SDSページ

ドデシル硫酸ナトリウム-ポリアクリルアミドゲル電気泳動またはSDS-PAGEは、タンパク質の混合物をそのサイズに基づいて分離する分子量ベースの技術です。

ここでは、サンプルタンパク質をβ-メルカプトエタノールとSDSで処理します。

β-メルカプトエタノールは、ジスルフィド結合を切断する還元剤です。

SDSは負に帯電した界面活性剤で、疎水性領域に結合してタンパク質を解き放ち、変性させ、均一な負電荷を付加します。

次に、サンプルを架橋アクリルアミドモノマーからなるポリアクリルアミドゲルにロードします。

上部のスタッキングゲルは、アクリルアミド濃度が低いため、大きな細孔を持っています。

電圧印加では、タンパク質サンプルはコインのように積み重ねられ、同時に低分解能ゲルに入ります。

分離ゲルは、アクリルアミド濃度が高いため、細孔が小さくなっています。これはモレキュラーシーブとして機能し、小さなタンパク質がより速く実行できるようにし、したがってタンパク質をそのサイズに基づいて分離します。

これらの分離されたタンパク質バンドは、通常、クマシーブルー染色を使用して視覚化されます。各バンドの分子量は、参照マーカータンパク質を使用して決定できます。