方法論記事

ショウジョウバエ卵の収集とデコレーション:最も外側の卵層を取り除く方法

2023年4月30日

この記事について

要約

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出典:Koyle, M. L., et al. Racing the Fruit Fly Drosophila melanogaster Under Axenic and Gnotobiotic conditions.J. Vis. Exp.(2016年)。

ショウジョウバエの胚は保護用の外膜に囲まれています。胚にアクセスするために、膜の最も外側である絨毛膜がしばしば除去されます。このビデオでは、次亜塩素酸ナトリウムを使用したデコレーションの一般的に使用される方法について説明します。この例のプロトコルは、無菌またはgnotobiotic動物の飼育に必要な無菌技術を使用しながら、手順を示しています。

プロトコル

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

このプロトコルは、Koyle et al., Rearing the Fruit Fly Drosophila melanogaster Under Axenic and Gnotobiotic Conditions, J. Vis. Exp. からの抜粋です。(2016年)。

1. 産卵ケージの準備

  1. 100 mlの水、10 gのビール酵母、10 gのブドウ糖、および1gの寒天を電子レンジで加熱して、ブドウジュース寒天プレートを作成します。ステップ1.1で3回沸騰させ、冷凍ブドウ濃縮液10gを加えて、寒天プレート上の卵の視認性を高めます。
  2. 寒天が55°Cに冷えたら、20 mlを100 mmのシャーレに注ぎ、固化させます。
  3. 寒天プレートの表面をイーストペーストで覆い、1gのビール酵母と15gの水を混ぜます。寒天プレートにイーストペーストを注ぎ、表面が覆われていることを確認してから、余分なものを注ぎ取り、薄いイーストの残留物を残します。複数のプレートを使用する場合は、ペーストを複数のプレートに順次注ぐことができます。
  4. 寒天プレートをケージの底に移します.
    注:32オンスのデリコンテナは、アクリルフライケージの良い代替品です。
    1. 上部に穴を開け、その穴....

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
ビール酵母MPバイオメディカルズ、LLC。903312http://www.mpbio.com/product.php?pid=02903312
グルコースシグマ・アルドリッチ158968-3キロhttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/158968?lang=en®ion=US
寒天フィッシャー--ラボサイエンティフィックフライ802010https://www.fishersci.com/shop/products/drosophila-agar-8-100mesh-10kg/nc9349177
ウェルチの100%グレープジュースコンセントレートウォルマートまたはその他の食料品店9116196http://www.walmart.com/ip/Welch-s-Frozen-100-Grape-Juice-Concentrate-11.5-oz/10804406
ケージ:32オンス半透明ラウンドデリコンテナウェブスタウラントストア999L5032Yhttp://www.webstaurantstore.com/newspring-delitainer-sd5032y-32-oz-translucent-round-deli-container-24-pack/999L5032Y.html
半透明の丸いデリコンテナの蓋ウェブスタウラントストア999YNL500http://www.webstaurantstore.com/newspring-delitainer-ynl500-translucent-round-deli-container-lid-60-pack/999YNL500.html
ストックボトルジェネシー・サイエンティフィック32〜130https://geneseesci.com/shop-online/product-details/?product=32-130
ショウソプラグジェネシー・サイエンティフィック49から101https://geneseesci.com/shop-online/product-details/?product=49-101
ナイロンメッシュジェネシー・サイエンティフィック57〜102https://geneseesci.com/shop-online/product-details/715/?product=57-102
プラスチックブッシングホームデポ100404002http://www.homedepot.com/p/Carlon-1-in-Non-Metallic-Terminal-Adapter-E943FR-CTN/100404002
プラスチックブッシングキャップホームデポ100153897http://www.homedepot.com/p/1-1-4- 硬質プラスチック絶縁ブッシング-2パック-27529/100153897
試料カップMedSupplyパートナーK01-207067http://www.medsupplypartners.com/covidien-specimen-containers.html
リピーターM4エッペンドルフ4982000322https://online-shop.eppendorf.us/US-en/Manual-Liquid-Handling-44563/Dispensers--Burettes-44566/Repeater-M4-PF-44619.html
50ml遠心分離管TrueLine遠心分離管TR2003https://www.lpsinc.com/Catalog4.asp?catalog_nu=TR2003
フードボックスUSAサイエンティフィック〒2316-5001http://www.usascientific.com/search.aspx?find=2316-5001
ライジングマトリックスDバルクMPバイオメディカルズ、LLC。116540434http://www.mpbio.com/search.php?q=6540-434&s=Search
フィルターピペットチップ、300 μlUSAサイエンティフィック〒1120-9810http://www.usascientific.com/search.aspx?find=1120-9810
ペトリ皿ラボラトリー製品販売M089303https://www.lpsinc.com/Catalog4.asp?catalog_nu=M089303
エタノール株式会社デコンラボラトリーズ2701http://www.deconlabs.com/products.php?ID=88
絵筆ウォルマート5133http://www.walmart.com/ip/Chenille-Kraft-5133-Acrylic-Handled-Brush-Set-Assorted-Sizes-colors-8-Brushes-set/41446005
鉗子漁夫08-882https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-medium-pointed-forceps-3/p-128693
家庭用漂白剤(6-8%次亜塩素酸塩)ウォルマート550646751http://www.walmart.com/ip/Clorox-Concentrated-Regular-Bleach-121-fl-oz/21618295
ユニバーサルペプトンジェネシー・サイエンティフィック20〜260https://geneseesci.com/shop-online/product-details/?product=20-260
酵母エキス フィッシャーサイエンティフィックBP1422-500https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-bioreagents-microbiology-media-additives-yeast-extract-3/bp1422500?matchedCatNo=BP1422500
リン酸二カリウムシグマ・アルドリッチP3786-1KGhttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/
クエン酸アンモニウムシグマ・アルドリッチ25102-500グラムhttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/
酢酸ナトリウムVWRの97061から994https://us.vwr.com/store/catalog/product.jsp?catalog_number=97061-994
硫酸マグネシウムフィッシャーサイエンティフィックM63-500https://www.fishersci.com/shop/products/magnesium-sulfate-heptahydrate-crystalline-certified-acs-fisher-chemical-3/m63500?matchedCatNo=M63500
硫酸マンガンシグマ・アルドリッチ10034-96-5http://www.sigmaaldrich.com/catalog/
MRSパウダーシグマ・アルドリッチ69966から500Ghttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/69966?lang=en®ion=US
96ウェルプレートリーダーBioTek(エポック)NAのhttp://www.biotek.com/products/microplate_detection/
1.7ml遠心分離チューブUSAサイエンティフィック1615-5500http://www.usascientific.com/search.aspx?find=1615-5500
フィルターピペットチップ、1,000 μlUSAサイエンティフィック1122-1830http://www.usascientific.com/search.aspx?find=1122-1830
96ウェルプレートグライナーバイオワン655101https://shop.gbo.com/en/usa/articles/
セラミックビーズMPバイオメディカルズ、LLC。〒6540-434http://www.mpbio.com/product.php?pid=116540434
ティッシュホモジナイザーMPバイオメディカルズ、LLC。116004500http://www.mpbio.com/product.php?pid=116004500
クラス1バイオセーフティキャビネットサーモサイエンティフィックモデル1395http://www.thermoscientific.com/en/product/1300-series-class-ii-type-a2-biological-safety-cabinet-packages.html
名 名 の 年

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