光合成

概念インストラクター準備学生プロトコル
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  1. 植物色素クロマトグラフィー
    • 注:この実験では、クロマトグラフィーペーパーを使用してほうれん草の葉から顔料を分離します。個々の顔料は、紙上を異なる速度で移動し、色も異なる場合があります。顔料の移動距離とその解像度係数を計算し、それらを文献値と比較することで、さまざまな顔料を特定できます。 仮説:この演習では、実験的な仮説は、ほうれん草の葉の中に複数の色素があり、異なる波長の太陽光を吸収するというものです。帰無仮説は、ほうれん草の葉には1種類の色素しか存在しないというものです。
    • 鉛筆を使用して、クロマトグラフィーペーパーの一方の端から2センチメートルの線を引きます。
    • 次に、きれいな400mLビーカーの上部にパイプクリーナーを水平に置きます。
    • 鉛筆でマークされた側をビーカーの下部に置きます。
    • 次に、下端がビーカーの底にかろうじて触れるように紙をパイプクリーナーに巻き付けてから、ペーパークリップで固定します。
    • 紙がパイプクリーナーの周りに固定されたら、ビーカーから紙を取り出し、クロマトグラフィー紙のマークされた線の上に軽くたたいて乾いたほうれん草の葉を置きます。
    • 鉛筆の線に沿ってほうれん草の葉の上にコインを転がし、何度も前後に動かし、一定の圧力をかけます。葉を取り除くと、緑色の線がはっきりと見えるはずです。
    • 次に、ビーカーに8mLのクロマトグラフィー溶媒を入れます。
    • クロマトグラフィーストリップをビーカーに下げて、紙の端が溶媒に触れ、緑の線が触れないようにします。必要に応じてパイプクリーナーを調整します。 必要に応じてパイプクリーナーを調整します。
    • ビーカーを乱さずに、溶剤が紙の上に移動し、個々の顔料が分離するのを観察してください。
    • 溶媒がクロマトグラフィー紙の半分まで移動し、約10分かかります。また、顔料が明確に定義されたバンドに分離したら、ビーカーから紙を取り出します。
    • 鉛筆で溶媒がどれだけ移動したかをマークし、紙を乾かします。注:溶剤はすぐに蒸発します。
    • 次に、表示されているバンドの数を記録し、それらの色と相対的なサイズを記述します。
    • 溶媒と顔料がどれだけ移動したかを測定し、各顔料のこの情報を表1に記録します。 ここをクリックして表1をダウンロードしてください
    • クロマトグラフィー溶媒をヒュームフードの下の廃棄物容器に廃棄します。クロマトグラフィーストリップを通常のゴミ箱に捨ててから、ビーカーを石鹸と水できれいにします。
  2. 真空中の浮遊葉ディスク
    • 注:この実験では、溶液中の浮遊葉円盤を使用して間接的に光合成と細胞呼吸を観察します。光合成の際には気泡で葉が浮き、呼吸時には円盤が沈んでしまいます。仮説:この演習では、実験的な仮説は、重炭酸塩が光合成を燃料とするCO2を追加し、より多くの葉の円盤を浮かせるため、葉の円盤が重炭酸塩溶液中での光合成の速度が高くなるというものです。さらに、すべての椎間板は、細胞呼吸を行うため、暗い場所で沈みます。帰無仮説は、重炭酸塩と水、または明暗処理の間で、光合成の速度、したがって浮遊円板の数に違いはないというものです。
    • 葉ディスクを真空下に置くには、まず2つの20mL注射器からプランジャーを取り外し、次に各注射管内に10枚の葉ディスクを配置します。1つのシリンジに「重炭酸塩」のラベルを付け、もう1つのシリンジに「水」のラベルを付けます。
    • プランジャーを交換し、シリンジに少量の空気が残るまでプランジャーを押します。リーフディスクを傷つけないように注意してください。
    • 5mLの重炭酸塩溶液を注射器の1つに引き込みます。シリンジを反転させて渦巻かせ、リーフディスクを溶液中に懸濁します。
    • 溶液を排出したり、葉のディスクを傷つけたりすることなく、できるだけ多くの空気を押し出してください。
    • 次に、5 mLの水溶液をもう一方のシリンジに引き込み、前述のように渦巻きます(ステップ3)。
    • 真空を作成するには、シリンジの先端に指を1本押しながらプランジャーを引きます。これを10秒間保持しながらシリンジを回し、リーフディスクを懸濁状態に保ちます。
    • 次に、真空を解除します。 注:ディスクは溶液を組織の空気空間に吸収し、沈むのが見えるはずです。ディスクが沈まない場合は、バキュームの作成を最大3回繰り返すことができます。
    • 次に、プラスチックカップまたはガラスビーカーに50mLの重炭酸塩溶液を加え、重炭酸塩真空注射器からディスクを静かに加えます。
    • コントロールのために、同じカップに同量の水を追加し、次に水真空シリンジから葉ディスクを追加します。コンテナに適切なラベルを付けます。
    • 両方のカップを光源の下に置きます。
    • 5分ごとに、カップの表面に浮かんでいるディスクの数を表3に記録し、20分が経過します。 ここをクリックして表3をダウンロードしてください
    • 次に、光源からカップを取り外し、それらを渦巻かせて、表面のディスクが表面のガスとも混ざるようにします。
    • カップを暗い場所に移動します。5分ごとに、20分が経過するまで表面に浮かんでいる葉の円盤の数を記録します。カップを毎回回してから、暗闇に戻します。
    • 片付けるには、葉の円盤をゴミ箱に捨て、重炭酸塩溶液を排水口に注ぎます。シリンジとカップをよく洗います。
  3. 結果
    • 注:最初の実験では、ほうれん草の葉からの顔料がクロマトグラフィー紙上でどれだけ遠くまで移動するかを観察しました。顔料が異なれば、吸収する波長も異なります。
    • 色ペンまたは鉛筆を使用して、図3に顔料バンドと溶剤の位置を描きます。
    • 顔料の保持率、またはRf値を計算します。これは、問題の顔料がラインから紙を上に移動した距離を、溶剤がラインから紙を上に移動した距離で割ることによって行われます。
    • 計算されたRf値を表2の値と比較して、顔料の同一性を判断してください。表2をダウンロードするにはここをクリックしてください
    • これらのデータを表1に記録します。注:2番目の実験では、光合成と呼吸の間接的な測定として、浮遊および沈む葉の円盤を観察しました。
    • x軸に時間と分、y軸にフローティングディスクの数で結果をグラフ化します。2つの異なる線を使用して、水制御と重炭酸塩処理を表します。
    • グラフに線を追加して、ディスクが明るい状態から取り除かれ、暗闇に置かれたポイントを示します。
    • 次に、重炭酸塩の状態から始めて、グラフを使用して、葉の円盤の50%が浮いていたポイントを決定します。これは、有効時間 (ET50) と呼ばれます。 注:ディスクは、明るい状態で一度、次に暗い状態で再び50%のフローティングマークに達する可能性が高いことに気付くでしょう。
    • あなたの水サンプルはET50マークに達しているかもしれませんし、そうでないかもしれません。その場合は、このサンプルの行も追加します。
    • 最後に、ET50の値とグラフをクラスの他の部分と比較します。

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