Name: Protocollo di Focus Stacking per la Fotografia di Insetti ad Alta Risoluzione (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-02T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 43 s
Description: Scopri un protocollo di focus stacking a basso costo per la fotografia ad alta risoluzione di insetti. Utilizza una fotocamera mirrorless full-frame con obiettivi microscopici e illuminazione stroboscopica sincronizzata per ottenere immagini dettagliate con profondità di campo estesa.

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	<li>Aldhawi, H. A., Abulsba, K. S. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+significance+of+insect+biodiversity+on+ecosystem+functioning+and+stability:+a+review.">The significance of insect biodiversity on ecosystem functioning and stability: a review.</a> Ebers J Med Publ. 5, 140-150 (2024).</li><li>S&#225;nchez-Bayo, F., Wyckhuys, K. A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Worldwide+decline+of+the+entomofauna:+a+review+of+its+drivers.">Worldwide decline of the entomofauna: a review of its drivers.</a> Biol Conserv. 232, 8-27 (2019).</li><li>Wagner, D. L. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+declines+in+the+Anthropocene.">Insect declines in the Anthropocene.</a> Annu Rev Entomol. 65 (1), 457-480 (2020).</li><li>Slade, E. M., Ong, X. R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+future+of+tropical+insect+diversity:+strategies+to+fill+data+and+knowledge+gaps.">The future of tropical insect diversity: strategies to fill data and knowledge gaps.</a> Curr Opin Insect Sci. 58, 101063 (2023).</li><li>Fujisawa, T., Noguerales, V., Vogler, A. P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-based+taxonomic+classification+of+bulk+insect+biodiversity+samples+using+deep+learning+and+domain+adaptation.">Image-based taxonomic classification of bulk insect biodiversity samples using deep learning and domain adaptation.</a> Syst Entomol. 48 (3), 387-401 (2023).</li><li>O'Kane, W. C. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+in+insect+photography.">Methods in insect photography.</a> J Econ Entomol. 5 (1), 54-61 (1912).</li><li>Borror, D. J., White, R. E. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A field guide to insects: America north of Mexico. 19, (1970).</li><li>Cheng, D., Wang, D., Yao, C., Liu, Y., Dai, X., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thin+and+large+depth-of-field+compound-eye+imaging+for+close-up+photography.">Thin and large depth-of-field compound-eye imaging for close-up photography.</a> Photonics. 11 (2), 107 (2024).</li><li>Brecko, J., Mathys, A., Dekoninck, W., Leponce, M., VandenSpiegel, D., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focus+stacking:+comparing+commercial+top-end+set-ups+with+a+semi-automatic+low+budget+approach.+A+possible+solution+for+mass+digitization+of+type+specimens.">Focus stacking: comparing commercial top-end set-ups with a semi-automatic low budget approach. A possible solution for mass digitization of type specimens.</a> ZooKeys. (464), 1-23 (2014).</li><li>Mertens, J. E. J., Van Roie, M., Merckx, J., Dekoninck, W. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+low+cost+compact+cameras+with+focus+stacking+functionality+in+entomological+digitization+projects.">The use of low cost compact cameras with focus stacking functionality in entomological digitization projects.</a> ZooKeys. 712, 141-154 (2017).</li></ol>

<table><tbody><tr><td>Tabella di supporto</td><td>Preferenzialmente 3 pod</td><td>Base stabile per l'intero impianto</td><td>150</td></tr><tr><td>Tabella antivibrazione</td><td>Consuetudine</td><td>Minimizza le vibrazioni durante la cattura dell'immagine</td><td>3,200</td></tr><tr><td>Tunnel nero cilindrico</td><td>Consuetudine</td><td>Controlla la direzione della luce</td><td>350</td></tr><tr><td>Riduce i riflessi per soggetti piccoli</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rack di messa a fuoco Novoflex CASTEL-MICRO (macro rail)</td><td>Motore a passo e dash; controllato, unità di controllo, cavo di rete, adattatore Euro AC</td><td>Messa a fuoco di precisione submicronica (0,2 & micro; m gradini);</td><td>3,000</td></tr><tr><td>automatizza il movimento della telecamera</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rotavolo XYZ</td><td>Montaggio regolabile</td><td>Allineamento e posizionamento meticoloso del soggetto</td><td>500</td></tr><tr><td>Fotocamera</td><td>Sony Alpha 7R IV (61 MP full-frame)</td><td>Acquisizione dell'immagine ad alta risoluzione</td><td>3,000</td></tr><tr><td>Illuminazione</td><td>2 e volte; Godox SK300II</td><td>Illuminazione uniforme e priva di ombre;</td><td>400</td></tr><tr><td>Illuminazione</td><td>2 e volte; Godox QT600II</td><td>alta velocità con breve durata del lampo</td><td>1400</td></tr><tr><td>Supporti flash</td><td>3 supporti regolabili</td><td>Posizionamento flessibile delle luci</td><td>100</td></tr><tr><td>Modificatore di luce</td><td>Diffusore</td><td>Attenua la luce e riduce le ombre forti</td><td>50</td></tr><tr><td>Contesto</td><td>&ldquo; Buco nero" velluto</td><td>Elimina i riflessi, fornisce uno sfondo uniforme</td><td>200</td></tr><tr><td>Obiettivi al microscopio</td><td>Piano Mitutoyo Apo Infinity Corretto: 5 volte;</td><td>Ingrandimento di alta qualità per microstrutture</td><td>1,000</td></tr><tr><td>Mitutoyo Plan Apo Infinity Corretto: 7,5 e volte;</td><td>2,000</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mitutoyo Plan Apo Infinity Corretto: 10 e volte;</td><td>1,400</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Piano Mitutoyo Apo Infinity Corretto: 20 e volte;</td><td>5,000</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sistema a tubo dell'obiettivo</td><td>Uso diretto della fotocamera con obiettivi Mitutoyo M-Plan (2x, 5x, 7,5x, 10x, 20x)</td><td>Accoppiare gli obiettivi del microscopio alla telecamera</td><td>400</td></tr><tr><td>Adattatore</td><td>Da Sony E-mount a baionetta universale NOVOFLEX A</td><td>Collegamento meccanico tra fotocamera e sistema ottico</td><td>300</td></tr><tr><td>Obiettivo macro</td><td>Venus Optics Laowa 100 mm f/2.8 2 volte; Ultra Macro APO (Sony E-mount)</td><td>Imaging di campioni più grandi ad alto ingrandimento</td><td>550</td></tr><tr><td>Trigger</td><td>Trigger lampo</td><td>Sincronizza il flash con l'otturatore della fotocamera</td><td>50</td></tr><tr><td>Computer</td><td>Laptop ASUS o Alienware, &ge; 128 GB di RAM, processore ad alte prestazioni</td><td>Elaborazione e memorizzazione delle immagini</td><td>3,000</td></tr><tr><td>Media di archiviazione</td><td>2 e volte; SD 256 GB, lettore di schede SD veloce</td><td>Archiviazione e trasferimento di immagini ad alto volume sicuro</td><td>200</td></tr><tr><td>Accessori</td><td>Mouse da gaming</td><td>Precisione durante il montaggio e la navigazione</td><td>50</td></tr><tr><td>Accessori</td><td>Wacom One (tavoletta grafica)</td><td>Controllo fine durante la pulizia e la modifica dell'immagine</td><td>500</td></tr><tr><td><forte>Costo totale</forte></td><td></td><td></td><td><forte>26.800</forte></td></tr></tbody></table>

protocollo di focus stacking per la fotografia di insetti ad alta risoluzione

Focus Stacking Protocol for High-Resolution Insect Photography

Protocollo di Focus Stacking per la Fotografia di Insetti ad Alta Risoluzione

Here, we present a protocol to acquire high resolution, extended depth of field images of insect specimens by photographic focus stacking using a modular ...

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Questo documento dimostra l'uso di una scansione rapida microscopio confocale a comportamenti cella di immagine direttamente attraverso il puparium. Lasciando il bozzolo intatto, questo metodo permette l'osservazione e la misurazione dei processi cellulari dinamiche in una fase di sviluppo Drosophila che è difficile da studiare direttamente.

Imaging attraverso il caso pupa di<em&gt; Drosophila melanogaster</em

La microscopia a fluorescenza a fogli leggeri è lo strumento più prezioso nella biologia dello sviluppo. Uno dei principali problemi degli studi comparativi è la varianza ambientale. Il nostro protocollo descrive un framework sperimentale per l'imaging live simultaneo di più campioni e, pertanto, affronta questo problema in modo pro-attivo.

Imaging live simultaneo di più embrioni di insetti nei microscopi a fluorescenza a fogli di luce a camera campione

Questo protocollo descrive le applicazioni dell'immobilizzazione dei campioni utilizzando coaguli di Fibrin, limitando la deriva e consentendo l'aggiunta e il lavaggio di reagenti durante l'imaging dal vivo. I campioni vengono trasferiti in una goccia di Fibrinogen contenente terreno di coltura sulla superficie di un coverslip, dopo di che la polimerizzazione è indotta dall'aggiunta di trombina.

Applicazioni di immobilizzazione dei tessuti Drosophila con coaguli di fibrina per l'imaging dal vivo

Il protocollo qui descrive la misurazione dell'organizzazione spaziale degli assi visivi degli occhi delle mosche domestiche, mappati da un dispositivo automatico, utilizzando il fenomeno pseudopupil e il meccanismo pupillare delle cellule fotorecettori.

Creazione automatica di grafici dello spazio visivo degli occhi composti di Housefly

La membrana basale è essenziale per la morfogenesi dei tessuti e degli organi durante lo sviluppo. Per comprendere meglio i meccanismi che portano al corretto posizionamento di questa struttura, il protocollo presentato descrive i metodi per visualizzare e caratterizzare il traffico intracellulare e la secrezione di proteine della membrana basale nelle cellule epiteliali utilizzando la microscopia confocale e super-risoluzione.

Imaging confocale e a super-risoluzione del traffico intracellulare polarizzato e della secrezione di proteine della membrana basale durante l'oogenesi della drosophila

Qui, presentiamo un flusso di lavoro rapido e a basso costo per l'imaging ad alta risoluzione degli occhi adulti di Drosophila per quantificare il patterning e i difetti di crescita. Descriviamo il nostro protocollo per la preparazione dei campioni mediante montaggio su punti, acquisizione di immagini ad alta risoluzione e analisi delle immagini.

Un flusso di lavoro rapido e semplice per la quantificazione delle strutture esterne di Drosophila adulta

Questo protocollo descrive l'imaging time-lapse basato su microfluidica di C. elegans durante l'intero sviluppo post-embrionale.

Imaging ad alta risoluzione di C. elegans in tutti gli stadi larvali

Lo sbiancamento iterativo spettrale estende la multiplexità (IBEX) si basa sulla tecnica IBEX di base aggiungendo il blocco dell'eparina per ridurre al minimo il legame non specifico e sfruttando il rilevamento spettrale con la miscelazione computazionale per sopprimere l'autofluorescenza. Questo approccio accelera l'acquisizione delle immagini riducendo al contempo le fonti di fondo, consentendo solide analisi proteomiche spaziali multi-round e ad alto parametro.

Imaging ad alto plex con microscopia confocale spettrale per ridurre al minimo la fluorescenza tissutale non specifica

Questo protocollo dettaglia le applicazioni avanzate di imaging e la gestione delle risorse condivise di un sistema di microscopio confocale a scansione laser integrato con un rivelatore a matrice multiplexata per imaging cellulare e subcellulare ad alta risoluzione. Il flusso di lavoro consente imaging multimodale da confocale a super-risoluzione (~120 nm) all'interno di un'unica piattaforma, rendendo la visualizzazione su scala nanometrica più accessibile.

Imaging a superrisoluzione e gestione condivisa: un protocollo per la microscopia confocale con rilevamento multiplex

Beech malattia corteccia è iniziata dalle attività della cocciniglia di faggio che creano punti di ingresso fungine nella corteccia di alimentazione. Gli alberi che sono resistenti alla cocciniglia sono anche resistenti alle malattie. Qui vi presentiamo il protocollo che abbiamo sviluppato per lo screening individuali faggi per la resistenza scala di faggio.

Una tecnica a Screen Faggio americano per la Resistenza al Beech cocciniglia (<em&gt; Cryptococcus fagisuga</em&gt; Lind.)

Scopri un protocollo di focus stacking a basso costo per la fotografia ad alta risoluzione di insetti. Utilizza una fotocamera mirrorless full-frame con obiettivi microscopici e illuminazione stroboscopica sincronizzata per ottenere immagini dettagliate con profondità di campo estesa.

Protocollo di Focus Stacking per la Fotografia di Insetti ad Alta Risoluzione

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