Name: Modellizzazione dellipossia/lesione da reossigenazione nelle cellule epiteliali tubolari prossimali (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 23 s
Description: Scopri un protocollo in vitro per modellare la lesione da ischemia-riperfusione renale nelle cellule epiteliali tubulari prossimali. Questo metodo consente di studiare i meccanismi di danno e identificare nuove strategie terapeutiche.

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<table><tbody><tr><td>Placca qPCR a 384 pozzi</td><td>Biosistemi applicati</td><td>4309849</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuga</td><td>Ortoalresa</td><td>Biocen22R</td><td></td></tr><tr><td>Cloroformio</td><td>VWR</td><td>0757-500ML</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12</td><td>Gibco</td><td>21331020</td><td></td></tr><tr><td>Fattore di crescita epidermica</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E9644</td><td></td></tr><tr><td>Etanolo</td><td>PanReac AppliChem</td><td>141086.1214</td><td></td></tr><tr><td>FCS</td><td>Biowest</td><td>S181B-500</td><td></td></tr><tr><td>Blocco riscaldante</td><td>Eppendorf</td><td>ThermoMixer C</td><td></td></tr><tr><td>Idrocortisone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H0135</td><td></td></tr><tr><td>Incubatore per ipossia</td><td>Memmert</td><td>ICO 50med</td><td></td></tr><tr><td>IFN-&gamma;</td><td>ProspecBIo</td><td>CYT-358</td><td></td></tr><tr><td>Incubatore</td><td>Memmert</td><td>ICO 105</td><td></td></tr><tr><td>Isopropanolo</td><td>VWR</td><td>0918-1L</td><td></td></tr><tr><td>ITSe</td><td>Gibco</td><td>41400045</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamina</td><td>Gibco</td><td>25030081</td><td></td></tr><tr><td>Piotetta multicanale</td><td>Eppendorf</td><td>3125000052</td><td></td></tr><tr><td>Incubatore non CO2</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Primer PCR</td><td>Eurofins Genomica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Penicillina - Streptomycina</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>Mix Master qPCR</td><td>NZYTech</td><td>MB22303</td><td></td></tr><tr><td>Sistema qPCR in tempo reale</td><td>Biosistemi applicati</td><td>QuantStudio 5</td><td></td></tr><tr><td>Mix Master a trascrizione inversa</td><td>NZYTech</td><td>MB12502</td><td>Contiene una miscela enzimatica</td></tr><tr><td>Acqua priva di RNAsi</td><td>HyClone</td><td>SH3053802</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF Cell Mito Stress Test Kit</td><td>Agilent</td><td>103015-100</td><td>Contiene oligomicina, FCCP, antimicina A e rotenone</td></tr><tr><td>Cavallo marino XF DMEM medio</td><td>Agilent</td><td>103575-100</td><td></td></tr><tr><td>Glucosio Seahorse XF</td><td>Agilent</td><td>03577-100</td><td></td></tr><tr><td>Glutammina XF di cavalluccio marino</td><td>Agilent</td><td>103579-100</td><td></td></tr><tr><td>Cavalluccio Marino XF Piruvato</td><td>Agilent</td><td>103578-100</td><td></td></tr><tr><td>Analizzatore Seahorse XFe96</td><td>Agilent</td><td>S7800BR</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XFe96 FluxPak</td><td>Agilent</td><td>103792-100</td><td>Contiene micropiastra di coltura cellulare XFe96 e cartuccia sensore XFe96</td></tr><tr><td>Thermal cycler</td><td>BIO-RAD</td><td>T100 Thermal Cycler</td><td></td></tr><tr><td>Triiodotironina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T5516</td><td></td></tr><tr><td>Trizol</td><td>Invitrogen</td><td>15596026</td><td></td></tr><tr><td>Spettrofotometro UV-Vis</td><td>DeNovix</td><td>DS-11</td><td></td></tr></tbody></table>

modellizzazione dell'ipossia/lesione da reossigenazione nelle cellule epiteliali tubolari prossimali

Modeling Hypoxia/Reoxygenation Injury in Proximal Tubular Epithelial Cells

Modellizzazione dell'ipossia/lesione da reossigenazione nelle cellule epiteliali tubolari prossimali

Kidney transplantation accounts for approximately 60%-65% of all transplanted solid organs. Most donor kidneys are obtained from deceased individuals, ...

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Biologia

Gli effetti di attivazione di proteina chinasi C (PKC) isoenzimi sulle funzioni mitocondriali associate respirazione e fosforilazione ossidativa e sulla vitalità cellulare sono descritti. L'approccio si adatta tecnica adenovirale per sovraesprimere selettivamente isoenzimi PKC in coltura primaria e una varietà di saggi per determinare le funzioni mitocondriali e lo stato energetico della cellula.

La valutazione delle funzioni mitocondriali e la vitalità cellulare in cellule renali proteina chinasi C overexpressing isoenzimi

Fonte: Alluri, H., et.al. Deprivazione e riossigenazione di ossigeno-glucosio come modello di lesione da ischemia-riperfusione in vitro per lo studio della disfunzione della barriera emato-encefalica. J. Vis. Exp. (2015).Il video dimostra l'impatto della privazione di ossigeno-glucosio e della successiva riossigenazione sulle cellule endoteliali microvascolari del cervello di ratto (RBMEC) simulando condizioni ipossiche e prive di nutrienti. Queste condizioni provocano la deplezione dell'ATP,...

Impatto della privazione e della riossigenazione ossigeno-glucosio sulle interazioni cellula-cellula

'Il danno da ischemia-riperfusione (IR) è associato a un alto tasso di morbilità e mortalità. L'obiettivo del modello in vitro di deprivazione e riossigenazione di ossigeno-glucosio (OGD-R) qui descritto è valutare gli effetti del danno da riperfusione ischemica su una varietà di cellule, in particolare nelle cellule endoteliali della barriera emato-encefalica (BBB).

L&#39;ossigeno-glucosio Deprivazione e riossigenazione come<em&gt; In Vitro</em&gt; Ischemia-riperfusione Injury modello per lo studio barriera sanguigna del cervello Erettile

Questo protocollo fornisce un approccio conveniente per isolare e caratterizzare del mouse primario cellule tubolari renali che possono successivamente essere sub-coltivate per valutare funzioni biologiche renale ex vivo, tra cui bioenergetiche mitocondriali.

Isolamento, caratterizzazione e Throughput elevato flusso extracellulare analisi di cellule epiteliali tubolari renali primari del Mouse

Questo protocollo descrive un modello di enterocolite necrotizzante apicale (NEC) in un piatto che utilizza enteroidi intestinali piccoli con polarità invertita, consentendo l'accesso alla superficie apicale. Forniamo un protocollo di colorazione immunofluorescente per rilevare l'interruzione epiteliale correlata al NEC e un metodo per determinare la vitalità degli enteroidi apicali-out sottoposti al protocollo NEC-in-a-dish.

In vitro Modello enteroide apical-out di enterocolite necrotizzante

Qui, descriviamo i protocolli per ottenere colture primarie di cellule epiteliali tubulari renali umane (HRTEC) dalla corteccia renale per sviluppare monostrati e colture tridimensionali su una matrice extracellulare (3D-HRTEC).

Sviluppo di colture primarie di cellule epiteliali tubulari renali umane in monostrati e condizioni tridimensionali

Presentiamo un protocollo ottimizzato per l'elaborazione di interi reni umani per isolare e coltivare cellule epiteliali del tubulo prossimale renale primario e l'applicazione di queste cellule in una piattaforma microfluidica tridimensionale, microfluidica e microfisiologica per ricapitolare il tubulo prossimale renale.

Isolamento di cellule epiteliali primarie del tubulo prossimale umano e loro utilizzo nella creazione di un modello microfisiologico del tubulo prossimale renale

Gli organoidi cardiaci umani autoassemblanti (hCO) sono un sistema emergente per modellare lo sviluppo e le malattie cardiache umane. Qui viene fornita una metodologia per generare e danneggiare gli hCOs con ipossia-reoxygenazione e dettagli sugli esiti istologici e funzionali attesi dopo l'infortunio.

Un modello di lesione da ipossia-reossigenazione in cardioidi umani autoassemblanti

Qui si descrive un metodo dettagliato per la coltivazione primaria cellule epiteliali bronchiali umane da espianti di tessuti umani delle vie aeree bronchiali tra cui la crescita differenziati su un aria-liquido. Questo metodo fornisce una fonte abbondante di cellule primarie per indagare il ruolo dell'epitelio delle vie aeree dei polmoni umani nella salute e nella malattia.

Primario cellule epiteliali bronchiali umane Grown da espianti

CHIRP è una tecnica innovativa e rapida mappa genomica siti di legame di RNA non codificanti lunghi (lncRNAs). Il metodo sfrutta la specificità di oligonucleotidi anti-senso di affiancamento per consentire l'enumerazione di lncRNA-bound siti genomici.

Isolamento di cromatina Purificazione RNA (disturbo)

Scopri un protocollo in vitro per modellare la lesione da ischemia-riperfusione renale nelle cellule epiteliali tubulari prossimali. Questo metodo consente di studiare i meccanismi di danno e identificare nuove strategie terapeutiche.

Modellizzazione dell'ipossia/lesione da reossigenazione nelle cellule epiteliali tubolari prossimali

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