Name: Test di neutralizzazione della riduzione della fluorescenza del virus dellepatite E per misurare i titoli neutralizzanti degli anticorpi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-22T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 58 s
Description: Impara il test di neutralizzazione a riduzione di fluorescenza per misurare i titoli neutralizzanti degli anticorpi anti-HEV. Questo metodo supporta lo sviluppo di vaccini e terapie antivirali contro l'epatite E.

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<li>Gremmel, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatitis+E+virus+neutralization+by+porcine+serum+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Hepatitis E virus neutralization by porcine serum antibodies.</a> J Clin Microbiol. 61 (11), e00373-23(2023).</li>
<li>Cai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+neutralizing+assay+for+antibodies+and+sera+against+hepatitis+E+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A high-throughput neutralizing assay for antibodies and sera against hepatitis E virus.</a> Sci Rep. 6 (1), 25141(2016).</li>
<li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+high-throughput+neutralization+assay+for+hepatitis+E+virus+%28HEV%29+involving+detection+of+secreted+Porf2%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">An optimized high-throughput neutralization assay for hepatitis E virus (HEV) involving detection of secreted Porf2.</a> Viruses. 11 (1), 64(2019).</li>
<li>Meng, J., Dubreuil, P., Pillot, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+PCR-based+seroneutralization+assay+in+cell+culture+for+diagnosis+of+hepatitis+E%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">A new PCR-based seroneutralization assay in cell culture for diagnosis of hepatitis E.</a> J Clin Microbiol. 35 (6), 1373-1377 (1997).</li>
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<li>Gupta, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression%2C+purification+and+characterization+of+the+hepatitis+E+virus+like-particles+in+the+Pichia+pastoris%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Expression, purification and characterization of the hepatitis E virus like-particles in the Pichia pastoris.</a> Front Microbiol. 11, 141(2020).</li>
<li>Guo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+Reduction+Neutralization+Test%3A+A+novel%2C+rapid%2C+and+efficient+method+for+characterizing+the+neutralizing+activity+of+antibodies+against+dengue+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Issues+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Fluorescence Reduction Neutralization Test: A novel, rapid, and efficient method for characterizing the neutralizing activity of antibodies against dengue virus.</a> Curr Issues Mol Biol. 47 (3), 140(2025).</li>
<li>Bewley, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+SARS-CoV-2+neutralizing+antibody+by+wild-type+plaque+reduction+neutralization%2C+microneutralization+and+pseudotyped+virus+neutralization+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Quantification of SARS-CoV-2 neutralizing antibody by wild-type plaque reduction neutralization, microneutralization and pseudotyped virus neutralization assays.</a> Nat Protoc. 16 (6), 3114-3140 (2021).</li>
<li>Islam, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutralizing+antibodies+against+the+Japanese+encephalitis+virus+are+produced+by+a+12%C3%A1kDa+E+coli+expressed+envelope+protein+domain+III+%28EDIII%29+tagged+with+a+solubility-controlling+peptide%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Neutralizing antibodies against the Japanese encephalitis virus are produced by a 12ákDa E coli expressed envelope protein domain III (EDIII) tagged with a solubility-controlling peptide.</a> Vaccine. 56, 127143(2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.5 mL microfuge tubes</td><td>Axygen</td><td>MCT-150-C</td><td></td></tr><tr><td>12-well cell culture dish</td><td>Corning</td><td>3512</td><td></td></tr><tr><td>37 degree incubator shaker</td><td>Thermo Scientific</td><td>50163013</td><td></td></tr><tr><td>4&prime;,6-diamidino-2-phenylindole</td><td>Abcam</td><td>AB104139</td><td>DAPI</td></tr><tr><td>50mL centrifuge tube</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>6-well cell culture dish</td><td>Corning</td><td>3516</td><td></td></tr><tr><td>Alexa flour 594 secondary IgG Antibody</td><td>Thermo Scientific</td><td>A-11012</td><td></td></tr><tr><td>Anti-ORF2 antibody</td><td>Genscript</td><td>NA</td><td>Custom synthesized by Genscript and characterized in our laboratory14</td></tr><tr><td>Anti-rabbit IgG antibody</td><td>Genscript</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumin</td><td>HIMEDIA</td><td>MB083</td><td>BSA</td></tr><tr><td>Confocal microscope</td><td>Olympus</td><td>FV3000</td><td></td></tr><tr><td>DMEM, high glucose</td><td>HIMEDIA</td><td>AL007A</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum</td><td>GIBCO</td><td>16000-044</td><td>FBS</td></tr><tr><td>ImageJ 1.54g</td><td>ImageJ.org (Wayne Rasband and contributors, NIH, USA)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Normal Goat Serum</td><td>HIMEDIA</td><td>RM-10701</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyde</td><td>HIMEDIA</td><td>GRN3660</td><td>PFA</td></tr><tr><td>Phosphate Buffer Saline pH 7.4</td><td>HIMEDIA</td><td>TL1006</td><td>PBS</td></tr><tr><td>Polyethyleneglycol 6000</td><td>SIGMA</td><td>81255</td><td>PEG6000</td></tr><tr><td>SOLIScript 1-step Probe Kit</td><td>SOLIS BIODYNE</td><td>08-57-00250</td><td></td></tr><tr><td>TRI reagent</td><td>Molecular Research Centre</td><td>TR118</td><td></td></tr><tr><td>Triton X100</td><td>SIGMA</td><td>X100</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA</td><td>GIBCO</td><td>25300-54</td><td></td></tr></tbody></table>

test di neutralizzazione della riduzione della fluorescenza del virus dell'epatite e per misurare i titoli neutralizzanti degli anticorpi

Hepatitis E Virus Fluorescence Reduction Neutralization Test for Measuring Neutralizing Antibody Titers

Test di neutralizzazione della riduzione della fluorescenza del virus dell'epatite E per misurare i titoli neutralizzanti degli anticorpi

Virus neutralization assay measures the neutralization potential of an antibody or a mixture of antibodies against the corresponding virus. It is a ...

hepatitis-e-virus-fluorescence-reduction-neutralization-test-for

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Immunology and Infection

Immunologia e Infezioni

Questo video mostra saggi di microneutralizzazione per misurare gli anticorpi neutralizzanti utilizzando cellule renali canine Madin-Darby che sovraesprimono l'acido sialico legato all'α2,6 in sieri umani. Questo test è spesso utilizzato per la sierologia umana...

Un test di microneutralizzazione per misurare i titoli anticorpali neutralizzanti nel siero umano

Questo video mostra un test che misura i titoli anticorpali inibitori della neuraminidasi dell'influenza (NA) in un campione di siero. Un campione di siero contenente anticorpi contro NA viene aggiunto a una piastra a micropozzetti rivestita di fetuina. Dopo l'aggiunta del virus, gli anticorpi impediscono al NA virale di scindere la fetuina ed esporre la sua porzione di galattosio. Viene quindi aggiunta una lectina coniugata con perossidasi, che si lega al galattosio esposto. Il titolo...

Un test per misurare i titoli anticorpali di inibizione della neuraminidasi dell'influenza

Questo video mostra un test di immunofluorescenza progettato per misurare la neutralizzazione del citomegalovirus umano (HCMV). Gli anticorpi specifici del virus vengono mescolati con il virus e incubati con cellule di fibroblasti umani. Gli anticorpi neutralizzano il virus, rendendolo incapace di infettare le cellule ospiti, mentre i virus non neutralizzati infettano le cellule. Dopo l'incubazione, l'entità della neutralizzazione viene determinata quantificando le cellule infettate dal virus...

Un metodo di immunofluorescenza per misurare la neutralizzazione del citomegalovirus umano

Questo video mostra un test di neutralizzazione che misura l'efficacia del siero nella neutralizzazione dei virus SARS-CoV-2. Coinvolge virus pseudotipizzati, diluizione del siero e quantificazione basata sulla luminescenza, rivelando il titolo di neutralizzazione.

Valutazione degli anticorpi neutralizzanti funzionali SARS-CoV-2

Descriviamo il test della lectina enzimatica (ELLA) per misurare i titoli anticorpali di inibizione della neuraminidasi dell'influenza (NA) nei sieri. Il test utilizza l'agglutinina di arachidi per quantificare i residui di galattosio che diventano accessibili quando NA rimuove l'acido sialico da piastre a 96 pozzetti rivestite di fetuina.

Misurare Influenza neuraminidasi Inibizione anticorpo I titoli da Enzyme-linked lectina Assay

Questo studio descrive un   di imaging basata su test di micro-neutralizzazione per analizzare le relazioni antigeniche tra virus. Il protocollo impiega uno scanner piano ed ha quattro fasi, tra cui la titolazione, la titolazione quantificazione, neutralizzazione, e la neutralizzazione quantificazione. Il test funziona bene con corrente circolante pdm09 influenza A (H1N1), A (H3N2), e virus B.

Ottimizzazione di un Quantitative Micro-neutralizzazione Assay

Descriviamo un metodo con cui identifichiamo residui critici necessari per l'associazione di anticorpi monoclonali umani o murini destinati l'emoagglutinina virale del virus di riossidazione A. Il protocollo può essere adattato ad altre glicoproteine di superficie del virus e loro corrispondenti anticorpi neutralizzanti.

Generazione di varianti di fuga di neutralizzare l'Influenza Virus anticorpi monoclonali

Anticorpi neutralizzanti l'influenza correlano con protezione delle infezioni influenzali. Saggi microneutralization misurano anticorpi neutralizzanti nel siero umano e sono spesso utilizzati per sierologia umana dell'influenza. Descriviamo un dosaggio di microneutralization usando le cellule MDCK-SIAT1 per misurare i titoli dell'anticorpo neutralizzante ai virus contemporaneo di A(H3N2) di 3C.2a e 3C.3a dopo la vaccinazione contro l'influenza o infezione.

Neutralizzando le risposte dell'anticorpo al virus A(H3N2) in sieri umani di Microneutralization l'Influenza di misurazione analisi utilizzando cellule MDCK-SIAT1

Qui presentiamo un metodo di cytometry di flusso basato su cellulare per rilevare anticorpi neutralizzanti o altri fattori che interferiscono con l'assorbimento cellulare di terapie sostitutive enzima in una matrice umana, come un liquido spinale cerebrale (CSF) o siero umano.

Rilevazione degli anticorpi che neutralizzano l'assorbimento cellulare di terapie di sostituzione enzimatica con un'analisi Cell-based

Descritto qui è un metodo efficace su come produrre elevati stock di titro virale del virus dell'epatite E (HEV) per infettare in modo efficiente le cellule dell'epatoma. Con il metodo presentato, sia le particelle virali non avvolte, sia le particelle virali avvolte possono essere raccolte e utilizzate per inoculare varie linee cellulari.

Un modello di coltura cellulare per la produzione di titoli di epatite ad alto tire e virus

Qui descriviamo un protocollo per il confezionamento di pseudovirus e la misurazione dell'attività neutralizzante degli anticorpi.

Preparazione di virus dell'influenza aviaria H5 pseudo-tipizzati con metodo di trasfezione del fosfato di calcio e misurazione dell'attività neutralizzante degli anticorpi

Impara il test di neutralizzazione a riduzione di fluorescenza per misurare i titoli neutralizzanti degli anticorpi anti-HEV. Questo metodo supporta lo sviluppo di vaccini e terapie antivirali contro l'epatite E.

Test di neutralizzazione della riduzione della fluorescenza del virus dellepatite E per misurare i titoli neutralizzanti degli anticorpi (Video) | JoVE Journal

Test di neutralizzazione della riduzione della fluorescenza del virus dell'epatite E per misurare i titoli neutralizzanti degli anticorpi

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