Name: Iniezione intratecale lombare di SOD1-ASO per il targeting preciso del sistema nervoso centrale e lefficacia predittiva nei topi umani SOD1-G93A ALS (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-24T13:20:00.000+00:00
Duration: 4 min 41 s
Description: Scopri l'iniezione intratecale lombare libera per la somministrazione di farmaci nel sistema nervoso centrale nei topi. Questa tecnica minimamente invasiva consente il knockdown del gene SOD1 nel modello murino di SLA con elevata riproducibilità e rilevanza clinica.

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<table><tbody><tr><td>0,3 mL 29 G, 1/2 pollice di siringa per iniezione di insulina</td><td>Smiths Medical</td><td>4429-3</td><td></td></tr><tr><td>Bava esterile di 0,5 mm di diametro</td><td>Fine Science Tools (FST), o equivalenti</td><td>1900705</td><td></td></tr><tr><td>Sutura monofilamento Prolene 5-0</td><td>Ethicon&nbsp;</td><td>8870H&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Tamponi alcolici</td><td>Dynarex</td><td>1203</td><td></td></tr><tr><td>Tamponi alcolici</td><td>Dynarex</td><td>1203</td><td></td></tr><tr><td>Analgesico - Buprenorfina a rilascio prolungato</td><td></td><td></td><td>Prescrizione richiesta</td></tr><tr><td>Clipper per animali</td><td>Wahl</td><td>08787-450A</td><td></td></tr><tr><td>Kit di trascrizione inversa cDNA ad alta capacità di Applied Biosystems</td><td>Fisher Scientific</td><td>43-688-14</td><td></td></tr><tr><td>Omogeneizzatore a Rottore a Sferone 24</td><td>Omni International, Inc.</td><td>19-070</td><td></td></tr><tr><td>Raccolta del sangue e tubi di separazione del siero</td><td>Beckton Dickinson (BD)</td><td>365967</td><td></td></tr><tr><td>Diidrato di cloruro di calcio</td><td>JT Baker</td><td>1335</td><td></td></tr><tr><td>Pompa digitale per siringa</td><td>Apparato di Harvard</td><td>70-4507</td><td></td></tr><tr><td>Sistema Immunosaggio Automatico Ella</td><td>R& Sistemi D</td><td>600-100</td><td></td></tr><tr><td>Pomata per gli occhi-Puralube</td><td>Decra</td><td>17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Geno/Grinder</td><td>SPEX SamplePrep</td><td>2010</td><td></td></tr><tr><td>Germinator 500 Sterilizzatore a secco</td><td>Braintree Scientific, o equivalente</td><td>GER 5287-120V</td><td></td></tr><tr><td>Siringa Hamilton con ago (26s/2"/2 (stile a punta)</td><td>Hamilton</td><td>80300</td><td>26s/2"/2:&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 26 secondi: 26 G; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 2" di lunghezza; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 2: stile a punti</td></tr><tr><td>Miscela omogeneizzante di tessuto duro 2,8 mm ceramica (tubi rinforzati da 2 mL) (50/pk)</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-280-9286</td><td>Fornitore: Revvity Health Sciences Inc</td></tr><tr><td>Cuscina Riscaldante</td><td>K& H Manufacturing</td><td>1060</td><td></td></tr><tr><td>Piattaforma ICV</td><td>Stoelting</td><td>502063</td><td></td></tr><tr><td>Camera isoflurano con sistema di scavanging</td><td>VetEquip</td><td>901820</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro di magnesio Heaidrato</td><td>EMD Chemicals</td><td>1.05832</td><td></td></tr><tr><td>Forbici Metzenbaum</td><td>Fine Science Tools (FST), o equivalenti</td><td>14016-14</td><td></td></tr><tr><td>Mouse GAPDH TaqMan ID del test Mm99999915_g1</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>4331182</td><td></td></tr><tr><td>Elettrodi ad ago per CMAP, 28 g</td><td>Natus Medical (marchio Teca)</td><td>#902-DMF25-TP</td><td></td></tr><tr><td>NutraGel: Nutrizione completa</td><td>Bio Serv</td><td>NGB-2</td><td></td></tr><tr><td>Portaago per aghi Olsen-Hegar</td><td>Fine Science Tools (FST), o equivalenti</td><td>12502-12</td><td></td></tr><tr><td>Poloxamer 188</td><td>Mutchler</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cloruro di potassio</td><td>JT Baker</td><td>3045</td><td></td></tr><tr><td>Preamplificatore (per CMAP)</td><td>Strumenti di Precisione Mondiale (WPI)</td><td>SYS-DAM50</td><td></td></tr><tr><td>Kit pNFH ProteinSimple</td><td>R& Sistemi D</td><td>SPCKB-PS-000519</td><td></td></tr><tr><td>Tamponi di providone-iodio</td><td>Dynarex</td><td>1201</td><td></td></tr><tr><td>QIAzol Lysis Reagent&nbsp;</td><td>Qiagen</td><td>79306</td><td></td></tr><tr><td>Sistema Quant Studio 12K Flex</td><td>Biosistemi applicati</td><td>4471087</td><td></td></tr><tr><td>Scoopula</td><td>Fisherbrand</td><td>01-257-567</td><td></td></tr><tr><td>Signal v6.04</td><td>Cambridge Electronic Design</td><td>Numero di serie 061144</td><td>CMAP Software&nbsp;</td></tr><tr><td>Camera di recupero per piccoli animali</td><td>Unità portatili di terapia intensiva per animali Thermocare modello FW-1</td><td>FW-1&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Telaio stereotaxi per piccoli animali con console digitale</td><td>KOPF</td><td>Modello 940&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Mouse SOD1 G93A</td><td>Il Laboratorio Jackson</td><td>Stock # 004435</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro di sodio</td><td>EMD Chemicals</td><td>1.16224</td><td></td></tr><tr><td>Dibase fosfato di sodio anidro</td><td>Sigma Aldrich</td><td>55136</td><td></td></tr><tr><td>Diidrato monobasico di fosfato di sodio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>3819</td><td></td></tr><tr><td>Bisturi sterile usa e getta</td><td>Med Vet International, o equivalente</td><td>MIL4410</td><td></td></tr><tr><td>Drappeggiamento sterile</td><td>Dynarex</td><td>4410</td><td></td></tr><tr><td>Cuscinetti di garza sterili</td><td>Dynarex, o equivalente</td><td>DRX-3354</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina sterile</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14190094</td><td></td></tr><tr><td>Guanti chirurgici sterili</td><td>Ansell, o equivalente</td><td>20277290</td><td></td></tr><tr><td>Isolatore di stimolo (per CMAP)</td><td>Strumenti di Precisione Mondiale (WPI)</td><td>SYS-A365D</td><td></td></tr><tr><td>Stoelting Micro Drill&nbsp;</td><td>Stoelting</td><td>58610</td><td></td></tr><tr><td>Pinze curve chirurgiche (Pinze Graefe - Titanio)</td><td>Fine Science Tools (FST), o equivalenti</td><td>11652-10</td><td></td></tr><tr><td>Pinze chirurgiche per stright (Pinza Graefe - Titanio)</td><td>Fine Science Tools (FST), o equivalenti</td><td>11650-10</td><td></td></tr><tr><td>Nastro chirurgico</td><td>Dynarex, o equivalente</td><td>3572</td><td></td></tr><tr><td>Siringa per iniezione sottocutanea di analgesico</td><td>BD</td><td>309582</td><td></td></tr><tr><td>TaqMan Fast Advanced Master Mix</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>4444556</td><td></td></tr><tr><td>Acqua (Milli-Q)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bilancia</td><td>Mettler Toledo&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Modello XSR2002S</td><td>23-112795</td><td></td></tr><tr><td>Topi selvatici C57BL/6J</td><td>Il Laboratorio Jackson</td><td>Azione # 000664</td><td></td></tr></tbody></table>

iniezione intratecale lombare di sod1-aso per il targeting preciso del sistema nervoso centrale e l'efficacia predittiva nei topi umani sod1-g93a als

Lumbar Intrathecal Injection of SOD1-ASOs for Precise CNS Targeting and Predictive Efficacy in Human SOD1-G93A ALS Mice

Per caratterizzare rigorosamente la precisione e l'efficienza della somministrazione intratecale (IT) nei topi adulti, abbiamo condotto inizialmente esperimenti fondamentali di validazione utilizzando il colorante blu Evans (0,5%) come tracciatore visivo del flusso di liquido cerebrospinale e della permeazione tissutale. I topi adulti selvatici di tipo C57BL/6J (ceppo #000664; peso 25-30g) sono stati anestetizzati con isoflurano (2-2,5%) in ossigeno per eliminare artefatti di movimento, e la regione lombare è stata preparata in condizioni asettiche. Le iniezioni di IT sono state eseguite tramite puntura lombare nello spazio subaracnoideo a singole dosi crescenti di 20 μL, 30 μL e 50 μL per valutare dose/volume e la relazione intensità di colorazione. La corretta posizione dell'ago è stata confermata osservando un movimento della coda o una resistenza negativa durante l'iniezione.
Entro 5 minuti dalla somministrazione del colorante, i topi sono stati perfusi transcardialmente con soluzione salina tamponata con fosfato freddo (PBS) per rimuovere il colorante residuo dal vascolo. I midolli spinali venivano quindi delicatamente estratti e fotografati sotto illuminazione standard su uno sfondo neutro. L'ispezione visiva ha rivelato una distribuzione costante e uniforme da dorsale a ventrale di Evans blue in tutti i topi che hanno ricevuto il colorante. Volumi di iniezione più elevati si correlavano con una saturazione intensificata del colorante lungo l'asse rostrocaudale, anche se anche il topo iniettato con il volume di 20 μL mostrava una colorazione robusta. Al contrario, i topi che non hanno ricevuto il colorante blu di Evans (gruppo di controllo iniettato con soluzione salina sterile) non hanno mostrato colorazione visibile né colorazione di fondo nel tessuto del midollo spinale (Figura 1). Questi risultati dimostrano che le iniezioni di IT nei topi permettono una rapida e riproducibile somministrazione di soluti lungo il midollo spinale. Le limitazioni di questi esperimenti includono la mancanza di una valutazione quantitativa della distribuzione dei coloranti e l'assenza di analisi della distribuzione dei coloranti al volume di iniezione di 10 μL utilizzato per l'amministrazione dell'ASO. Tuttavia, la quantificazione è stata effettuata nelle successive misurazioni di coinvolgimento del bersaglio a livello di espressione genica nei topi umani SOD1-G93A utilizzando analisi dell'espressione genica specifica per SOD1 umana. Il volume di iniezione di 10 μL utilizzato negli esperimenti successivi per l'amministrazione dell'ASO è stato selezionato per garantire una dosaggio sicura e ben tollerata nei topi e si prevede che fornisca un'adeguata esposizione al SNS basandosi su studiprecedenti 38.
Sulla base di questa validazione anatomica, abbiamo poi valutato la rilevanza funzionale della somministrazione IT utilizzando ASO che mirano a SOD1 mutante, una strategia terapeutica validata nei modelli SOD1-ALS. I topi transgenici emisigoti SOD1-G93A, che possiedono il gene mutante umano SOD1 , presentano una prevedibile degenerazione dei neuroni motori e un declino neuromuscolare, rendendoli un modello preclinico consolidato. A 5 settimane di età, prima dell'insorgenza sintomatica, i topi ricevevano un singolo bolus IT di un ASO specifico SOD1 a una concentrazione di 100 μg in 10 μL. Questa dose è stata selezionata sulla base di precedenti studi di ottimizzazione condotti con somministrazione ICV su topi, come riportato da McCampbell et al. (2018)36. Per confrontare l'efficacia tra la somministrazione IT e ICV, un gruppo separato ha ricevuto iniezioni ICV della stessa dose ASO utilizzando la somministrazione stereotattica. I controlli ricevevano l'ASO inattivo (controllo non targeting) tramite la via IT.
Cinque settimane dopo il trattamento (a 10 settimane di età), i topi sono stati sottoposti a test composto del potenziale di azione muscolare (CMAP) sotto anestesia leggera a isoflurano. Le registrazioni CMAP dalla muscolatura degli arti posteriori, stimolate da protocolli standardizzati di stimolazione del nervo sciatico, hanno rivelato una significativa conservazione dell'ampiezza sia nei gruppi trattati con TI che ICV rispetto ai controlli inattivi trattati con ASO (p &lt; 0,0001 tramite ANOVA unidirezionale con il test post hoc di Tukey). È importante notare che la preservazione dell'ampiezza non differiva significativamente tra i metodi di somministrazione di IT e ICV (p &gt; 0,05), indicando una protezione neuromuscolare comparabile (Figura 2A).
Per valutare i biomarcatori sistemici dell'integrità neuronale, sono stati misurati i livelli sierici della catena pesante di neurofilamenti fosforilati (pNFH) utilizzando un saggio elettrochemiluminescenze altamente sensibile. I campioni di sangue prelevati nel periodo di 5 settimane post-iniezione hanno mostrato una riduzione del &gt;40% della concentrazione di pNFH nei topi trattati con ASO rispetto ai controlli trattati con veicolo (p &lt; 0,0001), senza differenze significative osservate tra le modalità IT e ICV (Figura 2B). La risposta uniforme dei biomarcatori molecolari corrobora i dati elettrofisiologici, suggerendo che la somministrazione di IT mitiga efficacemente i processi neurodegenerativi in questo modello ALS.
Per valutare l'ingaggio del bersaglio di SOD1-ASO a livello molecolare, abbiamo eseguito la trascrizione inversa di PCR quantitativa (RT-qPCR) su tessuti spinali cervicali e toracici dissezionati. L'RNA totale è stato estratto utilizzando un protocollo basato su colonne, garantendo un'alta purezza (A260/A280&gt;1,8), seguito dalla sintesi del cDNA con priming casuale degli esameri. L'amplificazione quantitativa per PCR che prende di mira i trascrizioni SOD1 umani, normalizzata in GAPDH, ha rivelato un calo medio del 60% dopo la consegna IT e del 35% dopo la consegna ICV, entrambi significativi rispetto ai controlli ASO inattivi (p &lt; 0,0001 per entrambi). Il confronto diretto tra le vie di consegna ha mostrato un knockdown significativamente maggiore con la consegna IT (p &lt; 0,0001), indicando un ingaggio più efficace del bersaglio nel midollo spinale tramite accesso spinale diretto (Figura 3). Sono necessari ulteriori studi per valutare l'impegno dei target in altre regioni del CNS.
Collettivamente, questi dati completi offrono una validazione convincente delle iniezioni IT come tecnica precisa, riproducibile e minimamente invasiva per la somministrazione di ASO al sistema nervoso centrale (SNC) in modelli murini. L'amministrazione IT ha dimostrato un'efficacia terapeutica pari alla somministrazione ICV su un ampio spettro di misure di esito, inclusa la conservazione sostenuta della funzione neurologica (CMAP), la normalizzazione dei biomarcatori rilevanti per la malattia (pNFH) e il robusto knockdown molecolare dei trascrizioni SOD1 umane all'interno delle regioni target del SNC. Questi risultati sottolineano la versatilità dell'erogazione IT come percorso clinicamente traducibile per le terapie ASO mirate al SNC, offrendo un'efficacia equivalente all'ICV mantenendo al contempo la semplicità procedurale e la riduzione dell'invasività. Pertanto, l'erogazione di IT e ICV sono approcci ugualmente validi per interventi mirati al SNC, offrendo flessibilità in contesti preclinici a seconda dell'accessibilità anatomica, della fattibilità procedurale e del contesto terapeutico. Questo posiziona l'erogazione IT come una promettente piattaforma di traduzione per future terapie mirate al sistema nervoso centrale. Per supportare gli sforzi traslazionali, suggeriamo di condurre ulteriori studi preclinici per valutare la distribuzione farmacocinetica all'interno del liquido cerebrospinale, in varie regioni del SNC e nell'assorbimento delle cellule bersaglio, utilizzando tecniche come l'ibridazione fluorescente in situ o l'immunofluorescenza.
<img alt="Figura 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69788/69788fig1.jpg" data-altupdatedat="1778562059000" data-alt="Figure 1"> 
Figura 1: Visualizzazione della distribuzione del colorante blu di Evans dopo iniezione intratecale in topi adulti. Il colorante blu di Evans (0,5%) è stato somministrato tramite iniezione intratecale diretta (IT) in topi adulti per valutare qualitativamente la distribuzione del midollo spinale. Tre diversi volumi di colorante 20 μL, 30 μL e 50 μL sono stati somministrati in gruppi sperimentali separati (n = 1 mouse per condizione di volume). Dopo l'iniezione, i midolli spinali sono stati prelevati e lavati per valutare la penetrazione del colorante in base all'intensità della colorazione lungo il tessuto. Le immagini del tessuto del midollo spinale mostrano l'estensione della dispersione del colorante associata a ogni volume di iniezione, dimostrando un aumento della copertura e dell'intensità della colorazione dipendente dalla dose in tutto il midollo spinale. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69788/69788fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figura 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69788/69788fig2v2.jpg" data-altupdatedat="1778562059000" data-alt="Figure 2"> 
Figura 2: La terapia con oligonucleotidi antisens che mira SOD1 ripristina la funzione motoria e riduce i livelli patologici di neurofilamenti nei topi. I topi transgenici SOD1-G93A adulti hanno ricevuto una singola dose di oligonucleotide antisens attivo (SOD1-ASO) tramite iniezione intratecale (IT) o intracerebroventricolare (ICV) a 5 settimane di età, oppure un ASO di controllo inattivo tramite iniezione IT. L'impatto terapeutico è stato valutato a 10 settimane di età, corrispondenti a 5 settimane dopo il trattamento. (A) Sono state ottenute registrazioni del potenziale d'azione muscolare composto (CMAP) per valutare la funzione neuromuscolare negli animali trattati. I gruppi trattati con SOD1-ASO (n = 5 - 6 per gruppo) hanno mostrato un'inversione del calo del CMAP rispetto al gruppo di controllo, indicando un recupero funzionale. (B) I livelli periferici della catena pesante del neurofilamento fosforilato (pNFH), biomarcatore della neurodegenerazione, sono stati quantificati dal siero raccolto alla settimana 10 (n = 5 - 8 per gruppo). Il trattamento con SOD1-ASO ha portato a una significativa riduzione dei livelli di pNFH circolante rispetto al controllo, suggerendo un'attenuazione del danno neuronale associato alla malattia. Tutti i dati sono presentati come media ± SD. La significatività statistica è stata determinata tramite analisi unidirezionale della varianza (ANOVA) seguita dal test di confronto multiplo di Tukey, con valori p ≤ 0,0001 che indicano differenze robuste tra i gruppi di trattamento. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69788/69788fig2v2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figura 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69788/69788fig3.jpg" data-altupdatedat="1778562059000" data-alt="Figure 3"> 
Figura 3: L'amministrazione di SOD1-ASO sopprime significativamente l'espressione dell'mRNA umano di SOD1 nel midollo spinale transgenico SOD1-G93A. Per valutare l'efficienza del targeting dell'oligonucleotide antisense (SOD1-ASO) con miramento SOD1 somministrato tramite iniezione intratecale (IT) o intracerebroventricolare (ICV), è stata analizzata la sezione cervicale/toracica del tessuto del midollo spinale da topi transgenici SOD1-G93A soppressi a 10 settimane di età (5 settimane dopo la somministrazione) per l'espressione umana di mRNA SOD1 utilizzando la reazione a catena della polimerasi quantitativa trascrizione inversa (RT-qPCR). I livelli di trascritti SOD1 umani sono stati quantificati e normalizzati rispetto all'espressione nel gruppo inattivo trattato con ASO. La figura mostra il cambiamento di piega nell'mRNA umano SOD1 (normalizzato in GAPDH) per ciascun gruppo di trattamento (n = 5-7 topi per gruppo), evidenziando una notevole regolazione al ribasso in risposta all'amministrazione di SOD1-ASO. I dati sono presentati come media ± SD. Le differenze statistiche tra i gruppi sono state determinate tramite analisi unidirezionale della varianza (ANOVA), seguite dal test di confronto multiplo di Tukey, con valori p ≤ 0,0001 che indicano differenze robuste tra i gruppi di trattamento. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69788/69788fig3large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Componente</td>
			<td>FW</td>
			<td>Quantità di addizione (per L o kg)</td>
			<td>Unità</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diidrato monobasico di fosfato di sodio</td>
			<td></td>
			<td>0.034</td>
			<td>g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dibase fosfato di sodio anidro</td>
			<td>142</td>
			<td>0.111</td>
			<td>g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cloruro di sodio</td>
			<td>58.44</td>
			<td>8.766</td>
			<td>g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cloruro di potassio</td>
			<td>74.56</td>
			<td>0.224</td>
			<td>g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diidrato di cloruro di calcio</td>
			<td>147.02</td>
			<td>0.206</td>
			<td>g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cloruro di magnesio esaidrato</td>
			<td></td>
			<td>0.163</td>
			<td>g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acqua (Milli-Q)</td>
			<td></td>
			<td>993</td>
			<td>g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poloxamer 188</td>
			<td></td>
			<td>0.01</td>
			<td>g</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabella 1: composizione aCSF.
Figura supplementare 1: Posizionamento del topo per l'iniezione intratecale lombare. Una spatola curva o scoopula posizionata sotto l'addome flette la colonna vertebrale, allargando lo spazio intervertebrale. L'iniezione mira al livello L4-L5 o L5-L6, con un corretto allineamento lungo l'asse mediale della colonna vertebrale come mostrato. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69788/Supplementary%20Figure%201.pdf" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
File supplementare 1: sequenza ASO e chimica. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69788/Supplementary%20File%201.pdf" target="_blank">Clicca qui per scaricare questo file.</a>

Iniezione intratecale lombare di SOD1-ASO per il targeting preciso del sistema nervoso centrale e l'efficacia predittiva nei topi umani SOD1-G93A ALS

Intrathecal (IT) administration of central nervous system (CNS)-targeted therapeutics offers a minimally invasive route for direct drug delivery into the ...

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