酵素免疫測定法

酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)は、抗体、ペプチド、糖タンパク質、ホルモン、ウイルスなどの分析物の検出と定量に幅広い用途を持つ標識免疫測定法です。

抗原または標的分子に結合する検出抗体は、特定の酵素と結合しており、基質を添加すると測定可能なシグナルが生成されます。

キャプチャと検出の方法に応じて、ELISAには大きく分けて4つのタイプがあります。

Direct ELISAは、プレート上にコーティングされたサンプル抗原を検出するために、酵素標識一次抗体を使用します。

一方、間接ELISAの場合、付着した抗原はサンプルの一次抗体を捕捉し、標識された二次抗体が結合します。

サンドイッチELISAには2つの抗体が含まれ、1つはサンプル抗原を捕捉するためにプレートにコーティングされ、もう1つは酵素標識抗体がサンドイッチを形成する特定の抗原-エピトープに結合します。

競合ELISAでは、抗原と一次抗体を事前にインキュベートし、同じ抗原でコーティングされたプレートに添加します。

サンプル抗原濃度が高いほど、より多くの抗原-抗体複合体が形成され、プレートから競合する抗原に結合する遊離抗体が少なくなるため、シグナルが弱くなります。