免疫細胞化学および免疫組織化学

免疫細胞化学(ICC)および免疫組織化学(IHC)は、酵素結合抗体を使用して培養細胞または組織切片中の特定のタンパク質または抗原を可視化および定量する染色技術です。

ICCでは、標的細胞の単層をガラスカバーガラス上に増殖させます。細胞を架橋剤で固定して抗原の酵素分解を防ぎ、界面活性剤で処理して細胞膜を透過性にします。

IHCでは、組織全体が固定され、パラフィンのブロックに埋め込まれます。次に、サンプルを薄いスライスに切片化し、スライド上に配置できます。最後に、パラフィンを除去して抗原を回収します。

抗原がサンプル内でアクセス可能になると、西洋ワサビペルオキシダーゼなどの標識酵素に結合した標的特異的な一次抗体に結合します。

この酵素は、DAB染色物の茶色の沈殿物への酸化を触媒し、目的のタンパク質の可視化を可能にします。

検出されたシグナルが弱い場合は、標識酵素を含む二次抗体を使用して、標的タンパク質上の非標識一次抗体に結合し、さらにシグナルを増幅します。