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	<li>Vogel, J. W. et al. Spread of pathological tau proteins through communicating neurons in human Alzheimer&#8217;s disease. Nat Commun 11, 2612 (2020).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Accutase</td><td>Thermo Scientific</td><td>A1110501</td><td></td></tr><tr><td>Conical Sterile Polypropylene Centrifuge Tubes</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-565-268</td><td></td></tr><tr><td>Corning Matrigel Growth Factor Reduced (GFR) Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free, LDEV-free</td><td>Corning</td><td>356231</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12, HEPES</td><td>Thermo Scientific</td><td>11330057</td><td></td></tr><tr><td>Doxyciclina</td><td>Clontech</td><td>631311</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Thermo Scientific</td><td>14-190-250</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX</td><td>Thermo Scientific</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Software di grafica</td><td>GraphPad Prism (o simile)</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Human GM-CSF</td><td>Thermo Scientific</td><td>300-03</td><td></td></tr><tr><td>KnockOut DMEM</td><td>Thermo Scientific</td><td>10829018</td><td></td></tr><tr><td>Lettore di piastre luminescente</td><td>SpectraMax i3x (o simile) - Molecular Devices</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Microcentrifuge Tubes</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-682-002</td><td></td></tr><tr><td>Microplate, 96 Well, PS, Half-area, White</td><td>Greiner</td><td>675075</td><td></td></tr><tr><td>mTeSR Plus</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>100-0276</td><td></td></tr><tr><td>Nano-Glo HiBiT Lytic Detection System</td><td>Promega</td><td>N3030</td><td></td></tr><tr><td>Poly-L-Lysine hydrobromide&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>ICN15017750</td><td></td></tr><tr><td>Recombinant Human IL-34</td><td>Thermo Scientific</td><td>200-34</td><td></td></tr><tr><td>Recombinant Human M-CSF</td><td>Thermo Scientific</td><td>300-25</td><td></td></tr><tr><td>Recombinant Human TGF-&beta;1</td><td>Thermo Scientific</td><td>100-21C</td><td></td></tr><tr><td>Surface Treated Sterile Tissue Culture Plates</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB012927</td><td></td></tr><tr><td>Proteina Tau-HiBiT</td><td>In house</td><td>n/a</td><td>Proteina Tau con un tag peptidico VSGWRLFKKIS</td></tr><tr><td>Trypsin Inhibitor</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T9128</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA</td><td>Thermo Scientific</td><td>5-200-072</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632 dihydrochloride</td><td>Bio-techne</td><td>1254</td><td></td></tr></tbody></table>

un saggio di complementazione con luciferasi divisa per la misurazione temporalmente risolta della clearance dei tau nella microglia

A Split-Luciferase Complementation Assay for Temporally Resolved Measurement of Tau Clearance in Microglia

Un saggio di complementazione con luciferasi divisa per la misurazione temporalmente risolta della clearance dei tau nella microglia

As the resident immune cells of the central nervous system, microglia are central regulators of brain homeostasis and key mediators of neurodegenerative ...

a-split-luciferase-complementation-assay-for-temporally-resolved

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Il video mostra un test di citometria a flusso di trasferimento di energia per risonanza di fluorescenza (FRET) per rilevare l'attività di semina di aggregati proteici isolati da campioni biologici. Le cellule di mammifero che esprimono proteine reporter tau sono incubate con complessi di trasduzione dei liposomi contenenti semi di tau. Questi semi mediano l'aggregazione delle proteine reporter, portando alla generazione di un segnale positivo FRET nel citometro a flusso.

Una tecnica di citometria a flusso FRET per rilevare l'aggregazione della proteina reporter indotta da semi tau

Questo video mostra un test basato su cellule che quantifica l'assorbimento di Tau da parte della microglia murina utilizzando aggregati Tau marcati con fluorescenza sensibili al pH, analizzati tramite smistamento cellulare attivato dalla fluorescenza per una valutazione quantitativa.

Un test basato su cellule per valutare l'assorbimento della proteina tau da parte della microglia

Il trasferimento da cellula a cellula di aggregati proteici, o semi proteopatici, può essere alla base della progressione della patologia nelle malattie neurodegenerative. In questo articolo, viene descritto un nuovo test di citometria a flusso FRET che consente di rilevare in modo specifico e sensibile l'attività di semina da campioni ricombinanti o biologici.

Rilevazione sensibile di Proteopathic Semina attività con FRET Citometria a flusso

Qui, descriviamo l'installazione, software di navigazione, e l'analisi dei dati per un metodo spazialmente e temporalmente precisa misurazione toniche e fasiche cambiamenti glutammato extracellulare in vivo utilizzando matrici di microelettrodi enzimatico (MEA).

Utilizzando biosensori a base di enzimi misurare Tonic e Phasic glutammato in modelli murini di Alzheimer

Abbiamo generato con successo due saggi di substrato specifico γ-secretasi. Entrambi analisi cell-based qui presentate sono progettate per quantificare le attività enzimatiche γ-secretasi tramite l'uscita dei reporter luciferasi firefly.

Misurazione quantitativa della proteina precursore dell'amiloide γ-secretasi-mediata e la fenditura di Notch in Cell-based Luciferase Reporter Assay piattaforme

Qui descriviamo un'analisi basata sulle celle per valutare quantitativamente l'assorbimento tau da microglia con l'obiettivo di creare uno strumento in fase di sperimentazione per caratterizzare meglio i meccanismi di azione degli anticorpi anti-tau.

Cell-based test per studiare la Clearance di Tau anticorpo-mediato da Microglia

Questo protocollo descrive una procedura in cui le colture neuronali umane vengono trasmutate con costrutti lentivirali che codificano per i Tau umani. Le colture traslegate mostrano aggregati Tau e patologie associate.

Un modello in vitro per lo studio dell'aggregazione Tau utilizzando la trasduzione dei neuroni umani mediata da lentivirali

Il Tau è una proteina neuronale presente sia nel citoplasma, dove lega i microtubuli, sia nel nucleo, dove esercita funzioni non convenzionali tra cui la modulazione dei geni correlati alla malattia di Alzheimer. Qui, descriviamo un metodo per studiare la funzione del Tau nucleare escludendo eventuali interferenze provenienti da citoplasmatica Tau.

Modulazione della localizzazione subcellulare Tau come strumento per studiare l'espressione dei geni correlati alla malattia

Qui, dimostriamo come combinare la trasfezione di neuroni primari di roditori ippocampali con l'imaging confocale su cellule vive per analizzare gli effetti patologici indotti dalle proteine sul trasporto assonale e identificare percorsi meccanicistici che mediano questi effetti.

Utilizzo dell'imaging su cellule vive per misurare gli effetti delle proteine patologiche sul trasporto assonale nei neuroni primari dell'ippocampo

Questo articolo dimostra un metodo per visualizzare e quantificare la motilità della microglia e il contatto con i punti postsinaptici nella retina utilizzando la microscopia confocale a disco rotante.

Imaging dal vivo e caratterizzazione della dinamica della microglia e delle interazioni con le sinapsi nella retina murina malata

University of Massachusetts Amherst.  Descriviamo una piattaforma quantitativa sensibile e risolta nel tempo per misurare la clearance della tau extracellulare nella microglia derivata da cellule staminali pluripotenti indotte umane (iPSC) utilizzando un sistema di luminescenza basato su microplacche. Questo approccio consente una rilevazione sensibile della cinetica di degradazione della tau in formato micropozzo, consentendo un'interrogazione ad alta produttività della ges...

Un saggio di complementazione con luciferasi divisa per la misurazione temporalmente risolta della clearance dei tau nella microglia

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