Name: Quantificazione del tasso di letalità embrionale in Caenorhabditis elegans (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-12T15:15:00.000+00:00
Duration: 11 min 35 s
Description: Impara a quantificare la letalità embrionale in Caenorhabditis elegans con un saggio a basso costo e senza attrezzature specializzate. Questo metodo accessibile misura difetti dello sviluppo causati da fattori genetici o ambientali.

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<table><tbody><tr><td>Ampicillin sodium salt</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9518</td><td></td></tr><tr><td>Bacteriological peptone</td><td>Fischer Scientific</td><td>DF0118-17-0</td><td></td></tr><tr><td>C. elegans N2</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td>N2</td><td>wild type</td></tr><tr><td>C. elegans NL2099</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td>NL2099</td><td>rrf-3(pk1426) II. RNAi ipersensibile</td></tr><tr><td>Calcium chloride, anhydrous</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>746495</td><td></td></tr><tr><td>Cholesterol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3045</td><td></td></tr><tr><td>Conical tubes, 15 mL</td><td>VWR</td><td>60818-725</td><td></td></tr><tr><td>Culture tubes, 14 mL</td><td>VWR</td><td>470150-966</td><td></td></tr><tr><td>Diaphragm vacuum pump</td><td>Amazon</td><td>TC-100</td><td></td></tr><tr><td>Dissecting microscope</td><td>AmScope&nbsp;</td><td>SM-2</td><td></td></tr><tr><td>Escherichia coli HT115</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td></td><td>RNAse III-deficient, used for RNAi by feeding experiments</td></tr><tr><td>Escherichia coli OP50</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Granulated agar</td><td>Fischer Scientific</td><td>BP97445</td><td></td></tr><tr><td>Handheld tally counter</td><td>LabDepot</td><td>HTCP01</td><td></td></tr><tr><td>IPTG, dioxane free (Isopropyl-b-D-thiogalactoside)</td><td>US Biological</td><td>I8500</td><td></td></tr><tr><td>LB Broth (Miller)</td><td>US Biological</td><td>L1520</td><td>Per preparare il terreno LB sciogliere 25 g di polvere LB in 1 L di acqua distillata. Autoclavare per 20 min a 121.1 &deg;C.</td></tr><tr><td>Luer Lok disposable syringe</td><td>BH Supplies</td><td>BH20LL</td><td></td></tr><tr><td>Magnesium sulfate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M2643</td><td></td></tr><tr><td>Microscopy slides</td><td>Sail Brand</td><td>7101</td><td></td></tr><tr><td>Petri dishes, 100 mm</td><td>Tritech Research</td><td>T3371</td><td></td></tr><tr><td>Petri dishes, 35 mm</td><td>Tritech Research</td><td>T3501</td><td></td></tr><tr><td>Potassium Phosphate Buffer (PPB)</td><td></td><td></td><td>Per preparare il buffer fosfato di potassio (1 M), sciogliere 98 g di fosfato di potassio monobasico e 48 g di fosfato di potassio dibasico in 1 L di acqua distillata. Regola il pH a 6. Autoclavare per 20 min a 121 &deg;C.</td></tr><tr><td>Potassium phosphate dibasic</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>795496</td><td></td></tr><tr><td>Potassium phosphate monobasic</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>529568</td><td></td></tr><tr><td>Rocker (nutating mixer)</td><td>Corning LSE</td><td>6720</td><td></td></tr><tr><td>Serological pipettes, 25 mL&nbsp;</td><td>Corning</td><td>4489</td><td></td></tr><tr><td>Serological pipettes, 5 mL&nbsp;</td><td>Celltreat</td><td>229235</td><td></td></tr><tr><td>Shaking incubator Infors Multitron</td><td>INFORS HT</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Sodium chloride</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9888</td><td></td></tr><tr><td>Sodium hydroxide solution, 5 N</td><td>Fisher Scientific</td><td>&nbsp;SS256-500</td><td></td></tr><tr><td>Sodium hypochlorite, 5%</td><td>LabDepot</td><td>LC246302</td><td></td></tr><tr><td>Sodium phosphate dibasic</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9763</td><td></td></tr><tr><td>Sorvall ST1 Plus Centrifuge</td><td>Thermo Scientific</td><td>75016030</td><td></td></tr><tr><td>Stir plate</td><td>&nbsp;ONilab</td><td>ONi28-S</td><td></td></tr><tr><td>Syringe filters</td><td>Semmerfeld</td><td>JQP033022QE1</td><td></td></tr><tr><td>Water bath</td><td>FOUR E's Scientific</td><td>WB401</td><td></td></tr></tbody></table>

quantificazione del tasso di letalità embrionale in caenorhabditis elegans

Quantifying Embryonic Lethality Rate in Caenorhabditis elegans

Quantificazione del tasso di letalità embrionale in Caenorhabditis elegans

Embryonic lethality is a cornerstone phenotype used in Caenorhabditis elegans research to characterize developmental defects arising from factors such as ...

Our research focuses on measuring embryonic lethality in Caenorhabditis elegans and determining how strongly a perturbation affects development. This protocol can be applied to assess embryonic lethality caused by genetic mutations, RNAi knockdowns, drug treatment, nutritional supplementation, or environmental perturbations.To begin, gather the required reagents. Prepare 1 liter of nematode growth medium or NGM in a 2-liter bottle. Allow the medium to cool to 55 degrees Celsius in a water bath. After placing the bottle on a stir plate, aseptically add the required reagents. Pour approximately 25 milliliters of medium into each 100-milliliter plate. Inoculate 200 milliliters of LB medium with a single E. coli OP50 colony using a sterile inoculation loop. Place the flask on an orbital shaker at 200 revolutions per minute, and incubate overnight at 37 degrees Celsius. Transfer the E. coli OP50 culture into autoclaved centrifuge bottles. After centrifugation, resuspend the bacterial pellet in 1/20th of the original volume. Seed each 100-millimeter NGM plate with one to 1.5 milliliters of the concentrated culture, and incubate overnight at room temperature to allow the bacteria to grow.

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Impara a quantificare la letalità embrionale in Caenorhabditis elegans con un saggio a basso costo e senza attrezzature specializzate. Questo metodo accessibile misura difetti dello sviluppo causati da fattori genetici o ambientali.

Quantificazione del tasso di letalità embrionale in Caenorhabditis elegans

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