全反射蛍光顕微鏡

全反射蛍光顕微鏡(TIRF)は、ガラスカバーガラスのような屈折率の高い固体表面に近いサンプル中の蛍光分子を選択的にイメージングします。

励起レーザービームは臨界角度でカバーガラスに当たるため、ビームは全反射します。

反射光はサンプルに入らず、狭い電磁場またはエバネッセント波を生成し、細胞表面から100〜200ナノメートル以内の蛍光色素のみを照らします。

エバネッセント波はサンプルの奥に進むにつれて急速に減衰するため、ほとんどのバックグラウンド蛍光色素は励起されません。そのため、固体表面付近の少数の蛍光色素タグ付きタンパク質の画像が鮮明で鮮明になります。

TIRFは、カバーガラスに付着した微小管上のキネシンなどのモータータンパク質の動きを研究するなど、生細胞イメージングに日常的に使用されています。