気管切開：肺へ幹細胞の移植方法

術前

1. レシピエントマウスとドナー細胞
2. テープや縫合糸でプラットフォームを操作する
3. 1ccの注射器
4. 23Gの針
5. 麻酔薬：AVERTIN 25 mg / mlの（あるいはケタミン9 mg / mlのとxylazin 1 mg / ml）を
6. ＃40ブレードとバリカン
7. 無菌手袋
8. アルコール綿棒
9. ヨウ素
10. 滅菌手術器具
11. 縫合糸
12. 22Gカテーテル
13. 200μlのピペット（滅菌）
14. 滅菌ピペットチップ
15. 抗生物質接着剤の軟膏
16. シャーピーコンテナ

手術

無菌技術は、このプロシージャ全体で使用されています。

1. マウスの重量を量る。
2. 腹腔内麻酔薬の注射（250 mg / kgのAVERTINあるいはケタミン90 mg / kgとキシラジンに10 mg / kg）自発呼吸を可能にするために十分な用量で、しかし、外科的濃度の麻酔を提供しています。手術のためにつま先のピンチが麻酔をかけた動物からの応答がないとの深い痛みの指標として使用されて開始する。
3. 安定させるために縫合糸とテープの尾に隠れて歯でマウスを置きます。
4. ＃40クリッパーの刃を使用して、クリップの髪。
5. 変更の手袋（滅菌手袋を続ける）。
6. 皮膚切開の前にアルコールで二回消毒する。
7. iodophoreで領域を滅菌する。
8. 滅菌器具を使用すると、気管に平行に小さな切開を（<1cm）を行います。
9. 軟骨から慎重に独立した組織。
10. ネクタイは、気管の下に挿入されます。
11. ゆっくりと上向きにネクタイを上げると露出気管に針を挿入する。
12. 針を外して、わずかな抵抗を感じるまで、急速にまだ、スムーズにチューブを挿入します。
13. 直接カテーテルピペットの細胞（最大50マイクロリットル体積）。
14. すぐにチューブを削除し、演算装置から解放マウスながらネクタイ。
15. 必要に応じてそっと彼の前部足をしがみついてで（垂直）直立マウスを押したまま、ゆっくりと移動する。
16. one縫合糸または抗生物質の接着剤で傷口を閉じてください。

術後

1. マウス、冷えないように保管してください。
2. ブプレノルフィン（0.05 mg / kgの）最初の24時間、12時間ごとにこの手順の後、術後の鎮痛として与える必要があります。