Name: Test di tolleranza nicotina in Afidi Utilizzando un esperimento artificiale dieta (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-05-14T16:17:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: Scopri il test di tolleranza alla nicotina negli afidi utilizzando una dieta artificiale sperimentale. Questo metodo permette di confrontare linee adattate e non adattate al tabacco per studiare i meccanismi di resistenza.

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In questo esperimento, 4 afidi adulti sono racchiusi in un bicchiere di plastica di piccole dimensioni. Si nutrono di dieta liquida pipettati tra 2 strati di parafilm estendeva sopra la parte superiore della coppa. Dopo 3 giorni di alimentazione, la tossicità di diete contenenti diverse concentrazioni di nicotina sia rispetto al controllo diete contando adulti e larve di afidi in ogni tazza. <ol><li> Fai soluzioni contenenti saccarosio e 20 aminoacidi. Afidi possono sussistere in questa dieta, che riproducono a livelli normali, per almeno 1 settimana. Vedere file allegato per l&#39;alimentazione artificiale. </li><li> Aliquota 1 mL di questa dieta in 6 differenti tubi eppendorf contenente nicotina. Etichetta con rispetto a diverse concentrazioni di nicotina utilizzati, che vanno da 0-500μM. </li><li> Selezionare 4 afidi, rosso o verde, e messo in queste tazze sperimentale. </li><li> Quando si seleziona afidi, è importante che siano di età coerente. Tipicamente, cercare afidi di analoghe dimensioni e colore (gli afidi rossi diventano più scuri quando sono più grandi). </li><li> Coprite la coppa con un pezzo di parafilm. Racchiudere la dieta tra i 2 pezzi di parafilm. Parzialmente tratto il secondo livello parafilm intorno ai bordi della tazza. Aliquota della dieta liquida tra gli strati, e sigillare lo strato superiore verso il basso. </li><li> Conservare queste coppe nella stanza degli insetti sotto le luci in una lunga giornata fotoperiodo per 3 giorni, dopo di che i dati per l&#39;esperimento può essere raccolto. </li></ol> Si prega di visitare <a href="http://arjournals.annualreviews.org/doi/abs/10.1146/annurev.arplant.59.032607.092825" target="_blank">Annual Reviews di Biologia Vegetale</a> per ulteriori informazioni su questo protocollo e immunità pianta insetti erbivori.

Gli autori non hanno nulla da dichiarare.

test di tolleranza nicotina in afidi utilizzando un esperimento artificiale dieta

Testing Nicotine Tolerance in Aphids Using an Artificial Diet Experiment

Le piante possono potenziamento della produzione di molti metaboliti seconday differenti in risposta alla alimentazione degli insetti. Uno di questi metaboliti, la nicotina, è ben noto per avere proprietà insetticida. Una risposta di piante di tabacco per erbivori, o di essere rosicchiato su da insetti, è quello di aumentare la produzione di questo alcaloide neurotossici. Qui, dimostreremo come impostare un esperimento per rispondere a questa domanda se un tabacco adattato ceppo del afide verde del pesco, Myzus persicae, in grado di tollerare livelli più elevati di nicotina rispetto al un ceppo di questo insetto che non infestano il tabacco in il campo.

In questo video e saggio è dimostrato che il test di tolleranza di nicotina a due tipi di afidi uno che infesta le piante di tabacco in campo e uno che non lo fa.

Test di tolleranza nicotina in Afidi Utilizzando un esperimento artificiale dieta

Le piante possono aumentare la produzione di molti diversi metaboliti secondari in risposta all'alimentazione degli insetti. Uno di questi metaboliti, la nicotina, è ben...

Le piante possono aumentare la produzione di molti diversi metaboliti secondari in risposta all'alimentazione degli insetti. Una risposta delle piante di tabacco all'erbivoria, quando non vengono attaccate da insetti, è l'aumento della produzione della nicotina, un alcaloide neurotossico, utilizzando la nicotina. Come esempio, illustrerò come impostare un esperimento per valutare la tossicità dei metaboliti secondari delle piante nei confronti degli afidi.Alcune linee di MiSiS persky, il afide del pesco verde, si sono adattate a specializzarsi sul tabacco coltivato. In questo studio ipotizziamo che queste linee adattate al tabacco presentino una maggiore resistenza alla nicotina rispetto alle linee non adattate. Ciao, mi chiamo John Ramsey.Sono uno studente laureato nel laboratorio di George Jander presso l'Istituto di Ricerca sulle Piante Bo Thompson. Oggi vi mostrerò un procedimento per misurare la tossicità dei metaboliti vegetali nei confronti degli afidi. Questo procedimento prevede la preparazione di una dieta artificiale alla quale viene aggiunto il metabolita vegetale di interesse.In questo caso, la nicotina viene aggiunta a concentrazioni variabili, intrappolando gli afidi

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Resistenza delle piante alla masticazione insetti erbivori possono essere testati in diversi modi. Qui, ci dimostrano come set-up una scelta e una non-scelta sperimentare con il modello vegetale Arabidopsis thaliana per identificare la resistenza contro il parassita specie Rapae di Pieris.

I dosaggi scelta e No-scelta per il test della resistenza di Arabidopsis thaliana per Insetti da masticare

Gli afidi sono efficaci trasmettitori di virus delle piante. Microiniezione afide del virus, la procedura che vi mostrerò oggi, è una tecnica che permette ai ricercatori di iniettare virus direttamente nel hemocoel di afidi, bypassando l'intestino, uno dei 2 principali ostacoli per la trasmissione del virus in modo circulative. La stessa tecnica viene utilizzata anche per iniettare dsRNA per RNAi.

Test della barriere fisiologiche di trasmissione virale in Afidi Utilizzando Microiniezione

Questo video descrive il saggio delle preferenze gustative, un metodo comportamentale utilizzato per misurare l'attrazione o l'evitamento verso soluzioni colorate che hanno un sapore diverso valutando la colorazione addominale della mosca dopo l'ingestione della sostanza preferita. Il protocollo presentato dimostra la procedura utilizzata per misurare la preferenza dei moscerini verso soluzioni con concentrazioni variabili di saccarosio.

Saggio delle preferenze gustative: un metodo per misurare il comportamento alimentare in Drosophila

Viene descritto un nuovo test comportamentale per studiare le risposte gustative a breve termine dell'apparato boccale dei bombi che si muovono liberamente (Bombus terrestris) nei confronti di nutrienti e tossine in soluzione.

A Novel comportamentale test per Indagare Risposte gustativa individuale, liberamente rigiro bombi (<em&gt; Bombus terrestris</em&gt;)

Il gusto è un importante processo sensoriale che facilita l'attrazione verso sostanze benefiche e l'evitamento di sostanze tossiche.  Questo protocollo descrive un semplice saggio di ingestione per determinare la preferenza gustativa della Drosophila per un dato composto chimico.

Gusto Preferenza Assay per adulti<em&gt; Drosophila</em

Descriviamo un protocollo per indurre gratificante e nonrewarding esperienze nei moscerini della frutta (Drosophila melanogaster) utilizzando il consumo di etanolo volontaria come misura per le modifiche negli stati di ricompensa.

Un modo semplice per misurare alterazioni in ricompensa il comportamento di ricerca Utilizzando<em&gt; Drosophila melanogaster</em

L'afide Aphis nerii colonizza sulle piante altamente difeso nella famiglia dogbane (Apocyanaceae) e offre numerose opportunità per studiare le interazioni pianta-insetto. Qui, presentiamo una serie di protocolli per la manutenzione di impianti e afide, culture e la generazione e l'analisi di molecolare e dati - omic per a. nerii.

Mantenimento di colture biologiche e misurazione dell'espressione genica in Aphis nerii: un sistema Non-modello per le interazioni pianta-insetto

Il presente protocollo fornisce informazioni didattiche per l'uso del hornworm del tabacco Manduca sexta nella ricerca sui cannabinoidi.  Il metodo qui descritto include tutte le forniture e i protocolli necessari per monitorare i cambiamenti fisiologici e comportamentali del modello di insetto in risposta al trattamento con cannabidiolo (CBD).

Hornworm del tabacco come sistema modello di insetto per studi pre-clinici sui cannabinoidi

Questo protocollo descrive il saggio di alimentazione obbligata per valutare l'effetto potenzialmente tossico di un fitochimico sulle larve di insetti lepidotteri. Si tratta di un test biologico per insetti altamente scalabile, facile da ottimizzare la dose subletale e letale, l'attività deterrente e l'effetto fisiologico. Questo potrebbe essere utilizzato per lo screening di insetticidi ecologici.

Sviluppo di un sistema di dosaggio per l'alimentazione per la valutazione dell'effetto insetticida di sostanze fitochimiche su Helicoverpa armigera

Questo protocollo presenta un sistema ottimizzato di biodosaggio a foglia staccata per valutare l'efficacia dei funghi entomopatogeni (EPF) contro l'afide della senape (Lipaphis erysimi (Kalt.)), un insetto partenogenetico. Il metodo delinea il processo di raccolta dei dati durante gli esperimenti con piastre di Petri, consentendo ai ricercatori di misurare costantemente la virulenza dell'EPF contro gli afidi della senape e altri insetti partenogenetici.

Valutazione dell'effetto afididida di funghi entomopatogeni contro insetti partenogenetici, afide della senape, Lipaphis erysimi (Kalt.)

Questo documento presenta un protocollo dettagliato per l'allevamento della farfalla bianca di cavolo in condizioni di laboratorio controllate con una dieta artificiale, che consente manipolazioni precise della nutrizione precoce e dell'esposizione alle tossine. I risultati rappresentativi mostrano come la tossicità dei metalli pesanti può essere misurata con questo protocollo.

Allevare la farfalla bianca del cavolo (Pieris rapae) in condizioni controllate: un caso di studio con tolleranza ai metalli pesanti

Scopri il test di tolleranza alla nicotina negli afidi utilizzando una dieta artificiale sperimentale. Questo metodo permette di confrontare linee adattate e non adattate al tabacco per studiare i meccanismi di resistenza.

Test di tolleranza nicotina in Afidi Utilizzando un esperimento artificiale dieta

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