Name: Fenotipizzazione in vivo della neurodegenerazione dopaminergica nelle larve di pesce zebra tramite analisi comportamentale e imaging ad alto contenuto (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-16T13:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 13 s
Description: Scopri un pipeline standardizzato di fenotipizzazione ad alto contenuto per studiare la neurodegenerazione dopaminergica nel pesce zebra. Questo metodo combina ablazione chemogenetica e imaging automatizzato per screening rapidi di composti neuroprotettivi.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol>
	<li>Haynes, E. M., Ulland, T. K., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+discovery:+the+role+of+imaging+established+and+emerging+non-mammalian+models+in+neuroscience.">A model of discovery: the role of imaging established and emerging non-mammalian models in neuroscience.</a> Front Mol Neurosci. 15, 867010 (2022).</li><li>Yang, W., Chen, X., Li, S., Li, X. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+modified+large+animal+models+for+investigating+neurodegenerative+diseases.">Genetically modified large animal models for investigating neurodegenerative diseases.</a> Cell Biosci. 11 (1), 218 (2021).</li><li>Dodiya, R., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish-based+Parkinson&#8217;s+disease+models:+unveiling+genetic+mechanisms+and+therapeutic+pathways.">Zebrafish-based Parkinson&#8217;s disease models: unveiling genetic mechanisms and therapeutic pathways.</a> CNS Neurol Disord Drug Targets. 24 (12), 900-920 (2025).</li><li>Wasel, O., Freeman, J. L. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+and+genetic+zebrafish+models+to+define+mechanisms+of+and+treatments+for+dopaminergic+neurodegeneration.">Chemical and genetic zebrafish models to define mechanisms of and treatments for dopaminergic neurodegeneration.</a> Int J Mol Sci. 21 (17), (2020).</li><li>Kozol, R. A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Function+over+form:+modeling+groups+of+inherited+neurological+conditions+in+zebrafish.">Function over form: modeling groups of inherited neurological conditions in zebrafish.</a> Front Mol Neurosci. 9, 55 (2016).</li><li>Jang, H., Kim, S. H., Koh, Y., Yoon, K. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+brain+organoids:+toward+mature+neural+circuitry+with+an+intact+cytoarchitecture.">Engineering brain organoids: toward mature neural circuitry with an intact cytoarchitecture.</a> Int J Stem Cells. 15 (1), 41-59 (2022).</li><li>Vandamme, T. F. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+rodents+as+models+of+human+diseases.">Use of rodents as models of human diseases.</a> J Pharm Bioallied Sci. 6 (1), 2-9 (2014).</li><li>Malik, N., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compounds+with+species+and+cell+type+specific+toxicity+identified+in+a+2000+compound+drug+screen+of+neural+stem+cells+and+rat+mixed+cortical+neurons.">Compounds with species and cell type specific toxicity identified in a 2000 compound drug screen of neural stem cells and rat mixed cortical neurons.</a> Neurotoxicology. 45, 192-200 (2014).</li><li>Hasani, H., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-brain+imaging+of+freely-moving+zebrafish.">Whole-brain imaging of freely-moving zebrafish.</a> Front Neurosci. 17, 1127574 (2023).</li><li>Mattern, K., von Trotha, J. W., Erfle, P., K&#x00F6;ster, R. W., Dietzel, A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NeuroExaminer:+an+all-glass+microfluidic+device+for+whole-brain+in+vivo+imaging+in+zebrafish.">NeuroExaminer: an all-glass microfluidic device for whole-brain in vivo imaging in zebrafish.</a> Commun Biol. 3 (1), 311 (2020).</li><li>Panier, T., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+functional+imaging+of+multiple+brain+regions+in+intact+zebrafish+larvae+using+selective+plane+illumination+microscopy.">Fast functional imaging of multiple brain regions in intact zebrafish larvae using selective plane illumination microscopy.</a> Front Neural Circuits. 7, 65 (2013).</li><li>Noda, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging-related+motor+function+and+dopaminergic+neuronal+loss+in+C57BL/6+mice.">Aging-related motor function and dopaminergic neuronal loss in C57BL/6 mice.</a> Mol Brain. 13 (1), 46 (2020).</li><li>Godoy, R., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemogenetic+ablation+of+dopaminergic+neurons+leads+to+transient+locomotor+impairments+in+zebrafish+larvae.">Chemogenetic ablation of dopaminergic neurons leads to transient locomotor impairments in zebrafish larvae.</a> J Neurochem. 135 (2), 249-260 (2015).</li><li>Schallert, T., Tillerson, J. L. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intervention+strategies+for+degeneration+of+dopamine+neurons+in+parkinsonism:+optimizing+behavioral+assessment+of+outcome.">Intervention strategies for degeneration of dopamine neurons in parkinsonism: optimizing behavioral assessment of outcome.</a> Cent Nerv Syst Dis. , 131-151 (2000).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The zebrafish book: a guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio). , (2007).</li><li>Avdesh, A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regular+care+and+maintenance+of+a+zebrafish+(Danio+rerio)+laboratory:+an+introduction.">Regular care and maintenance of a zebrafish (Danio rerio) laboratory: an introduction.</a> J Vis Exp. (69), e4196 (2012).</li><li>Nipu, N., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methylene+blue+at+recommended+concentrations+alters+metabolism+in+early+zebrafish+development.">Methylene blue at recommended concentrations alters metabolism in early zebrafish development.</a> Commun Biol. 8 (1), 120 (2025).</li><li>Ohnesorge, N., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+the+effect+of+tricaine+(MS-222)-induced+anesthesia+on+brain-wide+neuronal+activity+of+zebrafish+larvae.">Assessment of the effect of tricaine (MS-222)-induced anesthesia on brain-wide neuronal activity of zebrafish larvae.</a> Front Neurosci. 18, 1456322 (2024).</li><li>Schroeder, A. B., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ImageJ+ecosystem:+open-source+software+for+image+visualization,+processing,+and+analysis.">The ImageJ ecosystem: open-source software for image visualization, processing, and analysis.</a> Protein Sci. 30 (1), 234-249 (2021).</li><li>Stirling, D. R., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CellProfiler+4:+improvements+in+speed,+utility+and+usability.">CellProfiler 4: improvements in speed, utility and usability.</a> BMC Bioinformatics. 22 (1), 433 (2021).</li><li>Kim, G. H. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+zebrafish+screen+reveals+renin-angiotensin+system+inhibitors+as+neuroprotective+via+mitochondrial+restoration+in+dopamine+neurons.">A zebrafish screen reveals renin-angiotensin system inhibitors as neuroprotective via mitochondrial restoration in dopamine neurons.</a> eLife. 10, (2021).</li><li>Kim, G. H. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+dopamine+neuron+imaging-based+small+molecule+screen+identifies+novel+neuroprotective+compounds+and+targets.">In vivo dopamine neuron imaging-based small molecule screen identifies novel neuroprotective compounds and targets.</a> Front Pharmacol. 13, 837756 (2022).</li><li>Aponte, P. M., Gutierrez-Reinoso, M. A., Garcia-Herreros, M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bridging+the+gap:+animal+models+in+next-generation+reproductive+technologies+for+male+fertility+preservation.">Bridging the gap: animal models in next-generation reproductive technologies for male fertility preservation.</a> Life (Basel). 14 (1), (2023).</li><li>Fen, W., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+for+cell-based+screening+methods+in+drug+discovery.">A review for cell-based screening methods in drug discovery.</a> Biophys Rep. 7 (6), 504-516 (2021).</li></ol>

<table><tbody><tr><td>Adult zebrafish diet, 0.5 mm pellets</td><td>Zeigler</td><td>AH271</td><td>Usato per l'alimentazione di zebrafish adulti durante le normali cure</td></tr><tr><td>Agarosio, a basso punto di fusione (LMA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9414-10G</td><td>Usato per incorporare le larve nei pozzetti per una posizione stabile durante l'imaging</td></tr><tr><td>Carta stagnola</td><td>ULINE</td><td>S-20197</td><td>Usato per proteggere reagenti sensibili alla luce come MTZ durante la preparazione e l'incubazione</td></tr><tr><td>CellProfiler</td><td>Broad Institute</td><td>RRID: SCR_007358</td><td>Usato per l'analisi opzionale delle immagini di fluorescenza automatizzata</td></tr><tr><td>Tubi conici, 15 mL</td><td>Corning</td><td>352097</td><td>Usato per la preparazione dei reagenti e la manipolazione dei campioni</td></tr><tr><td>Tubi conici, 50 mL</td><td>Corning</td><td>352070</td><td>Usato per la preparazione dei reagenti e lo stoccaggio delle soluzioni</td></tr><tr><td>Serbatoi per l'incrocio (1,0 L)</td><td>Aquaneering</td><td>ZHCT100</td><td>Usato per l'allevamento controllato di zebrafish e la raccolta di embrioni</td></tr><tr><td>Danio rerio (AB wild type)</td><td>&mdash;</td><td>&mdash;</td><td>Linea di controllo non transgenica usata per validare la specificità degli effetti dipendenti dalla nitroriduttasi</td></tr><tr><td>Danio rerio (Tg(th:Gal4; UAS:NTR-mCherry))</td><td>&mdash;</td><td>&mdash;</td><td>Linea di zebrafish transgenica che esprime nitroriduttasi-mCherry nei neuroni dopaminergici per l'ablazione chemogenetica mirata</td></tr><tr><td>Diossido di metile (DMSO), anidro (&ge;99,9%)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>472301-500ML</td><td>Solvente per PTU, MTZ e composti di screening</td></tr><tr><td>EthoVision XT</td><td>Noldus</td><td>RRID: SCR_000441</td><td>Software di tracciamento comportamentale usato per quantificare la locomozione larvale</td></tr><tr><td>Fiji (ImageJ)</td><td>NIH</td><td>RRID: SCR_003070</td><td>Software di analisi delle immagini usato per la quantificazione della fluorescenza</td></tr><tr><td>Pinzette a punta fine o sonda da 0,25 mm</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI0118</td><td>Usate per orientare le larve durante l'incorporazione in agarosio</td></tr><tr><td>Microscopio a fluorescenza</td><td>Zeiss</td><td>11845460</td><td>Usato per immagine dei neuroni dopaminergici tramite fluorescenza mCherry</td></tr><tr><td>Gemma Micro 150 ZF (dieta per giovani, 100&ndash;200 &mu;m)</td><td>Skretting</td><td>10818945</td><td>Usato per nutrire zebrafish giovani</td></tr><tr><td>Gemma Micro 75 ZF (dieta per larve, 50&ndash;100 &mu;m)</td><td>Skretting</td><td>10818935</td><td>Usato per nutrire larve zebrafish</td></tr><tr><td>GraphPad Prism</td><td>GraphPad</td><td>RRID: SCR_002798</td><td>Software di analisi statistica usato per l'analisi dei dati e la creazione di grafici</td></tr><tr><td>Blocco riscaldante (capace di 42&deg;C e 70&deg;C)</td><td>Thermo Fisher</td><td>88870001</td><td>Usato per sciogliere e mantenere l'agarosio a temperature controllate</td></tr><tr><td>Fotocamera ad alta risoluzione (compatibile con montaggio dall'alto)</td><td>Basler</td><td>88-327</td><td>Usata per registrare l'attività locomotoria larvale</td></tr><tr><td>Acido cloridrico (HCl), 0,1 M</td><td>Fisher Scientific</td><td>SA48-500</td><td>Usato per regolare il pH durante la preparazione del tricaine</td></tr><tr><td>Incubatore (28,5&deg;C, fotoperiodo 14 h luce:10 h buio)</td><td>Millipore</td><td>Z763314</td><td>Mantiene condizioni ambientali controllate per lo sviluppo dei zebrafish</td></tr><tr><td>Sale marino Instant Ocean</td><td>Instant Ocean</td><td>SS15-10</td><td>Usato per preparare l'acqua degli uova blu (BEW)</td></tr><tr><td>Foglio diffusore di luce (o equivalente)</td><td>Edmund Optics</td><td>27-103</td><td>Usato per fornire un'illuminazione uniforme e minimizzare l'abbagliamento durante la registrazione comportamentale</td></tr><tr><td>Pannello luminoso</td><td>Lightcraft</td><td>LC2004LED</td><td>Fornisce illuminazione inferiore durante il tracciamento locomotore</td></tr><tr><td>Metronidazolo (MTZ)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M3761-100G</td><td>Usato per l'ablazione chemogenetica dei neuroni dopaminergici</td></tr><tr><td>Blu di metilene, soluzione acquosa 1%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M9140</td><td>Aggiunto al BEW per prevenire la crescita microbica negli embrioni</td></tr><tr><td>Tubi per microcentrifuga, 1,5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>22363204</td><td>Usati per la suddivisione e lo stoccaggio dei reagenti</td></tr><tr><td>Micropipetta, P200</td><td>Gilson</td><td>FP10005S</td><td>Usata per la manipolazione delle larve e la preparazione delle soluzioni</td></tr><tr><td>Piatti Petri, 100 mm</td><td>Corning</td><td>CLS430167</td><td>Usati per la raccolta e l'incubazione degli embrioni</td></tr><tr><td>Punta per pipette, 200 &mu;L</td><td>RAININ</td><td>30389188</td><td>Usate con le micropipette per la manipolazione dei liquidi e il trasferimento delle larve</td></tr><tr><td>Cloruro di sodio (NaCl), &ge;99,0%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9888-500G</td><td>Usato per preparare tamponi e soluzioni acquose</td></tr><tr><td>Idrossido di sodio (NaOH), 0,1 M</td><td>Fisher Scientific</td><td>SS256-500</td><td>Usato per regolare il pH durante la preparazione del tricaine</td></tr><tr><td>Stereomicroscopio</td><td>Nikon</td><td>SMZ-745</td><td>Usato per la manipolazione e l'orientamento delle larve durante l'incorporazione</td></tr><tr><td>Tappetino termico a temperatura controllata (25&deg;C&ndash;28&deg;C)</td><td>Vivosun</td><td>V-SHMDT</td><td>Mantiene una temperatura stabile durante la registrazione comportamentale</td></tr><tr><td>Tricaine metanosulfonato (MS-222)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E10521-10G</td><td>Usato come anestetico per le larve di zebrafish</td></tr><tr><td>Base di tris</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP152-1</td><td>Usato nella preparazione della soluzione tamponata di tricaine</td></tr><tr><td>Sistema di purificazione dell'acqua</td><td>Millipore</td><td>ZIQ7003T0</td><td>Usato per generare acqua deionizzata per la preparazione delle soluzioni</td></tr><tr><td>Serbatoi per zebrafish</td><td>Aquaneering</td><td>ZS560</td><td>Usati per mantenere le popolazioni di zebrafish adulti</td></tr><tr><td>1-Fenil-2-tiourea (PTU)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7629-10G</td><td>Usato per inibire la melanogenesi e mantenere la trasparenza ottica</td></tr><tr><td>Piastra a 6 pozzetti, fondo piatto</td><td>Corning</td><td>07-200-83</td><td>Usata per i test comportamentali locomotori</td></tr><tr><td>Piastra a 96 pozzetti, fondo piatto</td><td>Greiner Bio-One</td><td>655096</td><td>Usata per gli assay di imaging

fenotipizzazione in vivo della neurodegenerazione dopaminergica nelle larve di pesce zebra tramite analisi comportamentale e imaging ad alto contenuto

In Vivo Phenotyping of Dopaminergic Neurodegeneration in Zebrafish Larvae Using Behavioral Analysis and High-Content Imaging

Fenotipizzazione in vivo della neurodegenerazione dopaminergica nelle larve di pesce zebra tramite analisi comportamentale e imaging ad alto contenuto

Drug discovery research in neurodegeneration is constrained by the high cost and low throughput of traditional mammalian models. This bottleneck is ...

La nostra ricerca indaga la degenerazione dei neuroni dopaminergici nel morbo di Parkinson e analizza la presenza di nuovi composti neuroprotettivi. La lacuna scientifica che il nostro protocollo di ricerca affronta consiste nel posizionarsi esattamente a metà strada tra i tradizionali modelli cellulari privi di contesto e i modelli su roditore più lenti. Il nostro modello su pesce zebra offre un metodo molto rapido e scalabile per affrontare queste difficili scoperte farmacologiche nei disturbi neurodegenerativi, come il morbo di Parkinson.Per iniziare, trasferire l'acqua del serbatoio contenente embrioni di pesce zebra transgenici omozigoti attraverso un filtro a maglia da 400 micrometri. Allevare gli embrioni in una piastra di Petri da 100 millilitri contenente 30 millilitri di acqua per uova blu, o BEW, incubando a 28,5 gradi Celsius in un ciclo di 14 ore di luce e 10 ore di buio. Tra le 24 e le 36 ore dopo la fecondazione, preparare una miscela contenente BEW e 60 microlitri di 1-fenil-2-tiourea o PTU a una concentrazione finale di 200 micromolari. Trasferire gli embrioni in questa miscela per mantenere la trasparenza delle larve. A tre giorni dalla fecondazione, utilizzare il

in-vivo-phenotyping-dopaminergic-neurodegeneration-zebrafish-larvae

Research

Ricerca

JoVE Journal

Neuroscience

Neuroscienze

Questo articolo descrive la risposta comportamentale del pesce zebra ai composti tossici monitorando la locomozione larvale. Il protocollo esamina inoltre un esempio di risposta delle larve di zebrafish agli inquinanti ambientali.

Saggio di locomozione larvale: metodo ad alto rendimento per studiare la tossicità neurocomportamentale di un composto nelle larve di pesce zebra

Fonte: Schramm, P. et al. Imaging in vivo di tessuto cerebrale completamente attivo in larve di zebrafish sveglie e giovani mediante rimozione del cranio e della pelle. J. Vis. Exp. (2021)Questo video dimostra l'imaging in vivo dei neuroni cerebellari nelle larve transgeniche di zebrafish, che esprimono proteine fluorescenti nei neuroni di Purkinje. Il processo prevede l'anestetizzazione delle larve, l'immobilizzazione in agarosio e la rimozione accurata della pelle pigmentata per migliorare la...

Imaging in vivo del cervello larvale di pesce zebra per la visualizzazione dei neuroni cerebellari

Qui vi presentiamo un approccio sistematico per lo sviluppo fisiologicamente rilevanti, sensibile e...

In Vivo Modellazione del genoma umano Morbid utilizzando Danio rerio

Il nostro laboratorio ha sviluppato un sistema di imaging automatizzato romanzo ad alta produttività che è utile per il rilevamento di diversi comportamenti differenti in 7 giorni di età zebrafish larve. Il sistema può essere usato per rilevare sottili cambiamenti nel comportamento dopo le larve sono stati esposti agli agenti tossici ambientali o farmaceutici.

Automatizzati high-throughput analisi comportamentali nelle larve Zebrafish

Qui presentiamo un protocollo per lo sviluppo e la caratterizzazione di un modello di epilessia zebrafish derivante dall'inibizione transitoria del gene DEPDC5.

Analisi comportamentale e fisiologica in un modello di zebrafish di epilessia

Presentiamo una camera comportamentale progettata per valutare le prestazioni cognitive. Forniamo dati che dimostrano che una volta acquisiti, i pesci zebra ricordano l'attività 8 settimane dopo. Mostriamo anche che i pesci zebra iperglicemici hanno alterato le prestazioni cognitive, indicando che questo paradigma è applicabile agli studi che valutano la cognizione e la memoria.

L'attività comportamentale di scelta a tre camere utilizzando Zebrafish come sistema modello

Qui presentiamo un metodo per immaginare il cervello embrionale del pesce zebra in vivo fino agli stadi larvale e giovanile. Questa procedura microinvasiva, adattata da approcci elettrofisiologici, fornisce l'accesso ai dettagli cellulari e subcellulari del neurone maturo e può essere combinata con studi optogenetici e neurofarmacologici per caratterizzare la funzione cerebrale e l'intervento farmacologico.

Imaging in vivo del tessuto cerebrale completamente attivo in larve di zebrafish svegli e giovani mediante rimozione del cranio e della pelle

Il presente protocollo descrive l'iniezione intracerebroventricolare (ICV) di zebrafish adulto con 6-idrossidopamina neurotossica (6-OHDA) al diencefalo ventrale (Dn) e la valutazione della compromissione e del successivo recupero del comportamento di nuoto postlesione utilizzando il test in vasca aperta, che è accompagnato da analisi utilizzando un software di tracciamento video.

Valutazione locomotoria del modello di malattia di Parkinson a base di zebrafish adulto indotto da 6-idrossidopamina

Presentato qui è un protocollo per l'imaging in vivo dell'intero cervello del pesce zebra larvale utilizzando la microscopia a fluorescenza tridimensionale. La procedura sperimentale include la preparazione del campione, l'acquisizione di immagini e la visualizzazione.

In vivo Imaging dell'intero cervello delle larve di zebrafish mediante microscopia a fluorescenza tridimensionale

Qui, presentiamo un protocollo dettagliato per esaminare l'attività neurale nelle regioni cerebrali del pesce zebra transgenico che esprimono indicatori di calcio GCaMP utilizzando la microscopia confocale.

In vivo Imaging a fluorescenza confocale dell'attività neurale indotta dalla stimolazione sensoriale in larve di pesce zebra parzialmente trattenute

Questo protocollo stabilisce un paradigma di fenotipizzazione comportamentale nelle larve di pesce zebra trattate con MPTP per valutare i deficit motori e non motori simili alla malattia di Parkinson.

Profilazione fenotipica dei fenotipi comportamentali simili a Parkinson indotti da MPTP nelle larve di pesce zebra, basata su un esperimento comportamentale

Scopri un pipeline standardizzato di fenotipizzazione ad alto contenuto per studiare la neurodegenerazione dopaminergica nel pesce zebra. Questo metodo combina ablazione chemogenetica e imaging automatizzato per screening rapidi di composti neuroprotettivi.

Fenotipizzazione in vivo della neurodegenerazione dopaminergica nelle larve di pesce zebra tramite analisi comportamentale e imaging ad alto contenuto (Video) | JoVE Journal

Fenotipizzazione in vivo della neurodegenerazione dopaminergica nelle larve di pesce zebra tramite analisi comportamentale e imaging ad alto contenuto

Esplora altri video