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</ol>

<table><tbody><tr><td>Agar</td><td>BD</td><td>90000-786</td><td>Per Syntetico Crossing Media/Minimal Media</td></tr><tr><td>Alcohol burner flame</td><td>Wards</td><td>470346-104</td><td>Per sterilizing inoculazione loop</td></tr><tr><td>Ammonium iron sulfate hexahydrate</td><td>Supelco</td><td>FX0245-1</td><td>Per Syntetico Crossing Media/Minimal Media</td></tr><tr><td>Ammonium nitrate (NH4NO3)</td><td>BeanTown Chemical</td><td>BT134170-250G</td><td>Per Minimal Media</td></tr><tr><td>Autoclave</td><td>VWR International</td><td>76683-456</td><td>Per sterilizing vetreria e media</td></tr><tr><td>Biological Safety Cabinet</td><td>ThermoFischer Scientific&nbsp;</td><td>1323TS</td><td>Per ridurre la contaminazione delle piastre e del laboratorio.</td></tr><tr><td>Biotin</td><td>VWR</td><td>97061-444</td><td>Per Syntetico Crossing Media</td></tr><tr><td>Boric acid (H3BO3)</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>100503-696</td><td>Per Syntetico Crossing Media/Minimal Media</td></tr><tr><td>Calcium chloride (CaCl2)</td><td>AVANTOR PERFORMANCE MATERIAL LLC</td><td>JT1311-1</td><td>Per Syntetico Crossing Media</td></tr><tr><td>Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>223506-25G</td><td>Per Minimal Media</td></tr><tr><td>Citric acid monohydrate (C6H8O7·H2O)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1002440500</td><td>Per Syntetico Crossing Media/Minimal Media</td></tr><tr><td>Copper sulfate pentahydrate (CuSO4·5H2O H2O)</td><td>BeanTown Chemical</td><td>BT121245-1KG</td><td>Per Syntetico Crossing Media/Minimal Media</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Decon Labs</td><td>71001-754</td><td>Usato per rimuovere conidi dalla superficie della piastra e sterilizzare l'inoculazione loop</td></tr><tr><td>FIJI/ImageJ</td><td>National Institutes of Health (NIH)</td><td>N/A</td><td>Per analizzare immagini/conteggio</td></tr><tr><td>Gloves</td><td>SW Safety Solutions</td><td>76382-944</td><td>Per sicurezza</td></tr><tr><td>GraphPad Prism</td><td>GraphPad Software, LLC</td><td>N/A</td><td>Per eseguire test statistici e creare figure</td></tr><tr><td>Growth Chamber</td><td>Caron Products &amp; Services</td><td>6320 &amp; 6340 Series</td><td>Programmabile per cicli di fotoperiodo</td></tr><tr><td>HOBO Data Logger</td><td>Onset Computer Corporation</td><td>MX2202</td><td>Per registrazione di intensità luminosa e temperatura</td></tr><tr><td>Inoculation loop</td><td>VWR International</td><td>10806-354</td><td>Per trasferire materiale fungino in piastre petri</td></tr><tr><td>Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O)</td><td>BeanTown Chemical</td><td>BT145380-1KG</td><td>Per Syntetico Crossing Media/Minimal Media</td></tr><tr><td>Manganese sulfate monohydrate (MnSO4·H2O H2O)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1059410250</td><td>Per Syntetico Crossing Media/Minimal Media</td></tr><tr><td>Microscope (Leica S6 D Greenough Stereo Microscope)</td><td>Leica Microsystems</td><td>10446297</td><td>Per imaging</td></tr><tr><td>Neurospora crassa FGSC 2489</td><td>Fungal Genetics Stock Center</td><td>74-OR23-1VA, JCM19069</td><td>Ceppa fungino</td></tr><tr><td>Paper Towels</td><td>Kimberly-Clark Professional, Scott and Kleenex</td><td>6666114</td><td>Per versare media</td></tr><tr><td>Permanent Marker</td><td>Sharpie</td><td>30072</td><td>Per etichettare le piastre</td></tr><tr><td>Petri Dishes</td><td>VWR International</td><td>25384-164</td><td>Per piastra Syntetico Crossing Media</td></tr><tr><td>Pipettes</td><td>VWR International</td><td>75816-090</td><td>Per versare media</td></tr><tr><td>Potassium dihydrogen phosphate (KH2PO4)</td><td>BeanTown Chemical</td><td>BT225070-500G</td><td>Per Syntetico Crossing Media/Minimal Media</td></tr><tr><td>Potassium nitrate (KNO3)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>221295-100G</td><td>Per Syntetico Crossing Media</td></tr><tr><td>Small Disposable Glass Test Tubes</td><td>VWR International</td><td>470211-698</td><td>Per la crescita iniziale del ceppo fungino</td></tr><tr><td>Sodium chloride (NaCl)</td><td>VWR International</td><td>BDH9286-500G</td><td>Per Syntetico Crossing Media</td></tr><tr><td>Sodium citrate dihydrate (Na3C6H5O7·2H2O)</td><td>VWR</td><td>97061-008</td><td>Per Minimal Media</td></tr><tr><td>Sodium hydroxide (NaOH)</td><td>AVANTOR PERFORMANCE MATERIAL LLC</td><td>JT5635-2</td><td>Per Syntetico Crossing Media</td></tr><tr><td>Sodium molybdate dihydrate (Na2MoO4·2H2O)</td><td>Supelco</td><td>1.06524.1000</td><td>Per Syntetico Crossing Media/Minimal Media</td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>VWR International</td><td>BDH9308-500G</td><td>Per Syntetico Crossing Media/Minimal Media</td></tr><tr><td>Zinc sulfate heptahydrate (ZnSO4·7H2O)</td><td>BeanTown Chemical</td><td>BT122545-500G</td><td>Per Syntetico Crossing Media/Minimal Media</td></tr></tbody></table>

test di imaging basato su placche per quantificare le risposte fotoperiodiche in neurospora crassa utilizzando lo sviluppo di protoperiteci

Plate-Based Imaging Assay for Quantifying Photoperiodic Responses in Neurospora crassa Using Protoperithecia Development

Dopo l'inoculazione con il ceppo di tipo selvatico, i conidi hanno coperto la superficie della cellula selvagia entro 36–48 ore. Dopo 7 giorni di esposizione al fotoperiodo, si è formato uno strato conico denso che veniva rimosso con un tovagliolo di carta inumidito saturo al 70% di etanolo (Figura 1). Questo passaggio ha esposto i protoperiteci sottostanti senza disturbarne la struttura. In microscopia, i protoperiteci apparivano come strutture scure e circolari distribuite sulla superficie...

Test di imaging basato su placche per quantificare le risposte fotoperiodiche in Neurospora crassa utilizzando lo sviluppo di protoperiteci

Neurospora crassa is a well-established model organism for studying biological timing and light-regulated development. The Protoperithecia Assay (PPA) is ...

plate-based-imaging-assay-for-quantifying-photoperiodic-responses

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Biologia

Qui vi presentiamo un romanzo di Ca 2+ approccio -imaging utilizzando un reporter bioluminescente. Questo approccio viene utilizzato un costrutto fuso GFP-equorina che si lega al Ca 2+ ed emette luce, eliminando la necessità di luce di eccitazione. Significativamente questo metodo permette di imaging lungo continuo, l'accesso alle strutture cerebrali profonde e alta risoluzione temporale.

In Vivo cervello Imaging funzionale approccio basato sul calcio bioluminescente Indicatore GFP-equorina

L'orologio circadiano regola circa un terzo del trascrittoma di Arabidopsis, ma la percentuale di geni che alimentano di nuovo nel cronometraggio rimane sconosciuto. Qui visualizziamo un metodo per valutare rapidamente fenotipi circadiani in qualsiasi linea mutante di Arabidopsis utilizzando immagini luminescenti di un reporter circadiano transitoriamente espresso in protoplasti.

Analisi Rapida di fenotipi circadiani in Arabidopsis protoplasti transfettate con un luminescenti Clock Reporter

L'uso di un "chip olfattivo" adattato per l'imaging del calcio efficiente dei maschi di c. elegans è descritto qui. Sono indicati anche gli studi di esposizione maschio a glicerolo e ad un feromone.

Tramite un Chip olfattiva di microfluidica adattato per l'Imaging dell'attività neuronale in risposta ai feromoni in neuroni di testa maschio C. Elegans

Qui, presentiamo un approccio combinatorio utilizzando microscopia ad alta risoluzione, strumenti computazionali, e l'etichettatura a cella singola in vivente embrioni C. elegans per comprendere le singole dinamiche delle cellule durante il neurosviluppo.

Microscopia isotropica leggera e analisi di lignaggio cellulare automatizzate al catalogo Caenorhabditis elegans embriogenesi con risoluzione subcellulare

I coloranti fluorescenti vitali sono strumenti essenziali per l'analisi dell'imaging a cellule vive nella moderna biologia delle cellule fungine. Questo documento descrive in dettaglio l'applicazione di coloranti fluorescenti affermati e meno noti per il monitoraggio della dinamica della membrana plasmatica, dell'endo/esocitosi e della morfogenesi delle pareti cellulari nei funghi filamentosi.

Applicazione di coloranti fluorescenti selettivi a membrana e a parete cellulare per l'imaging a celle vive di Filamentous Fungi

Qui, introduciamo e descriviamo un metodo nonradioattivo e non invasivo per valutare la sintesi proteica de novo in vivo, utilizzando il nematode Caenorhabditis elegans e il recupero della fluorescenza dopo il fotobleaching (FRAP). Questo metodo può essere combinato con schermi genetici e/o farmacologici per identificare nuovi modulatori della sintesi proteica.

Valutazione dei tassi di sintesi proteica de novo in Caenorhabditis elegans

È stato presentato un protocollo per l'imaging dei microtubuli dinamici in vivo utilizzando una proteina legante finale etichettata fluorescentemente. Abbiamo descritto i metodi per etichettare, immaginare e analizzare i microtubuli dinamici nel neurone del microtubulo laterale posteriore (PLM) di C. elegans.

In vivo Valutazione della dinamica e dell'orientamento dei microtubuli nei neuroni della caenorhabditis elegans

Presentiamo un protocollo di imaging live senza etichette che utilizza tecniche di microscopia ottica trasmessa per catturare immagini, analizzare e quantificare la cinetica di crescita del fungo filamentoso A. nidulans sia in colture sommerse che in mezzi solidi. Questo protocollo può essere utilizzato in combinazione con la microscopia a fluorescenza.

Analisi quantitativa del tasso di crescita di Aspergillus nidulans utilizzando la microscopia dal vivo e il software open source

Presentiamo un protocollo per caratterizzare elettrofisiologicamente i fotopigmenti bistabili: (i) sfruttando gli spostamenti di carica all'interno delle molecole di fotopigmento a seguito dell'assorbimento dei fotoni e la loro enorme quantità nei fotorecettori, e (ii) sfruttando le differenze assorbimento-spettri degli stati di fotopigmento di rodopsina e metarodopsina. Questi protocolli sono utili per lo screening delle mutazioni che interessano i sistemi fotopigmenti bi-stabili.

Metodi elettrofisiologici per misurare i livelli di fotopigmento nei fotorecettori di Drosophila

La maggior parte degli organismi fotoautotrofici che nuotano mostrano cambiamenti comportamentali fotoindotti (comportamento fotografico). Il presente protocollo osserva il suddetto comportamento fotografico nell'organismo modello Chlamydomonas reinhardtii.

Osservazione del comportamento fotografico in Chlamydomonas reinhardtii

In questo articolo, descriviamo uno strumento avanzato progettato per il monitoraggio della biosintesi della clorofilla durante le prime fasi di de-eziolamento delle piantine di Arabidopsis . La nuova metodologia fornisce immagini non invasive in tempo reale della fluorescenza della clorofilla ad alta risoluzione spaziale e temporale.

Test non invasivo per la determinazione della cinetica della biosintesi della clorofilla durante le prime fasi della deeziolazione dell'Arabidopsis

The State University of New Jersey.  Il Saggio dei Protoperiteci quantifica le risposte fotoperiodiche in Neurospora crassa misurando la formazione dei protoperiteci sotto cicli chiaro-oscuro definiti. Questo metodo basato su placche offre un approccio semplice e scalabile per confrontare risposte di sviluppo dipendenti dal fotoperiodo tra condizioni sperimentali.

Test di imaging basato su placche per quantificare le risposte fotoperiodiche in Neurospora crassa utilizzando lo sviluppo di protoperiteci

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