Name: Saggi semplici e accessibili per la schiusa delle uova in Caenorhabditis elegans: formati adattabili per lo screening farmacologico (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-07-03T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 11 s
Description: Scopri saggi di schiusa delle uova in Caenorhabditis elegans per screening farmacologico e tossicologia. Questo metodo offre configurazioni flessibili per ricerca antiparassitaria e laboratori didattici.

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<table><tbody><tr><td>Bacteriological Agar</td><td>Britania&nbsp;</td><td>B0101406</td><td>dovrebbe essere preparato fresco (1,7 gr in 100 mL&nbsp;H2O)</td></tr><tr><td>Soluzione candeggina</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>1,2 % (v/v) NaOH e 0,5 M NaOH</td></tr><tr><td>Centrifugatrice</td><td>ThermoScientific.&nbsp;</td><td>Sorvall ST16R.&nbsp;&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugatrice</td><td>BiofugePICO a tubo eppendorf</td><td>Heraeus 75003235&nbsp;&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Fotocamera digitale</td><td>ToupCam&nbsp;</td><td>TP605100A</td><td>Fotocamera digitale industriale. Lunghezza focale regolabile USB 2.0</td></tr><tr><td>DMSO</td><td>BioBasic&nbsp;</td><td>RAS#7-68-5</td><td>MW: 78,13</td></tr><tr><td>Linalil Acetato&nbsp;</td><td>SIGMA</td><td>No.CAS: 115-95-7</td><td>dovrebbe essere preparato fresco</td></tr><tr><td>Terreno Lysogeny broth (LB)</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>10 g Bacto-triptone, 5 g estratto di lievito, 10 g NaCl per 1 L di acqua distillata&nbsp;</td></tr><tr><td>Buffer M9&nbsp;</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g&nbsp; NaCl, 0,25 g MgSO4 per 1 L di acqua distillata</td></tr><tr><td>Mini Rotatore &nbsp;</td><td>BioSan</td><td>Bio RS-24</td><td></td></tr><tr><td>Terreno di crescita dei nematodi (NGM)</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>3 g NaCl, 17 g agar, 2,5 g&nbsp; Bacto-Peptone per 1 L di acqua distillata. Sterilizzare tramite autoclavaggio. Supplemente 1 mL di colesterolo (5 mg/mL),&nbsp; 1 mL CaCl2 (1 M), 25 mL di tampone fosfato di potassio (1 M, pH 6,0) e 1 mL&nbsp; MgSO4 (1 M)</td></tr><tr><td>Piatto Petri (3 - 5 mm)</td><td>ThermoScientific. Nunclon DeltaSurface&nbsp;</td><td>153066</td><td></td></tr><tr><td>Piatto Petri (90 mm x 15 mm)</td><td>ExtraGene&nbsp;</td><td>1026160305</td><td>Solo per uso in laboratorio, Polistirene.&nbsp;</td></tr><tr><td>Pipetta</td><td>Fisherbrand</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>SigmaPlot 12.0</td><td>Systat Software</td><td>N/A</td><td>Versione 12.0</td></tr><tr><td>Stereomicroscopio</td><td>ARCANO</td><td>ZTX-T 1:4 LED</td><td>Stereomicroscopio trinoccolare (ingrandimento totale 10x&ndash;40x; illuminazione LED incidente e trasmessa)</td></tr><tr><td>Saccarosio&nbsp;</td><td>Laboratorio Cicarelli&nbsp;</td><td>Art 841</td><td>60 % (v/v) saccarosio&nbsp;</td></tr><tr><td>Piatto di coltura cellulare 96 pozzetti&nbsp;</td><td>Biofil&nbsp;</td><td>TCP 012096</td><td>Polistirene, Coperchio a bassa evaporazione.&nbsp;</td></tr><tr><td>ToupView&nbsp;</td><td>ToupTek Photonics</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Transcinnamaldeide (TCA)</td><td>Santa Cruz Biotechnology&nbsp;</td><td>J1712</td><td>Dovrebbe essere preparato fresco</td></tr></tbody></table>

saggi semplici e accessibili per la schiusa delle uova in caenorhabditis elegans: formati adattabili per lo screening farmacologico

Simple and Accessible Egg-Hatching Assays in Caenorhabditis elegans: Adaptable Formats for Drug Screening

Saggi semplici e accessibili per la schiusa delle uova in Caenorhabditis elegans: formati adattabili per lo screening farmacologico

Egg-hatching assays (EHA) are widely used to evaluate the effects of chemical compounds on early developmental stages of nematodes, particularly in ...

Sviluppiamo saggi semplici e scalabili di schiusa delle uova di C. elegans per valutare gli effetti dei composti sullo sviluppo embrionale. I metodi esistenti non dispongono di un flusso di lavoro standardizzato e adattabile. Questo protocollo fornisce un approccio standardizzato e scalabile, adatto sia allo screening a bassa che ad alta produttività.Iniziare con tre a cinque piastre di terreno di coltura per nematodi contenenti colture confluenti di adulti gravidi. Selezionare piastre contenenti un elevato numero di vermi gravidi e uova visibili, indicativi di una riproduzione attiva. Aggiungere acqua distillata a ciascuna piastra e trasferire delicatamente i vermi in un tubo conico da 15 millilitri. Evitare di raschiare la superficie dell'agar per minimizzare i detriti. Centrifugare a 266 g per tre minuti per formare il pellet dei vermi, rimuovere il soprannatante contenente i batteri e ripetere il lavaggio per tre volte. Per isolare le uova, risospendere il pellet di vermi in una soluzione di sbiancante appena preparata. Agitare vigorosamente il tubo per favorire la rottura dei corpi degli adulti e il rilascio delle uova. Non superare i cinque minuti di incubazione. Verificare a

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Fonte: Anderson, Q. L. et al. Un patosistema C . elegans ad alto rendimento, ad alto contenuto e a base liquida. J. Vis. Exp. (2018)Questo video mostra un metodo di screening ad alto rendimento che utilizza Caenorhabditis elegans per studiare i knockdown genici durante le interazioni ospite-patogeno. Descrive la procedura per preparare i vermi knockdown e trasferirli su piastre di saggio per valutare gli effetti dell'uccisione dei vermi indotta da agenti patogeni.

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Utilizzo di Caenorhabditis elegans per lo screening delle interazioni chaperone tessuto-specifiche

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Questo protocollo fornisce una procedura semplice e a basso costo per quantificare il tasso di letalità embrionale in Caenorhabditis elegans. Consente una semplice rilevazione di anomalie embrionali tra le popolazioni senza attrezzature specializzate o competenze nel picking di vermi. Il protocollo può essere utilizzato per quantificare gli effetti delle mutazioni genetiche, delle eliminazioni genetiche mediate dall'interferenza dell'RNA e della dieta.

Quantificazione del tasso di letalità embrionale in Caenorhabditis elegans

Scopri saggi di schiusa delle uova in Caenorhabditis elegans per screening farmacologico e tossicologia. Questo metodo offre configurazioni flessibili per ricerca antiparassitaria e laboratori didattici.

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