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```html
<table><tbody><tr><td>4&prime;,6-Diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>62248</td><td>diluito 1:2000 per immunocolorazione</td></tr><tr><td>50 mL Centrifuge tube filter (0.22 &micro;m)</td><td>CellTreat</td><td>229710</td><td>Per preparazione di soluzioni sterili</td></tr><tr><td>500 mL Filter units</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>566-0020</td><td>Per preparazione di media sterili</td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Sigma</td><td>A6964</td><td></td></tr><tr><td>Amphoterecin B</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15290026</td><td></td></tr><tr><td>Bovine Pituitary Extract</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>13028014</td><td></td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumin</td><td>Sigma</td><td>A7906</td><td></td></tr><tr><td>Cholera toxin</td><td>Sigma</td><td>C8052</td><td></td></tr><tr><td>Collagen I</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A1048301</td><td></td></tr><tr><td>Confocal Microscope</td><td>Nikon</td><td></td><td>W1 Spinning disk Ti2 inverted microscope with Hamamatsu sCMOS camera</td></tr><tr><td>Corning Transwell inserts</td><td>Sigma</td><td>CLS3460</td><td></td></tr><tr><td>Diethylenetriamine NONOate (DETA-NONOate)</td><td>Cayman Chemical</td><td>82120</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12 media</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11330032</td><td></td></tr><tr><td>DNAse I</td><td>Sigma</td><td>DN25</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum</td><td>Sigma</td><td>F4135</td><td></td></tr><tr><td>Halt 1X Protease inhibitor cocktail</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>1860932</td><td></td></tr><tr><td>Ham's F1-12 Nutrient mix</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11765054</td><td></td></tr><tr><td>Insulin solution</td><td>Sigma</td><td>I0516</td><td></td></tr><tr><td>Isoproterenol hydrochloride</td><td>Sigma</td><td>I6504</td><td></td></tr><tr><td>Keratinocyte Serum-free media</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17005042</td><td></td></tr><tr><td>Murine Epidermal growth factor</td><td>Sigma</td><td>E4127</td><td></td></tr><tr><td>N(G)-Nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME)</td><td>Sigma</td><td>N5751</td><td></td></tr><tr><td>NuSerum</td><td>Corning</td><td>355100</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Sigma</td><td>P4333</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate buffer saline (PBS)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Pierce BCA Protein Assay Kit</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>23227</td><td></td></tr><tr><td>Pronase</td><td>Sigma</td><td>10165921001</td><td></td></tr><tr><td>Retinoic acid</td><td>Sigma</td><td>R2625</td><td></td></tr><tr><td>Rho kinase inhibitor (Y-27632 hydrochloride)</td><td>Cayman Chemical</td><td>TOM-C837Z37</td><td></td></tr><tr><td>RIPA buffer</td><td>Sigma</td><td>R0278</td><td></td></tr><tr><td>RPMI-1640 media</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>Sodium nitrite&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>S2252</td><td></td></tr><tr><td>Transferrin</td><td>Sigma</td><td>T8158</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Acetylated tubulin antibody (mouse)</td><td>Sigma</td><td>T6793</td><td>diluito 1:200 per immunocolorazione</td></tr><tr><td>&alpha;-FoxJ1 antibody (mouse)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14-9965-80</td><td>diluito 1:200 per immunocolorazione</td></tr><tr><td>&alpha;-mouseCy3 secondary antibody</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A10521</td><td>diluito 1:1000 per immunocolorazione</td></tr><tr><td>&gamma;-secretase inhibitor IX (DAPT)</td><td>Sigma</td><td>D5942</td><td></td></tr></tbody></table>
```

misurazione della produzione di ossido nitrico nelle colture cellulari epiteliali tracheali del topo differenziate all'interfaccia aria-liquido

Measurement of Nitric Oxide Production in Mouse Tracheal Epithelial Cell Cultures Differentiated at the Air Liquid Interface

Misurazione della produzione di ossido nitrico nelle colture cellulari epiteliali tracheali del topo differenziate all'interfaccia aria-liquido

Airway epithelial cultures differentiated at the air&#8211;liquid interface (ALI) provide a physiologically relevant model to study nitric oxide (NO) ...

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Le cellule epiteliali polmonari può essere isolato dal tratto respiratorio dei topi e colto in aria-liquido come un modello di differenziazione dell'epitelio respiratorio. Un protocollo è descritto per l'isolamento, la coltura e l'esposizione di queste cellule al fumo di sigaretta tradizionale, al fine di studiare le risposte molecolari di questa tossina ambientale.

Isolamento di mouse cellule epiteliali delle vie respiratorie ed esposizione al fumo di sigaretta Sperimentale interfaccia Air Liquid

Topi transgenici sono stati estremamente utili per attribuire funzione fisiologica ai geni. Come tale, la ricerca in generale, e studi funzionali delle vie aeree, in particolare, hanno subito un notevole spostamento verso modelli murini. Qui forniamo protocolli...

Nelle misure in vitro di costrizione tracheale con Mice

Il glicocalice endoteliale / endoteliale strato superficiale è perfettamente studiata usando la microscopia intravitale. Microscopia intravitale è tecnicamente difficile in un organo in movimento come il polmone. Si dimostra come brightfield simultanea e microscopia a fluorescenza possono essere utilizzate per stimare endoteliale spessore dello strato di superficie in un movimento...

Nella misura in vivo della superficie polmonare strato endoteliale mouse

Cellule epiteliali nasali, ottenuti attraverso superficiale raschiare la biopsia di volontari umani, vengono ampliati e trasferite su inserti di coltura tissutale. Dopo aver raggiunto la confluenza, le cellule sono coltivate a interfaccia liquido aria, ottenendo colture di cellule ciliate e non ciliate. Colture di cellule epiteliali nasali differenziate offrono modelli sperimentali validi per lo studio della mucosa respiratoria.

Coltura di cellule umane nasale epiteliali presso l&#39;Air Interface Liquid

In questo articolo, le cellule endoteliali polmonari primarie sono state isolate e coltivate da topi neonatali.

Isolamento delle cellule endoteliali polmonari primarie di topo

I recenti progressi nei protocolli di differenziazione delle cellule staminali pluripotenti indotte dall'uomo consentono la derivazione graduale di tipi di cellule specifiche per organo. Qui, forniamo passaggi dettagliati per il mantenimento e l'espansione delle cellule basali delle vie aeree derivate da iPSC e la loro differenziazione in un epitelio mucociliare in colture di interfaccia aria-liquido.

Generazione di colture di interfaccia aria-liquido di cellule epiteliali delle vie aeree da cellule staminali pluripotenti umane

Presentato qui è un metodo riproducibile, economico e robusto per l'isolamento e l'espansione delle cellule epiteliali bronchiali primarie per il biobanking a lungo termine e la generazione di cellule epiteliali differenziate mediante coltura all'interfaccia aria-liquido.

Isolare le cellule epiteliali bronchiali dal tessuto polmonare resecato per il biobanking e stabilire colture di interfaccia aria-liquido ben differenziate

Qui, descriviamo un modello in vitro per isolare e differenziare le cellule epiteliali delle vie aeree murine, concentrandosi sulla loro acclimatazione all'estratto di fumo di sigaretta cronico (CSE). Il modello potrebbe essere utilizzato per caratterizzare in modo completo l'impatto multi-omico della CSE, che potrebbe fornire informazioni sulle risposte cellulari in condizioni di esposizione cronica al fumo.

Modello in vitro per lo studio del differenziamento e dei cambiamenti di multi-omiche su cellule epiteliali delle vie aeree murine stimolate con estratto di fumo di sigaretta

La coltura dell'interfaccia aria-liquido è comunemente usata per sviluppare epitelio pseudostratificato delle vie aeree differenziando le cellule epiteliali bronchiali umane normali primarie che imitano il lato apicale delle vie aeree polmonari. Qui, descriviamo un semplice protocollo per determinarne la qualità monitorando le sue proprietà biofisiche, come la funzione ciliare e l'integrità della membrana.

Determinazione della funzione ciliare e dell'impermeabilità della membrana dell'epitelio pseudostratificato delle vie aeree polmonari

La produzione endogena di ossido nitrico (NO) regola una varietà di funzioni biologiche. Sta diventando sempre più chiaro che l'alterazione o disregolazione di NO segnalazione based è coinvolta in molte malattie umane. Metodi per quantificare relativo numero metaboliti possono fornire nuovi biomarcatori diagnostici o prognostici per le malattie umane.

Tecniche analitiche per il saggio Bioattività Ossido Nitrico

University of Maryland School of Medicine.  Questo protocollo descrive un metodo per quantificare la produzione di ossido nitrico (NO) nelle colture epiteliali delle vie aeree differenziate all'interfaccia aria-liquido (ALI) misurando il nitrito nelle secrezioni apicali tramite un saggio di chemiluminescenza a base di triioduro.

Misurazione della produzione di ossido nitrico nelle colture cellulari epiteliali tracheali del topo differenziate all'interfaccia aria-liquido

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