Name: Imaging molecolare spaziale del Glycome tramite spettrometria di massa (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-28T12:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 52 s
Description: Impara l'imaging molecolare spaziale del glicoma usando la spettrometria di massa MALDI. Questo protocollo consente di misurare glicogeno e glicani N-linked nei tessuti epatici con elevata riproducibilità.

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<ol><li>Caprioli, R. M., Farmer, T. B., Gile, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+of+biological+samples%3A+Localization+of+peptides+and+proteins+using+MALDI-TOF+MS%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging of biological samples: Localization of peptides and proteins using MALDI-TOF MS.</a> Anal Chem. 69 (23), 4751-4760 (1997).</li>
<li>Buchberger, A. R., Delaney, K., Johnson, J., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mass+spectrometry+imaging%3A+A+review+of+emerging+advancements+and+future+insights%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Mass spectrometry imaging: A review of emerging advancements and future insights.</a> Anal Chem. 90 (1), 240-265 (2018).</li>
<li>Ouedraogo, R., Daumas, A., Capo, C., Mege, J. L., Textoris, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-cell+MALDI-TOF+mass+spectrometry+is+an+accurate+and+rapid+method+to+analyze+different+modes+of+macrophage+activation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Whole-cell MALDI-TOF mass spectrometry is an accurate and rapid method to analyze different modes of macrophage activation.</a> J Vis Exp. 82, e50926(2013).</li>
<li>Khalil, S. M., Cappuccio, G., Li, F., Maletic-Savatic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+of+human+brain+organoids+using+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging of human brain organoids using mass spectrometry.</a> J Vis Exp. 211, e66997(2024).</li>
<li>Sun, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+glycogen+serves+as+a+critical+glucosamine+cache+required+for+protein+glycosylation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">Brain glycogen serves as a critical glucosamine cache required for protein glycosylation.</a> Cell Metab. 33 (7), 1404-1417 (2021).</li>
<li>Aichler, M., Walch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maldi+imaging+mass+spectrometry%3A+Current+frontiers+and+perspectives+in+pathology+research+and+practice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Maldi imaging mass spectrometry: Current frontiers and perspectives in pathology research and practice.</a> Lab Invest. 95 (4), 422-431 (2015).</li>
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<li>Seeley, E. H., Caprioli, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+of+proteins+in+tissues+by+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging of proteins in tissues by mass spectrometry.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105 (47), 18126-18131 (2008).</li>
<li>Powers, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix-assisted+laser+desorption+ionization+imaging+mass+spectrometry+workflow+for+spatial+profiling+analysis+of+N-linked+glycan+expression+in+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Matrix-assisted laser desorption ionization imaging mass spectrometry workflow for spatial profiling analysis of N-linked glycan expression in tissues.</a> Anal Chem. 85 (20), 9799-9806 (2013).</li>
<li>Drake, R. R., Powers, T. W., Norris-Caneda, K., Mehta, A. S., Angel, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+imaging+of+N-glycans+by+MALDI+imaging+mass+spectrometry+of+fresh+or+formalin-fixed+paraffin-embedded+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Protein+Sci%22%5BJournal%5D)">In situ imaging of N-glycans by MALDI imaging mass spectrometry of fresh or formalin-fixed paraffin-embedded tissue.</a> Curr Protoc Protein Sci. 94 (1), e68(2018).</li>
<li>Stanback, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+n-glycan+and+lipid+analysis+from+tissues+using+MALDI-MS+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Regional n-glycan and lipid analysis from tissues using MALDI-MS imaging.</a> STAR Protoc. 2 (1), 100304(2021).</li>
<li>Hawkinson, T. R., Sun, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix-assisted+laser+desorption%2Fionization+mass+spectrometry+imaging+of+glycogen+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry imaging of glycogen in situ.</a> Methods Mol Biol. 2437, 215-228 (2022).</li>
<li>Young, L. E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+mass+spectrometry+imaging+reveals+heterogeneous+glycogen+stores+in+human+normal+and+cancerous+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">In situ mass spectrometry imaging reveals heterogeneous glycogen stores in human normal and cancerous tissues.</a> EMBO Mol Med. 14 (11), e16029(2022).</li>
<li>Conroy, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+metabolomics+reveals+glycogen+as+an+actionable+target+for+pulmonary+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Spatial metabolomics reveals glycogen as an actionable target for pulmonary fibrosis.</a> Nat Commun. 14 (1), 2759(2023).</li>
<li>Clarke, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycogen+drives+tumor+initiation+and+progression+in+lung+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Metab%22%5BJournal%5D)">Glycogen drives tumor initiation and progression in lung adenocarcinoma.</a> Nat Metab. 7 (5), 952-965 (2025).</li>
<li>Wallace, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+N-glycome+tissue+atlas+of+15+human+normal+and+cancer+tissue+types+determined+by+MALDI+imaging+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">An N-glycome tissue atlas of 15 human normal and cancer tissue types determined by MALDI imaging mass spectrometry.</a> Sci Rep. 14 (1), 489(2024).</li>
<li>Veerasammy, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sample+preparation+for+metabolic+profiling+using+MALDI+mass+spectrometry+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Sample preparation for metabolic profiling using MALDI mass spectrometry imaging.</a> J Vis Exp. 166, e62008(2020).</li>
<li>Mcdowell, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+mass+spectrometry+and+lectin+analysis+of+N-linked+glycans+in+carbohydrate+antigen-defined+pancreatic+cancer+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Proteomics%22%5BJournal%5D)">Imaging mass spectrometry and lectin analysis of N-linked glycans in carbohydrate antigen-defined pancreatic cancer tissues.</a> Mol Cell Proteomics. 20, 100012(2021).</li>
<li>Palmer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FDR-controlled+metabolite+annotation+for+high-resolution+imaging+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">FDR-controlled metabolite annotation for high-resolution imaging mass spectrometry.</a> Nat Methods. 14 (1), 57-60 (2017).</li>
<li>Colpaert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurological+glycogen+storage+diseases+and+emerging+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Neurological glycogen storage diseases and emerging therapeutics.</a> Neurotherapeutics. 21 (5), e00446(2024).</li>
<li>Taylor, M. J., Lukowski, J. K., Anderton, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatially+resolved+mass+spectrometry+at+the+single+cell%3A+Recent+innovations+in+proteomics+and+metabolomics%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Spatially resolved mass spectrometry at the single cell: Recent innovations in proteomics and metabolomics.</a> J Am Soc Mass Spectrom. 32 (4), 872-894 (2021).</li>
<li>Chan, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gel-assisted+mass+spectrometry+imaging+enables+sub-micrometer+spatial+lipidomics%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Gel-assisted mass spectrometry imaging enables sub-micrometer spatial lipidomics.</a> Nat Commun. 15 (1), 5036(2024).</li>
<li>Lim, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maldi+Hiplex-IC%3A+Multiomic+and+multimodal+imaging+of+targeted+intact+proteins+in+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Chem%22%5BJournal%5D)">Maldi Hiplex-IC: Multiomic and multimodal imaging of targeted intact proteins in tissues.</a> Front Chem. 11, 1182404(2023).</li>
<li>Hankin, J. A., Barkley, R. M., Murphy, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sublimation+as+a+method+of+matrix+application+for+mass+spectrometric+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Sublimation as a method of matrix application for mass spectrometric imaging.</a> J Am Soc Mass Spectrom. 18 (9), 1646-1652 (2007).</li>
<li>Rappez, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spacem+reveals+metabolic+states+of+single+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Spacem reveals metabolic states of single cells.</a> Nat Methods. 18 (7), 799-805 (2021).</li>
<li>Grgic, A., Cuypers, E., Dubois, L. J., Ellis, S. R., Heeren, R. M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maldi+MSI+protocol+for+spatial+bottom-up+proteomics+at+single-cell+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22J+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">Maldi MSI protocol for spatial bottom-up proteomics at single-cell resolution.</a> J Proteome Res. 23 (12), 5372-5379 (2024).</li>
<li>Dressman, J. W., Bayram, M. F., Angel, P. M., Drake, R. R., Mehta, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+multiomic+MALDI-MSI+analysis+of+lipids+and+N-glycans+through+affinity+array+capture%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Single-cell multiomic MALDI-MSI analysis of lipids and N-glycans through affinity array capture.</a> Anal Chem. 97 (24), 12493-12502 (2025).</li>
<li>Clarke, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+mapping+of+the+brain+metabolome%2C+lipidome%2C+and+glycome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Spatial mapping of the brain metabolome, lipidome, and glycome.</a> Nat Commun. 16 (1), 4373(2025).</li>
<li>Juras, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+microwave+fixation+provides+an+instantaneous+snapshot+of+the+brain+metabolome%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep+Methods%22%5BJournal%5D)">In situ microwave fixation provides an instantaneous snapshot of the brain metabolome.</a> Cell Rep Methods. 3 (4), 100455(2023).</li>
<li>Cantrell, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+high-power%2C+brain-focused+microwave+fixation+to+define+rodent+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for high-power, brain-focused microwave fixation to define rodent metabolism.</a> STAR Protoc. 6 (2), 103794(2025).</li>
<li>Ma, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+AI-driven+framework+to+map+the+brain+metabolome+in+three+dimensions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Metab%22%5BJournal%5D)">An AI-driven framework to map the brain metabolome in three dimensions.</a> Nat Metab. 7 (4), 842-853 (2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Sottopad assorbente</td><td>Denville Scientific</td><td>B1623</td><td></td></tr><tr><td>Acetonitrile (ACN)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>34851-4X4L</td><td></td></tr><tr><td>Carta stagnola</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>15078292</td><td></td></tr><tr><td>Anidride citraconica</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>125318</td><td></td></tr><tr><td>Tubo conico (15mL)</td><td>Alkali Scientific</td><td>CW5600</td><td></td></tr><tr><td>Vasi Coplin</td><td>DWK Scienze della Vita</td><td>900570</td><td></td></tr><tr><td>Criostato&nbsp;</td><td>Leica</td><td>CM1860</td><td></td></tr><tr><td>Schermo criostatico</td><td>Leica</td><td>14041926491</td><td></td></tr><tr><td>Essiccatore</td><td>Bel Art</td><td>F424004131</td><td></td></tr><tr><td>Coppa per dialisi</td><td>Thermo Fisher</td><td>88400</td><td></td></tr><tr><td>Etanolo</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>22032601</td><td></td></tr><tr><td>Vaporizzatore per cibo</td><td>Rival&nbsp;</td><td>CKRVSTLM21&nbsp; &nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Inserto in vetro (70 mm)</td><td>Gel Company</td><td>LGI50</td><td></td></tr><tr><td>Glicogeno</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8876</td><td>Standard</td></tr><tr><td>Perossidasi di rafano (HRP)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P8125</td><td>Standard</td></tr><tr><td>Acqua HPLC</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>270733-4X4L</td><td></td></tr><tr><td>Spruzzatore HTX</td><td>Tecnologie HTX</td><td>M5</td><td></td></tr><tr><td>Acido cloridrico</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A144-500</td><td></td></tr><tr><td>Isoamilasi</td><td>Megazima</td><td>E-ISAMY</td><td></td></tr><tr><td>Pompa Knauer</td><td>Knauer</td><td>P 4.1 S</td><td></td></tr><tr><td>Lama a profilo basso</td><td>Scienze della microscopia elettronica</td><td>63059-01</td><td></td></tr><tr><td>Supporto di montaggio M1</td><td>Epredia</td><td>1310</td><td></td></tr><tr><td>Spettrometro di massa</td><td>Bruker Daltonics</td><td>timsTOF fleX</td><td></td></tr><tr><td>Tubo Microfuge (1,5mL)</td><td>Alkali Scientific</td><td>CN3016</td><td></td></tr><tr><td>Ago</td><td>BD</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>NBF con formalina neutrale buffered</td><td>Millipore sigma</td><td>HT501128-4L</td><td></td></tr><tr><td>Gas azoto</td><td>Airgas</td><td>NIUHP300</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>SH30256. FS</td><td></td></tr><tr><td>Tubi PCR</td><td>Partner MedSupply</td><td>62-1091-1</td><td></td></tr><tr><td>PNGase F PRIME-LY ULTRA & nbsp;</td><td>Biografia del Bulldog</td><td>NZPULT10LY</td><td></td></tr><tr><td>SCiLS Lab</td><td>Bruker Daltonics</td><td>1889000</td><td></td></tr><tr><td>Shaker</td><td>Thermo Scientific</td><td>88882007</td><td></td></tr><tr><td>Diapositiva&nbsp; &nbsp;</td><td>Scienze del microscopio elettronico</td><td>71873-02</td><td></td></tr><tr><td>Spostatore a diapositive</td><td>Prodotti RPI</td><td>212620A</td><td></td></tr><tr><td>Sonicater (Bioruptor Pico)</td><td>Diagenode</td><td>B01080010</td><td></td></tr><tr><td>Pinza Sterile</td><td>DR Instruments</td><td>S08098</td><td></td></tr><tr><td>Bisturi sterile</td><td>WPI</td><td>WPI-500240</td><td></td></tr><tr><td>Forbici Steriles</td><td>Strumenti scientifici di qualità</td><td>14084-08</td><td></td></tr><tr><td>Siringa&nbsp; &nbsp;</td><td>Grainger</td><td>19G342</td><td></td></tr><tr><td>Pompa a siringa</td><td>Nuova Era</td><td>NE-300</td><td></td></tr><tr><td>Nastro</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>15-901-R</td><td></td></tr><tr><td>Pennello sottile</td><td>Anezus</td><td>#00</td><td></td></tr><tr><td>Acido trifluoroacetico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T6508-1L</td><td></td></tr><tr><td>Tune Mix, ESI a bassa concentrazione</td><td>Agilent</td><td>G1969-85000</td><td></td></tr><tr><td>Barche a peso</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HS120882</td><td></td></tr><tr><td>Xylene</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>534056</td><td></td></tr><tr><td>&alfa;-ciano-4-acido idrossicinnamico (CHCA)</td><td>Azienda Chimica delle Cayman</td><td>15254</td><td></td></tr></tbody></table>

imaging molecolare spaziale del glycome tramite spettrometria di massa

Spatial Molecular Imaging of the Glycome Using Mass Spectrometry

Imaging molecolare spaziale del Glycome tramite spettrometria di massa

The spatial organization of the glycome within tissues is key to the molecular basis for physiological function. The diverse and dynamic glycome is ...

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