二次元ゲル電気泳動

二次元ゲル電気泳動は、タンパク質分離のために2つの次元を組み合わせます:最初は電荷に基づく、次に質量に基づく。

最初の次元は、等電点電気泳動またはIEFの方法を使用します。 ここでは、タンパク質サンプルを固定化したpHグラジエントまたはIPGストリップにロードします。

電流を印加すると、タンパク質はストリップ上のpH勾配を横切って移動し、等電点(タンパク質が正味電荷を持たないpH)で固定化します。

次に、IPGストリップをSDSで処理し、ポリアクリルアミドゲルにロードして、SDS-PAGEを使用して2次元で分離します。

IEFに垂直な方向では、タンパク質は質量に基づいて電気泳動で分離します。

その後、分離されたタンパク質は染色後に可視化されます。

二次元ゲル電気泳動は、荷電アミノ酸残基が1つでも異なる類似タンパク質を同定できる高分解能技術です。

さらに、さまざまな条件や発生段階で、細胞やオルガネラ内のタンパク質修飾を検出することができます。