Name: Valutazione funzionale della barriera epiteliale gingivale del topo utilizzando traccianti fluorescenti (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-27T13:35:00.000+00:00
Duration: 7 min
Description: Scopri un metodo per valutare l'integrità della barriera epiteliale gengivale nel topo utilizzando traccianti fluorescenti di diversi pesi molecolari. Questa tecnica consente di studiare disfunzioni della barriera e modelli di malattie orali.

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<ol><li>Zhang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+on+the+protection+of+gingival+epithelial+barrier+by+interleukin-22+through+regulating+microbiota+and+E-cadherin+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Zhonghua+Kou+Qiang+Yi+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">Study on the protection of gingival epithelial barrier by interleukin-22 through regulating microbiota and E-cadherin expression.</a> Zhonghua Kou Qiang Yi Xue Za Zhi. 59 (7), 653-662 (2024).</li>
<li>Presland, R. B., Jurevic, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+sense+of+the+epithelial+barrier%3A+what+molecular+biology+and+genetics+tell+us+about+the+functions+of+oral+mucosal+and+epidermal+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dent+Educ%22%5BJournal%5D)">Making sense of the epithelial barrier: what molecular biology and genetics tell us about the functions of oral mucosal and epidermal tissues.</a> J Dent Educ. 66 (4), 564-574 (2002).</li>
<li>Costello, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+community+variation+in+human+body+habitats+across+space+and+time%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Bacterial community variation in human body habitats across space and time.</a> Science. 326 (5960), 1694-1697 (2009).</li>
<li>Aas, J. A., Paster, B. J., Stokes, L. N., Olsen, I., Dewhirst, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+the+normal+bacterial+flora+of+the+oral+cavity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Defining the normal bacterial flora of the oral cavity.</a> J Clin Microbiol. 43 (11), 5721-5732 (2005).</li>
<li>Meyle, J., Chapple, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+aspects+of+the+pathogenesis+of+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22Periodontol+2000%22%5BJournal%5D)">Molecular aspects of the pathogenesis of periodontitis.</a> Periodontol 2000. 69 (1), 7-17 (2015).</li>
<li>Oriuchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porphyromonas+gingivalis+lipopolysaccharide+damages+mucosal+barrier+to+promote+gastritis-associated+carcinogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Dig+Dis+Sci%22%5BJournal%5D)">Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide damages mucosal barrier to promote gastritis-associated carcinogenesis.</a> Dig Dis Sci. 69 (1), 95-111 (2024).</li>
<li>Takeuchi, H., Nakamura, E., Yamaga, S., Amano, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porphyromonas+gingivalis+infection+induces+lipopolysaccharide+and+peptidoglycan+penetration+through+gingival+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oral+Health%22%5BJournal%5D)">Porphyromonas gingivalis infection induces lipopolysaccharide and peptidoglycan penetration through gingival epithelium.</a> Front Oral Health. 3, 845002(2022).</li>
<li>Abe, T., Hajishengallis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+the+ligature-induced+periodontitis+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Optimization of the ligature-induced periodontitis model in mice.</a> J Immunol Methods. 394 (1-2), 49-54 (2013).</li>
<li>Chatterjee, A., Bhattacharya, H., Kandwal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probiotics+in+periodontal+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Indian+Soc+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Probiotics in periodontal health and disease.</a> J Indian Soc Periodontol. 15 (1), 23-28 (2011).</li>
<li>Shin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photon-efficient+imaging+with+a+single-photon+camera%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Photon-efficient imaging with a single-photon camera.</a> Nat Commun. 7, 12046(2016).</li>
<li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+endothelial+tight+junctions+to+predict+and+protect+thoracic+aortic+aneurysm+and+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Targeting endothelial tight junctions to predict and protect thoracic aortic aneurysm and dissection.</a> Eur Heart J. 44 (14), 1248-1261 (2023).</li>
<li>Cai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Foxf1+maintains+endothelial+barrier+function+and+prevents+edema+after+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Signal%22%5BJournal%5D)">Foxf1 maintains endothelial barrier function and prevents edema after lung injury.</a> Sci Signal. 9 (424), ra40(2016).</li>
<li>Hou, A., Mohamed Ali, S., Png, E., Hunziker, W., Tong, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transglutaminase-2+is+critical+for+corneal+epithelial+barrier+function+via+positive+regulation+of+claudin-1%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">Transglutaminase-2 is critical for corneal epithelial barrier function via positive regulation of claudin-1.</a> Ocul Surf. 28, 155-164 (2023).</li>
<li>Kitsuki, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+junctional+epithelial+permeability+in+trpv4-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Periodontal+Res%22%5BJournal%5D)">Enhanced junctional epithelial permeability in trpv4-deficient mice.</a> J Periodontal Res. 55 (1), 51-60 (2020).</li>
<li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porphyromonas+gingivalis+impairs+oral+epithelial+barrier+through+targeting+grhl2%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dent+Res%22%5BJournal%5D)">Porphyromonas gingivalis impairs oral epithelial barrier through targeting grhl2.</a> J Dent Res. 98 (10), 1150-1158 (2019).</li>
<li>Lemaitre, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Periodontal+tissue+regeneration+using+syngeneic+adipose-derived+stromal+cells+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Periodontal tissue regeneration using syngeneic adipose-derived stromal cells in a mouse model.</a> Stem Cells Transl Med. 6 (2), 656-665 (2017).</li>
<li>Takahashi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gingival+epithelial+barrier%3A+regulation+by+beneficial+and+harmful+microbes%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Barriers%22%5BJournal%5D)">Gingival epithelial barrier: regulation by beneficial and harmful microbes.</a> Tissue Barriers. 7 (3), e1651158(2019).</li>
<li>Ye, P., Chapple, C. C., Kumar, R. K., Hunter, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+patterns+of+E-cadherin%2C+involucrin%2C+and+connexin+gap+junction+proteins+in+the+lining+epithelia+of+inflamed+gingiva%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Expression patterns of E-cadherin, involucrin, and connexin gap junction proteins in the lining epithelia of inflamed gingiva.</a> J Pathol. 192 (1), 58-66 (2000).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>40 kDa FITC-labeled dextran</td><td>Sigma Aldrich</td><td>78331</td><td></td></tr><tr><td>70 kDa rhodamine B-labeled dextran</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R9379</td><td></td></tr><tr><td>Blunt tissue separation nickel</td><td>Bejinghuabo Company</td><td>NZW28</td><td></td></tr><tr><td>carboximethylcellulosa</td><td>MREDA</td><td>M049898</td><td></td></tr><tr><td>Siringa sterile monouso</td><td>Zhiyu Company</td><td></td><td>1 mL</td></tr><tr><td>Software ImageJ</td><td>National Institutes of Health</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microtubi</td><td>Axygen</td><td>MCT-150-C</td><td>1,5 mL</td></tr><tr><td>Software NIS-Elements AR Image</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina fosfatata tamponata 1x</td><td>Servicebio</td><td>G4207-500</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio a fotone singolo Nikon A1 MP+</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forbici per tessuti</td><td>Bejinghuabo Company</td><td>M286-05</td><td></td></tr></tbody></table>

valutazione funzionale della barriera epiteliale gingivale del topo utilizzando traccianti fluorescenti

Functional Assessment of Mouse Gingival Epithelial Barrier Using Fluorescent Tracers

Valutazione funzionale della barriera epiteliale gingivale del topo utilizzando traccianti fluorescenti

The gingival epithelial barrier serves as a critical frontline defense in oral immunity and homeostasis. An intact epithelial barrier effectively prevents ...

functional-assessment-mouse-gingival-epithelial-barrier-using

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Il glicocalice endoteliale / endoteliale strato superficiale è perfettamente studiata usando la microscopia intravitale. Microscopia intravitale è tecnicamente difficile in un organo in movimento come il polmone. Si dimostra come brightfield simultanea e microscopia a fluorescenza possono essere utilizzate per stimare endoteliale spessore dello strato di superficie in un movimento...

Nella misura in vivo della superficie polmonare strato endoteliale mouse

Qui presentiamo un'analisi di permeabilità vascolare del cervello del mouse usando iniezione intraperitoneale di traccianti fluorescenti seguita da aspersione che è applicabile ai modelli animali di disfunzione della barriera emato - encefalica. Un hemi-cervello è usato per valutare quantitativamente permeabilità e l'altro per la visualizzazione dell'elemento tracciante/immunostaining. La procedura richiede 5-6 h per 10 topi.

In Vivo barriera emato - encefalica permeabilità saggio nei topi utilizzando fluorescente etichettati traccianti

Sfruttando la microscopia intravitale, il metodo qui presentato consente la visualizzazione in tempo reale dello spargimento di cellule epiteliali intestinali negli animali viventi. Pertanto, la mucosa intestinale macchiata localmente (acriflavina e rodiamminaB-dextran) dei topi anestetizzati viene imageizzata fino alla risoluzione a singola cellula utilizzando la microscopia confocale.

Un approccio intravitale basato sulla microscopia per valutare la permeabilità intestinale e le prestazioni di spargimento di cellule epiteliali

Qui, descriviamo la preparazione di monostrati epiteliali intestinali derivati da organoidi umani per studiare la funzione, la permeabilità e il trasporto della barriera intestinale. Poiché gli organoidi rappresentano la risposta originale del tessuto epiteliale agli stimoli esterni, questi modelli combinano i vantaggi dell'espandibilità delle linee cellulari e la rilevanza e la complessità del tessuto primario.

Monostrato epiteliale derivato da organoidi: un modello in vitro clinicamente rilevante per la funzione di barriera intestinale

La funzione di barriera epiteliale intestinale disregolata e le risposte immunitarie sono segni distintivi della malattia infiammatoria intestinale che rimangono scarsamente studiate a causa della mancanza di modelli fisiologici. Qui descriviamo un modello di loop intestinale del topo che impiega un segmento intestinale ben vascolarizzato ed esteriore per studiare la permeabilità della mucosa e il reclutamento di leucociti in vivo.

Valutazione funzionale della permeabilità intestinale e della migrazione transepiteliale neutrofila nei topi utilizzando un modello standardizzato di loop intestinale

Nel presente protocollo, la funzione di barriera endoteliale della ghiandola sottomandibolare (SMG) è stata valutata iniettando diversi traccianti fluorescenti pesati molecolari nelle vene angolari di modelli animali in vivo sotto un microscopio a scansione laser a due fotoni.

In vivo Rilevamento della permeabilità vascolare nella ghiandola sottomandibolare del topo

Nel presente studio, il destrano marcato con fluoresceina-isotiocianato (FITC) viene somministrato ai topi tramite sonda gastrica orale per valutare la permeabilità intestinale sia in vivo che in campioni plasmatici e fecali. Poiché la funzione di barriera intestinale è influenzata in molti processi patologici, questo test diretto e quantitativo può essere utilizzato in diverse aree di ricerca.

Valutazione dell'integrità della barriera intestinale nei topi utilizzando destrano marcato con fluoresceina-isotiocianato

L'imaging dal vivo ex vivo è una potente tecnica per studiare i processi dinamici dei movimenti e delle interazioni cellulari nei tessuti viventi. Qui, presentiamo un protocollo che implementa la microscopia a due fotoni per tracciare in tempo reale le cellule epiteliali dentali in incisivi di topo adulti interi in coltura.

Utilizzo dell'imaging dal vivo ex vivo per studiare le divisioni e i movimenti cellulari durante il rinnovamento dentale del topo

Descriviamo un metodo affidabile per immunolocalizzazione all'interno dell'epidermide modificato per entrambe le sezioni congelate e paraffina che usiamo molto di routine nel nostro laboratorio.

Immunoistochimica su sezioni di paraffina di epidermide mouse utilizzando anticorpi fluorescenti

Questo video mostra le tecniche per l'etichettatura delle cellule staminali embrionali umane e cellule staminali mesenchimali con coloranti fluorescenti. Questa tecnica può essere utilizzata per un monitoraggio in vivo di cellule staminali trapiantate con imaging ottico e per le correlazioni istopatologiche con microscopia a fluorescenza.

Etichettatura Cellule staminali con le tinture fluorescenti per la rilevazione non invasiva con Optical Imaging

Scopri un metodo per valutare l'integrità della barriera epiteliale gengivale nel topo utilizzando traccianti fluorescenti di diversi pesi molecolari. Questa tecnica consente di studiare disfunzioni della barriera e modelli di malattie orali.

Valutazione funzionale della barriera epiteliale gingivale del topo utilizzando traccianti fluorescenti

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