Name: Caratterizzazione funzionale dei partner individuali pre- e postsinaptici nel sistema nervoso centrale larvale di Drosophila utilizzando CaMPARI (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-16T13:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 5 s
Description: Scopri come validare funzionalmente la connettività sinaptica nel sistema nervoso centrale di larve di Drosophila utilizzando CaMPARI e optogenetica. Questo metodo consente di studiare le reti neuronali in vivo.

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<table><tbody><tr><td>0.1 M Phosphate Buffered Saline (PBS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P5368-10PAK</td><td>Chimico utilizzato nella soluzione per idratare e montare le larve</td></tr><tr><td>All-trans-retinal (ATR)&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R2500-500mg</td><td>Chimico aggiunto al cibo per attivare gli strumenti optogenetici</td></tr><tr><td>Microscopio confocale</td><td>ZEISS&nbsp;</td><td>LSM900 Confocal</td><td>Microscopio confocale, Lente obiettivo (40&times;/1.2 NA), Sorgente luce/laser (405, 488, 561 nm)</td></tr><tr><td>Copriporta (18x18mm)</td><td>VWR</td><td>48366-205</td><td>Usato per montare gli animali per l'imaging</td></tr><tr><td>Etanolo (95%)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E7023</td><td>Usato come solvente per la polvere ATR</td></tr><tr><td>Fiji (ImageJ)</td><td>Open source</td><td>RRID:SCR_002285&nbsp;</td><td>Usato per l'analisi delle immagini</td></tr><tr><td>Prism versione 10.4.1</td><td>GraphPad Software Inc.</td><td>RRID:SCR_002798</td><td>Usato per l'analisi statistica</td></tr><tr><td>Lamelle per microscopio</td><td>VWR</td><td>&nbsp;48300-041</td><td>Usato per montare gli animali per l'imaging</td></tr><tr><td>Argilla per modellazione</td><td>Flinn scientific</td><td>FB0600</td><td>Usato per tenere la lastra di vetro sul vetrino del microscopio con le larve nel mezzo</td></tr><tr><td>Pennello&nbsp;</td><td>Genesee scientific</td><td>59-204</td><td>Usato per trasferire le larve tra località</td></tr><tr><td>Standard cornmeal agar medium</td><td>Genesee scientific</td><td>66-123</td><td>Il cibo può anche essere preparato usando ricette e ingredienti standard simili</td></tr><tr><td>Flaconi di plastica standard per Drosophila (flaconi stretti Drosophila da 25mm x 95mm)</td><td>Genesee scientific</td><td>32-109</td><td>Possono essere usati anche flaconi o bottiglie più grandi</td></tr><tr><td>Piatto micro spot a tre pozzetti</td><td>Electron Microscopy Sciences&nbsp;</td><td>71561-01</td><td>Piatto usato per separare e pulire singolari larve</td></tr><tr><td>Stoccaggio Drosophila (genotipo: w; Basin4-LexA/CyO-TwGFP; ppk-GAL4/ppk-GAL4)&nbsp;</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>RRID:BDSC_54899 &amp; RRID:BDSC_32079</td><td>Ottenuti ricombinando RRID:BDSC_54899 e RRID:BDSC_32079</td></tr><tr><td>Stoccaggio Drosophila (genotipo: w, UAS-IVS-CsChrimson.mVenus, LexAOp-CaMPARI2; Sp/CyO)</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>RRID:BDSC_81085</td><td>Ottenuti ricombinando RRID:BDSC_81085 con marcatori del secondo cromosoma</td></tr></tbody></table>

caratterizzazione funzionale dei partner individuali pre- e postsinaptici nel sistema nervoso centrale larvale di drosophila utilizzando campari

Functional Characterization of Individual Pre- and Postsynaptic Partners In the Drosophila Larval Central Nervous System Using CaMPARI

Caratterizzazione funzionale dei partner individuali pre- e postsinaptici nel sistema nervoso centrale larvale di Drosophila utilizzando CaMPARI

Connectome studies have greatly expanded understanding of synaptic connectivity in the nervous systems of various species. While characterization of ...

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Analisi microarray è stato condotto per determinare profili di espressione...

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Questo protocollo dimostra come Proximity legatura test può essere utilizzato per rilevare in situ interazioni proteina-proteina in Drosophila larvale neuromuscolare giunzione. Con questa tecnica, dischi grandi e Hu-li Shao tai sono presenti per formare un complesso in corrispondenza della zona postsinaptico, un'associazione precedentemente identificato mediante co-immunoprecipitazione.

Rilevamento di In Situ Complessi proteina-proteina del Drosophila Larvale neuromuscolare Junction Utilizzando prossimità legatura Assay

Qui mostriamo come quantificare il numero e la distribuzione spaziale delle zone attive sinaptiche In Drosophila melanogaster fotorecettori, evidenziata con un marcatore molecolare geneticamente codificato, e la loro modulazione dopo una prolungata esposizione alla luce.

Analizzando Synaptic Modulazione di<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Fotorecettori dopo l&#39;esposizione alla luce prolungata

Qui, presentiamo un protocollo per una tecnica di etichettatura mosaico che permette la visualizzazione dei neuroni derivati ​​da una cellula progenitrice comune in due colori distinti. Questo facilita l'analisi lignaggio neurale con la capacità di singoli neuroni nascita aggiornamento e la funzione del gene studiando negli stessi neuroni di diversi individui.

Le analisi delle cellule lignaggio e studi la funzione del gene Impiegando doppi loco MARCM

Delle correnti sinaptiche possono essere registrate focale da visualizzati boutons sinaptici alla giunzione neuromuscolare larve instar terza della drosofila . Questa tecnica consente il monitoraggio dell'attività di una singola bouton sinaptica.

Macropatch focale registrazioni delle correnti sinaptiche da giunzione neuromuscolare larvale della drosofila

Qui presentiamo un protocollo con il quale il calcio pre e/o postsinaptico può essere visualizzato nel contesto dell'apprendimento e della memoria della Drosophila. L'imaging di calcio in vivo che utilizza sensori di calcio localizzati sinapricamente viene combinato con un classico paradigma di condizionamento olfattivo in modo tale che la plasticità sinaptica alla base di questo tipo di apprendimento associativo può essere determinata.

In Vivo Optical Calcium Imaging della plasticità sinaptica indotta dall'apprendimento in Drosophila melanogaster

Descriviamo un metodo per la tracciatura retrograda dei motoneuroni embrionali della Drosophila usando coloranti fluorescenti lipofilici.

Tracciamento retrogrado dei neuroni motori embrionali della Drosophila utilizzando coloranti fluorescenti lipofilici

Descriviamo un protocollo per misurare i contatti tra cellule in strati epiteliali adiacenti in dischi immaginali ali vivi di Drosophila utilizzando un approccio basato sulla ricostituzione GFP.

Un sistema a doppia espressione basato sulla complementazione GFP per la valutazione del contatto cellula-cellula mediato dai citonemi nei dischi immaginali delle ali di Drosophila vive

Scopri come validare funzionalmente la connettività sinaptica nel sistema nervoso centrale di larve di Drosophila utilizzando CaMPARI e optogenetica. Questo metodo consente di studiare le reti neuronali in vivo.

Caratterizzazione funzionale dei partner individuali pre- e postsinaptici nel sistema nervoso centrale larvale di Drosophila utilizzando CaMPARI (Video) | JoVE Journal

Caratterizzazione funzionale dei partner individuali pre- e postsinaptici nel sistema nervoso centrale larvale di Drosophila utilizzando CaMPARI

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