ヨナのカニの口胃神経系（STNS）（ C.ボレアリス）電気生理学、免疫組織化学、および細胞培養の研究にも使用できます。グロスと細かい解剖：STNSの抽出は、2つの部分で行われます。
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この記事について
サマリー
要約
それはよく特徴付けされているセルの数が比較的少ない（約25℃のborealisの）が含まれているため、口と胃の神経節（STG）は、携帯電話とネットワークの相互作用を研究するための優れたモデルです。 STGのセルは、出力の広い範囲を示し、胃の運動行動する責任があります。胃は3つの内歯と食べ物、そしてそれが中腸に到達する前に食べ物をフィルタリングする幽門を分解する胃工場が含まれています。 STGは、胃の工場と中枢パターン発生器（CPGは）として知られている幽門を制御する2つのリズミカルな出力を生成します。 STG内の各セルは、これらのリズムのいずれかまたは両方に参加することができます。これらのCPGはは、神経調節の研究、恒常性、携帯電話とネットワークの可変性、ネットワークの開発、およびネットワークの復旧を可能にする。
グロスと細かい解剖、ヨナのカニ（ がんのborealis）から口胃神経系の解剖（STNSは）2つの部分に分けて行われます。総解剖では胃全体はカニから解剖される。細かい解剖中にSTNSは、解剖顕微鏡と顕微解剖ツール（図1参照）を使用して胃から抽出されます。 STNSはSTG、食道神経節（OG）、および交連神経節（COG）と同様に胃の筋肉を支配する神経が含まれています。ここで、我々は細胞外記録用に使用されるSTGの細胞は細胞内および末梢神経から記録される電気生理学的実験の準備のためSTNSの完全な解剖を実行する方法を示します。目的の神経を見つけるための適切な手法がsomaの複数形と神経網を明らかにするために神経節をdesheathingの私たちの手法としてだけでなく、示されています。
プロトコル
1。総解剖
- 動物の鈍い感覚と運動システムへの30分間氷上でカニを置きます。氷と一緒にすべての側面にそれを囲む。カニを取り扱う際には手袋を着用してください。
- 解剖のパンと、使用するツールをレイアウトすることで総解剖の準備。 Rongeurs、骨切りはさみ、小さなはさみ、歯鉗子、テーパーエッジとヘラ、ブラックSylgard -コーティングディッシュ、そして虫ピンが必要です。
- ピンチからそれを防止し、解剖のパンに配置すると後肢による氷のバケツからカニを削除します。
- それぞれが内側にねじれて最初の爪を外します。その後、同じねじれ運動を使用して、各脚を取り外します。
- rongeursを使用して、口を覆う上顎を削除します。また、ソフトmaxilluleを削除します。
- 再びrongeursを使用して、甲の外側後端から開始し、それの端に正しい握り方をする。 rongeursで取り締まると甲羅のその部分を折る。ヘラは、開口部を入力できるように十分な甲羅のを削除してください。反対側の目とリピートして甲羅の端まで削除を続けます。
- ヘラのテーパーのサイドで、静かに背甲の屋根から柔らかい内側の組織を削る。 STNSの損傷を防ぐために、甲羅に接触してへらをしてください。組織から分離されている甲の部分を脱却するためrongeursを使用してください。また、甲羅に組織を接続する任意の内転筋を分離するために確実に腹甲羅から軟組織の一....
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ディスカッション
STNS郭清は、電気生理学や免疫組織化学の実験を行う際に、または細胞培養用細胞を得るための第一歩です。に関係なく、意図した実験の、総解剖は変更されません。しかし、微細な解剖は異なる場合があります。先にあなたから録音する細胞とその神経の時間の計画を立てることが重要です。 STGのほとんどのニューロンは、胃内の少なくとも1つの筋肉を支配するプロセスを持っている（図2参照）とそれらの神経支配をターゲットに分類しております。従って、細胞外記録は完全に細胞内で録音されているセルの身元を確認する必要があります。幽門リズムの周波数と堅牢性は、準備の状態を監視するために使用されます。したがって、多くの実験はLVNから細胞外記録が含まれています。 DGNは、一般的に胃のリズムを監視するために使用されます。そこに多くの調節性細胞がSTNSの前端にあり、その神経を切断すると、幽門と胃のリズムが不規則に停止するかになる可能性があるため、STNは多くの場合、ほとんどの実験に不可欠です。
細かい解剖の手順が実行される順序は重要でなくても.......
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謝辞
我々は感謝マーダーラボのメンバーを認識する。私たちは、彼女の支援と激励のために、私達の顧問、博士イヴマーダーに感謝。この研究は、国立神経疾患研究所およびストローク助成NS - 17813とNS - 058110によってサポートされていました。
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材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント | |
|---|---|---|---|---|
| ブラック Sylgard 170 | その他 | Dow Corning | 170 | 粗解剖 |
| 精密剪刀 | 手術 | Fine Science Tools | 14090-09 | |
| 昆虫ピン サイズ 6 | 手術 | Fine Science Tools | 26000-65 | |
| メイヨー剪刀 | 手術 | Fine Science Tools | 14110-17 | |
| マイクロスパチュラ | 手術 | WARD’s Natural Science | 15 V 4313 | |
| ロンジュール | 手術 | Fine Science Tools | 16000-14 | |
| 組織ピンセット | 手術 | Fine Science Tools | 11021-12 | |
| 精密タングステン線 (直径 0.001 in.) | 手術 | California Fine Wire Company | 精密解剖 | |
| ピンセット #5 | 手術 | Fine Science Tools | 91150-20 | |
| ミニュテンピン | 手術 | Fine Science Tools | 26002-10 | |
| Moria スプリング剪刀 (刃長 7mm) | 手術 | Fine Science Tools | 15370-52 | |
| シャーレ (100x15mm) | その他 | Fisher Scientific | 08-757-12 | |
| ピンホルダー | 手術 | Fine Science Tools | 26018-17 | |
| 超精密ピンセット #5SF | 手術 | Fine Science Tools | 11252-00 | |
| Sylgard 182 | その他 | Dow Corning | 182 | |
| タングステン針 | 手術 | Fine Science Tools | 10130-05 | |
| 解剖顕微鏡 | 顕微鏡 | Wild | MC3 | その他 |
| ズワイガニ (C. borealis) | 動物 | 商業用ロブスター業者 |
参考文献
- Harris-Warrick, R. M., Marder, E., Selverston, A. I., Moulins, M. Dynamic Biological Networks: The stomatogastric nervous system. , MIT Press. Boston. (1992).
- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs.<....
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再版と許可
