キイロショウジョウバエ卵巣解離:ex vivo組織調製の技術

要約

出典:Parker, D. J., et al. ショウジョウバエ卵巣のミトコンドリア構造と機能の研究。J. Vis. Exp.(2017年)。

このビデオでは、ショウジョウバエの卵巣の一般的な解剖学を説明し、ライブイメージングまたは固定イメージングのために卵巣を解剖する方法を紹介しています。

プロトコル

このプロトコルは、Parker et al., Studying Mitochondrial Structure and Function in Drosophila Ovaries, J. Vis. Exp. (2017)からの抜粋です。

1. ショウジョウバエの準備 (必要なツールは図1Aに示されています)

1. 記載されている実験のいずれについても、卵封入後5日以内にショウジョウバエ(室温または25°Cに維持)を採取し、5〜7 mLのショウジョウバエ食品(材料表を参照)を入れたバイアルに入れ、各バイアルに25匹以下のハエを入れ、雌雄比を2:1に維持します。
2. 少量の粒状酵母を振りかけて、ショウジョウバエの卵の生産を刺激します。2〜4日以内に実験操作を行います。

2. ショウジョウバエの卵巣の解剖(必要なツールは図1 A)に示されています)

1. 昆虫解剖培地(材料表

結果

図1:実験計画と準備。(A)記載されている方法で使用されるツール:A.フライバイアル;B.昆虫解剖媒体;C.パラホルムアルデヒド;D.フライブラシ;E.皿を解剖する;F.カバーガラス;G.マイクロフュージチューブ。H.ガラス底の皿。I.スライドガラス;J. 1,000-μL マイクロピペット;K. 200μL マイクロピペット;L. 2.5 μL マイクロピペット;M.先端が曲がったからかい針(先端が拡大されています)。N.厚い鉗子;O.細い鉗子。(B)記載されている方法を表すフローチャートの概略図。この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
Grace's Media(昆虫解剖媒体)	フィッシャーサイエンティフィック	30611031から2
41パラホルムアルデヒドAQ	電子顕微鏡科学	50*259*99
ポリリジン	MPバイオメディカル	ICN15017625
フライバイアル	フィッシャーサイエンティフィック	AS-515
フライバイアルプラグ	フィッシャーサイエンティフィック	AS273
Jazzmixショウジョウバエ食品(ショウジョウバエ食品)	フィッシャーサイエンティフィック	AS153
Azer Scientific EverMark Select 顕微鏡スライド	フィッシャーサイエンティフィック	〒22-026-252
顕微鏡カバーガラス	フィッシャーサイエンティフィック	12-542-B
マットテックコープガラスボトムミルクロウェルディッシュ	フィッシャーサイエンティフィック	P35G-0-14-Cの
活性乾燥酵母	フィッシャーサイエンティフィック	ICN10140001
デュモン #5 鉗子	ファインサイエンステクノロジー	11251から20
モリアニッケルメッキピンホルダー	ファインサイエンステクノロジー	26016-12
微細なピン	ファインサイエンステクノロジー	26002-15
MYFP ( w[*];P{w[+mC]=sqh-EYFP-水戸}3 )	ブルーミントンストックセンター	7194
フライパッド	ハエのもの	59〜118
吹き矢	ハエのもの	54から104
吹き矢針	ハエのもの	54〜119
解剖顕微鏡	カールツァイス	ステミ 2000

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