td>Candeggina</td><td>Clorox</td><td></td><td>Candeggina al 10%</td></tr><tr><td>Albumina Sirica Bovina</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A8022</td><td></td></tr><tr><td>Camera di induzione per anestesia CO2</td><td>Qualsiasi</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Collagenasi di tipo I</td><td>Gibco</td><td>17100017</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Milipore Sigma</td><td>28718-90-3</td><td></td></tr><tr><td>Dispasi</td><td>Corning</td><td>CB-40235</td><td></td></tr><tr><td>Strumenti per la dissezione: forbici, pinze curve, pinze dritte</td><td>Qualsiasi</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Dnase</td><td>Sigma Aldrich</td><td>4716728001</td><td></td></tr><tr><td>D-PBS</td><td>Corning</td><td>21-031-CM</td><td></td></tr><tr><td>Etanolo</td><td>Pharmco</td><td>111000200</td><td></td></tr><tr><td>Fiale di vetro</td><td>DWK Scienze della Vita</td><td>986562</td><td></td></tr><tr><td>Secchio di ghiaccio</td><td>Qualsiasi</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Covetrus</td><td>29404</td><td></td></tr><tr><td>Aghi, 21 e sigillo; 23 G</td><td>Qualsiasi</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>P20/P200 pipetta &nbsp;</td><td>Pipetman</td><td>F144056M/F144058M,</td><td></td></tr><tr><td>Punte per pipette P20/P200</td><td>Thomas Scientific</td><td>1159M43/1159M40</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldeide (PFA)&nbsp;</td><td>Thermo Scientific</td><td>J19943-k2</td><td>2%PFA</td></tr><tr><td>Pipetman</td><td>Qualsiasi</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Scatole per congelatori in plastica o cartone</td><td>Qualsiasi</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Lametta di rasoio</td><td>Qualsiasi</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Ring Stand</td><td>Qualsiasi</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Pipete sierologiche, 5 mL</td><td>Falcone</td><td>357543</td><td></td></tr><tr><td>Camera di isoflurano per topo a induzione a scorrimento</td><td>Somni Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sutura</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9422522</td><td></td></tr><tr><td>Tubi a siringa e luer-lock</td><td>Qualsiasi</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Siringa, 10 mL</td><td>Qualsiasi</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Macchina per anestesia da tavolo Isoflurano</td><td>Ohmeda</td><td>Ohmeda Isotec- 4</td><td>La portata dovrebbe essere 2,5 e il tanello; 3%</td></tr><tr><td>Agarosio a fusione ultra-bassa</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A5030-1G</td><td></td></tr><tr><td>Bilancia di pesatura</td><td>OHAUS</td><td>CS200</td><td></td></tr></tbody></table>

modellazione della riparazione alveolare polmonare displastica e funzionale dopo l'infezione influenzale

Modeling Dysplastic and Functional Lung Alveolar Repair after Influenza Infection

Modellazione della riparazione alveolare polmonare displastica e funzionale dopo l'infezione influenzale

Viral infection causes both acute and long-term damage to the lung alveolus, the specialized tissue structure responsible for gas exchange between the ...

modeling-dysplastic-functional-lung-alveolar-repair-after-influenza

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Immunology and Infection

Immunologia e Infezioni

Descriviamo l'isolamento rapido di primarie murine di tipo II le cellule epiteliali alveolari (AECII) per selezione di citometria di flusso negativo. Questi AECII mostrano alta vitalità e purezza e sono adatte per una vasta gamma di studi funzionali e molecolari riguardanti il ​​loro ruolo in condizioni respiratorie come le malattie autoimmuni o infettive.

Flusso Isolamento citometrica di primari murini di tipo II cellule alveolari epiteliali per gli studi funzionali e molecolari

Abbiamo sviluppato un modello di lesione polmonare nel topo mediante iniezione intra-tracheale del batterio Pseudomonas aeruginosa. Questo modello imita il danno polmonare durante la polmonite ed è clinicamente rilevante.

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Modello

Descriviamo un mezzo per misurare rapidamente e semplicemente la capacità di diffusione polmonare nei topi e dimostriamo che è sufficientemente sensibile ai cambiamenti fenotipici in molteplici patologie polmonari comuni.  Questa metrica porta quindi una rilevanza traslazionale diretta ai modelli murini, poiché la capacità di diffusione è facilmente misurabile anche negli esseri umani.

Fenotipizzazione mouse Pulmonary Function In Vivo Con la capacità polmonare Diffusione

La pneumonectomia di topo è un modello comunemente impiegato di crescita polmonare compensatoria. Questa procedura può essere utilizzata in combinazione con il tracciamento del lignaggio o con modelli murini transgenici per chiarire i meccanismi sottostanti.

Topo Pneumonectomia Modello di crescita compensatoria Lung

La superficie interna polmonare (ISA) è un criterio critico per valutare la morfologia polmonare e la fisiologia delle malattie polmonari e della rigenerazione alveolare indotta da lesioni. Qui descriviamo un metodo standardizzato che può ridurre al minimo la polarizzazione di misura per ISA sia nei modelli di polmonite polmonare sia nei modelli di protesi.

Un metodo standardizzato per la misurazione della superficie interna polmonare tramite la polmonite e l&#39;impianto di protesi

Qui, presentiamo metodi per migliorare gli studi secondari sulla polmonite batterica fornendo un percorso non invasivo di instillazione nel tratto respiratorio inferiore seguito dal recupero di patogeni e dall'analisi della trascrizione. Queste procedure sono riproducibili e possono essere eseguite senza apparecchiature specializzate come cannula, cavi guida o cavi in fibra ottica.

Un sistema preciso di distribuzione e recupero di patogeni per i modelli Murine di polmonite batterica secondaria

Questo manoscritto descrive la creazione di un modello infettivo di polmonite nei topi e la rispettiva caratterizzazione della risoluzione delle lesioni insieme ai metodi per la crescita dei batteri e l'instillazione intratracheale. Viene inoltre descritto un nuovo approccio che utilizza la citometria a flusso ad alta dimensione per valutare il panorama immunitario.

Modello sperimentale per valutare la risoluzione della polmonite

I modelli Lung-on-chip superano le tradizionali colture 2D imitando l'interfaccia aria-liquido e la perfusione delle cellule endoteliali, simulando il flusso sanguigno e lo scambio di nutrienti cruciali per gli studi di fisiologia polmonare. Ciò migliora la rilevanza della ricerca polmonare, offrendo un ambiente dinamico e fisiologicamente accurato per far progredire la comprensione e il trattamento delle infezioni respiratorie.

Modello immunocompetente di alveoli su chip per lo studio delle risposte immunitarie della mucosa alveolare

Questo protocollo dimostra la tecnica di aspirazione orofaringea per l'uso nel modello murino di bleomicina di fibrosi polmonare.

Somministrazione orofaringea di bleomicina nel modello murino di fibrosi polmonare

Questo protocollo delinea un metodo per indurre la fibrosi polmonare nei topi attraverso la somministrazione ripetuta di bleomicina per via orofaringea, producendo caratteristiche patologiche molto simili a quelle della fibrosi polmonare idiopatica.

Modello murino raffinato di fibrosi polmonare idiopatica

Scopri la modellazione della riparazione alveolare polmonare dopo infezione influenzale nei topi. Questo metodo analizza risposte cellulari e cambiamenti trascrittionali per studiare meccanismi di riparazione del tessuto polmonare.

Modellazione della riparazione alveolare polmonare displastica e funzionale dopo l'infezione influenzale

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