Name: Morris Water Maze Esperimento (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-09-24T00:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 45 s
Description: Impara a condurre il Morris water maze per valutare l'apprendimento spaziale e la memoria nei roditori. Questo metodo neuroscientifico permette di studiare la funzione dell'ippocampo in vivo.

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Impostazione del labirinto d&#39;acqua <ol><li> Il componente principale del labirinto acqua dovrebbe essere istituita una piscina rotonda, di circa 6 metri di diametro e circa 3 metri di profondità. Se si sta registrando l&#39;attività con una videocamera, assicurarsi che tutti i lati del labirinto sono all&#39;interno del campo della telecamera di vista. </li><li> Riempire il labirinto d&#39;acqua con acqua di rubinetto, che dovrebbe essere vicino ai 26 ° C. Questo può richiedere diverse ore, così dovrebbe essere fatto con largo anticipo. Controllare periodicamente la temperatura dell&#39;acqua in modo che sia all&#39;interno di un grado di 26 ° C. </li><li> Posizionare la piattaforma di fuga nel centro della piscina. Durante l&#39;addestramento, deve essere esposto, un pollice sopra l&#39;acqua. Questo insegna il topo che c&#39;è una piattaforma, e che è la via per uscire dall&#39;acqua. Più tardi, dopo che l&#39;animale è addestrato e pronto per i test, la piattaforma di fuga sarà appena sotto la superficie dell&#39;acqua, e non sarà visibile perché l&#39;acqua sarà reso opaco con latte o vernice atossica. Ora, il labirinto acqua è pronta per l&#39;addestramento degli animali. </li></ol> Pre-formazione per il labirinto d&#39;acqua <ol><li> Per la formazione labirinto d&#39;acqua, la piattaforma dovrebbe essere al centro della piscina e esposto un pollice sopra la superficie, così l&#39;animale sa che è lì. L&#39;acqua deve essere all&#39;interno di un grado di 26 ° C. </li><li> Ogni animale sarà sottoposto tre prove consecutive. In primo luogo, posto l&#39;animale sulla piattaforma per venti secondi. </li><li> Il labirinto di acqua ha 4 posizioni di partenza: nord, sud, est o ovest. Prendere l&#39;animale a una di queste posizioni. Abbassare l&#39;animale in acqua sostenendo con la mano e portarla dolcemente in acqua coda per primo. Non lo stress l&#39;animale da inzuppare nel primo capo. </li><li> Lasciate che il nuoto animale / ricerca per la piattaforma per un massimo di 60 secondi. In un primo momento, l&#39;animale può nuotare intorno al bordo della piscina alla ricerca di una via d&#39;uscita. Alla fine, l&#39;animale imparerà a cercare per la piattaforma e salite. </li><li> Una volta che il roditore raggiunge la piattaforma, arrestare il timer, e registrare il tempo. Se non trova la piattaforma in 60 secondi, quindi registrare il tempo per questa prova come un minuto. Non raccogliere l&#39;animale se non riesce a raggiungere la piattaforma. Insegnare l&#39;animale che deve nuotare fino alla piattaforma. Pertanto, dolcemente guidare l&#39;animale alla piattaforma con la mano. Lasciate che l&#39;animale sedersi sulla piattaforma per 15 secondi. Se cade o salta fuori, delicatamente guida posteriore. Questo treno l&#39;animale che deve stare sulla piattaforma di essere salvati dalla piscina. </li><li> Ripetete la stessa procedura per due sperimentazioni di più, a partire da una direzione diversa per ogni prova. </li><li> Una volta che l&#39;animale ha portato a termine tutte e tre le prove, asciugarlo con un panno. Ripetere i tre processo istruttorio di formazione per tutti gli animali consecutivamente. Tenere le indicazioni lo stesso per tutti, e registrare i loro tempi. </li><li> Ora che gli animali sono addestrati, sono pronti per eseguire il test del labirinto d&#39;acqua. </li></ol> Acqua labirinto test <ol><li> Per iniziare a prove sperimentali del labirinto d&#39;acqua, riempire il serbatoio in modo che la piattaforma è un pollice sotto la superficie dell&#39;acqua. Uso non-grassa del latte secco, o 125 millilitri di vernice atossica tempera bianca, per rendere l&#39;acqua opaca. </li><li> La temperatura di illuminazione e acqua dovrebbe essere lo stesso nel processo di formazione. Ogni animale sarà oggetto di 12 studi, che saranno 3 prove per ogni direzione di partenza. Ogni prova avrà una durata di 60 secondi. Prima di iniziare, scegliere l&#39;ordine delle direzioni di partenza. Non usare la stessa direzione iniziare due volte di fila, e anche non ripetere lo stesso ordine per una qualsiasi delle direzioni </li><li> Di fronte al muro della piscina, il gestore animale posto l&#39;animale in acqua, e poi un passo indietro dalla piscina e sedersi in un posto designato, mentre l&#39;animale esegue il compito labirinto. Un sistema di monitoraggio del comportamento animale, come il sistema SMART (San Diego Instruments) può essere utilizzato per monitorare il percorso, così come altre variabili. Videoregistrazioni ogni prova è una meno costosa, e perfettamente adeguato, alternative. </li><li> Monitorare l&#39;animale fino a raggiungere la piattaforma, e registrare il tempo impiegato. Se l&#39;animale non raggiunge la piattaforma in 60 secondi, il conduttore lo guida alla piattaforma, come in allenamento. In entrambi i casi, lasciare l&#39;animale sedere per 10 secondi, e poi asciugare fuori e rispedire l&#39;animale in una gabbia in mano. </li><li> Continuare con ogni animale per tutti i 12 studi, con il gestore animale tornare allo stesso punto designato nel corso di ogni prova. L&#39;ordine di test dovrebbe essere: prova 1 per tutti gli animali, prova 2 per tutti gli animali, prova 3 per tutti gli animali, ecc Ci dovrebbe essere un inter-trial intervallo di almeno 2 minuti. Periodicamente, pulire la piscina, assicurarsi che la piattaforma è a posto, e verificare che la temperatura dell&#39;acqua è lo stesso. </li><li> Dopo tutti gli animali hanno completato 12 studi, ciascuno di essi effettuare una prova della sonda, in which la piattaforma viene rimosso dal pool. Il processo sonda viene eseguita per verificare la comprensione degli animali del luogo piattaforma, e osservare la strategia che segue l&#39;animale quando scopre la piattaforma non c&#39;è. Il gestore rilascerà l&#39;animale a partire da nord. Registrare il numero di volte che l&#39;animale attraversa il centro della piscina durante i 30 secondi. </li><li> Quando tutte le prove della sonda sono completi, asciugare gli animali e di scarico in piscina. </li></ol>

<ol><li>de Bruin, J. P., Swinkels, W. A., de Brabander, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Response+learning+of+rats+in+a+Morris+water+maze%3A+involvement+of+the+medial+prefrontal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Response learning of rats in a Morris water maze: involvement of the medial prefrontal cortex.</a> Behav. Brain Res. 85, 47-55 (1997).</li>
<li>Redish, A. D., Touretzky, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+hippocampus+in+solving+the+Morris+water+maze%5BTitle%5D)+AND+%22Neural.+Comput%22%5BJournal%5D)">The role of the hippocampus in solving the Morris water maze.</a> Neural. Comput. 1, 73-111 (1998).</li>
<li>D'Hooge, R., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+Morris+water+maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res.+Rev%22%5BJournal%5D)">Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory.</a> Brain Res. Rev. 36, 60-90 (2001).</li>
<li>Kallai, J., Makany, T., Karadi, K., Jacobs, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+orientation+strategies+in+Morris-type+virtual+water+task+for+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Spatial orientation strategies in Morris-type virtual water task for humans.</a> Behav. Brain Res. 159, 187-196 (2005).</li>
<li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> J. Neurosci. Methods. 11, 47-60 (1984).</li>
<li>Brandeis, R., Brandys, Y., Yehuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+Morris+Water+Maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of the Morris Water Maze in the study of learning and memory.</a> Int. J. Neurosci. 48, 26-69 (1989).</li>
<li>Kesner, R. P., Exans, R. B., Hunt, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+evidence+in+support+of+the+neurobiological+bases+of+an+attribute+model+of+memory%3A+role+of+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Further evidence in support of the neurobiological bases of an attribute model of memory: role of the hippocampus.</a> Int. J. Neurosci. 21-22, 21-22 (1987-8).</li>
<li>Jarrard, L. E., Okaichi, H., Steward, O., Goldschmidt, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+role+of+hippocampal+connections+in+the+performance+of+place+and+cue+tasks%3A+comparisons+with+damage+to+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">On the role of hippocampal connections in the performance of place and cue tasks: comparisons with damage to the hippocampus.</a> Behav. Neurosci. 98, 946-954 (1984).</li>
<li>Hodges, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maze+procedures%3A+the+radial-arm+and+water+maze+compared%5BTitle%5D)+AND+%22Cogn.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Maze procedures: the radial-arm and water maze compared.</a> Cogn. Brain Res. 3, 167-181 (1996).</li>
<li>Shumake, J., Gonzalez-Lima, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+systems+underlying+susceptibility+to+helplessness+and+depression%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Cogn.+Neurosci.+Rev%22%5BJournal%5D)">Brain systems underlying susceptibility to helplessness and depression.</a> Behav. Cogn. Neurosci. Rev. 2, 198-221 (2003).</li>
<li>Owen, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+the+menstrual+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Clin.+Nutr%22%5BJournal%5D)">Physiology of the menstrual cycle.</a> Am. J. Clin. Nutr. 28, 333-338 (1975).</li>
<li>Everett, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiology+of+reproduction+in+the+female+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Monogr.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Neurobiology of reproduction in the female rat.</a> Monogr. Endocrinol. 32, 1-133 (1989).</li>
<li>Warren, S. G., Humphreys, A. G., Juraska, J. M., Greenough, W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LTP+varies+across+the+estrous+cycle%3A+enhanced+synaptic+plasticity+in+proestrus+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">LTP varies across the estrous cycle: enhanced synaptic plasticity in proestrus rats.</a> Brain Res. 703, 26-30 (1995).</li>
<li>Warren, S. G., Juraska, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+and+nonspatial+learning+across+the+rat+estrous+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Spatial and nonspatial learning across the rat estrous cycle.</a> Behav. Neurosci. 111, 259-266 (1997).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da dichiarare.

Il compito labirinto acqua era di sviluppo da Morris 5. Questo compito può essere modificato in molti modi di indagare la memoria di lavoro, la memoria di riferimento e la strategia compito 6. La procedura descritta qui contiene due variabili critiche che rappresentano una deviazione da altre versioni del labirinto acqua: pretraining, e test in un solo giorno. Pretraining - l&#39;ippocampo è coinvolto nella memoria spaziale / relazionale 7-8. Il labirinto di acqua in particolare <sup...

<table><tbody><tr><td>Sistema SMART</td><td>San Diego Instruments</td><td></td><td></td><td>Questo sistema non è obbligatorio &amp;#8211; esistono molti altri sistemi comportamentali disponibili sul mercato.</td></tr></tbody></table>

morris water maze esperimento

Morris Water Maze Experiment

Il labirinto ad acqua di Morris è ampiamente usato per studiare la memoria spaziale e di apprendimento. Gli animali sono posti in una pozza di acqua che è colorato opaco con polvere senza grassi del latte o vernice atossica tempera, dove devono nuotare ad una piattaforma fuga nascosto. Perché sono in acqua opaca, gli animali non possono vedere la piattaforma, e non può contare su profumo per trovare la via di fuga. Al contrario, devono contare su esterni / extra-labirinto spunti. Come gli animali diventano più familiari con il compito, sono in grado di trovare la piattaforma più rapidamente. Sviluppato da Richard G. Morris nel 1984, questo paradigma è diventato uno dei &quot;gold standard&quot; delle neuroscienze comportamentali.

Il labirinto ad acqua di Morris è un ben accettato strumento utilizzato per documentare il coinvolgimento dell&#39;ippocampo in un compito comportamentale.

Morris Water Maze Esperimento

Il labirinto acquatico di Morris è ampiamente utilizzato per studiare l'apprendimento e la memoria spaziale. Gli animali vengono posti in una piscina d'acqua resa opaca con polvere di ...

Nel labirinto acquatico di Morris, gli animali vengono posizionati in vasche piene d'acqua in cui devono nuotare verso una piattaforma di fuga. Durante l'addestramento, la piattaforma può essere lasciata esposta circa un pollice sopra il livello dell'acqua. L'animale deve imparare a nuotare fino alla piattaforma e rimanervi per essere tratto in salvo dalla vasca.Dopo che l'animale è stato addestrato, l'acqua viene aumentata e resa opaca con latte o vernice non tossica. In questo modo la piattaforma viene nascosta. L'animale deve quindi fare affidamento sulla memoria per trovare la piattaforma di fuga.Ciao, mi chiamo Joseph Nunez. Sono un docente del programma di neuroscienze alla Michigan State University. Oggi illustrerò il Morris Water Maze.Vi mostrerò come allestire il labirinto acquatico, come addestrare gli animali e come sottoporli al test. Ok, cominciamo. Il componente principale dell'allestimento del labirinto acquatico deve essere una piscina circolare, con un diametro di circa sei piedi e una profondità di circa tre piedi.Se si sta registrando l'esperimento con una videocamera, assicurarsi che tutti i lati del labirinto siano all'interno del campo visivo della telecamera. Riempire il labirinto acquatico con acqua del rubinetto, che dovrebbe essere vicina a 26 gradi Celsius. Questa operazione potrebbe richiedere diverse ore, pertanto va eseguita con largo anticipo.Controllare periodicamente la temperatura dell'acqua in modo che sia entro un grado più o meno rispetto a 26 gradi Celsius. Posizionare la piattaforma di fuga al centro della vasca. Durante l'addestramento, può essere lasciata esposta circa 2,5 cm sopra il livello dell'acqua.Questo insegna al ratto. C'è una piattaforma, ed è il modo per uscire dall'acqua. Ora siamo pronti per iniziare l'addestramento degli animali nel labirinto acquatico.Il labirinto acquatico ha quattro posizioni di partenza: nord, sud, est o ovest. Portare l'animale in una di queste posizioni. Immergere l'animale in acqua sorreggendolo con la mano e abbassarlo delicatamente in acqua partendo dalla parte della coda.Prima di tutto, non stressare l'animale immergendogli la testa in acqua. Lasciare che l'animale nuoti liberamente per un massimo di 60 secondi. Inizialmente, l'animale potrebbe nuotare lungo i bordi della vasca cercando un modo per uscire.Alla fine, l'animale raggiungerà una piattaforma e vi salirà. Una volta che il roditore ha raggiunto la piattaforma, fermare il cronometro e registrare il tempo. Se non trova la piattaforma entro 60 secondi, registrare comunque il tempo per la prova.Come un minuto. Non prendere in mano l'animale. Se non riesce a raggiungere la piattaforma, insegnagli che deve nuotare fino alla piattaforma.Guidare in modo piuttosto delicato l'animale verso la piattaforma con la mano. Lasciare l'animale seduto per 15 secondi. Se cade o salta giù, guidarlo nuovamente con delicatezza.Questo insegnerà all'animale che deve rimanere sulla piattaforma per essere salvato dalla piscina. Ripetere la stessa procedura per altri due tentativi, iniziando ogni volta da una posizione diversa. Una volta completati tutti e tre i tentativi, asciugare l'animale con un asciugamano.Ripetere il processo di allenamento per tre volte per tutti gli animali. Mantenere la stessa direzione per tutti e registrare i loro tempi. Ora che gli animali sono stati addestrati, sono pronti per eseguire il test del labirinto acquatico.Per iniziare le prove sperimentali con l'acqua Mae, completare il riempimento del serbatoio in modo che la piattaforma si trovi circa un pollice sotto la superficie dell'acqua. Utilizzare latte in polvere scremato o tempera bianca non tossica per rendere l'acqua opaca.L'illuminazione e la temperatura dell'acqua devono essere le stesse del processo di addestramento. Ogni animale esegue 12 prove, tre per ciascuna direzione di partenza. Ogni prova dura 60 secondi.Prima di iniziare. Scegliere l'ordine delle direzioni iniziali. Non utilizzare le stesse direzioni iniziali due volte consecutive e non ripetere lo stesso ordine per nessuna delle direzioni.Seguire l'animale finché non raggiunge una piattaforma e registrare il tempo impiegato. Se l'animale non raggiunge la piattaforma entro 60 secondi, l'operatore lo guiderà sulla piattaforma come durante l'addestramento. In ogni caso, lasciare l'animale seduto per 10 secondi, quindi asciugarlo.Proseguire con ogni animale per tutte e 12 le prove, facendo tornare l'addetto agli animali nello stesso punto designato. Durante ogni prova, pulire direttamente la vasca, assicurarsi che la piattaforma sia al suo posto e verificare che la temperatura dell'acqua sia costante. È possibile utilizzare un sistema software intelligente di tracciamento video per rilevare e analizzare il comportamento durante le prove sperimentali. Questo è tutto.Vi mostrerò come addestrare gli animali e come sottoporli al test. Si tratta di un paradigma comportamentale molto consolidato. Buona fortuna con gli esperimenti.

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