このプロトコルは、Koyleらの抜粋です。『Rearing the Fruit Fly Drosophila melanogaster Under Axenic and Gnotobiotic Conditions』、J. Vis. Exp.(2016年)。
1. 卵子のデコリオネートと無菌食への移行
- バイオセーフティキャビネットは、内部(側面を含む)に70%エタノールを噴霧して準備します。底面を実験用ティッシュで拭き、フードをUVライトで~15分間滅菌します。すべての非生物学的供給品(試料カップ、絵筆、鉗子、廃棄物容器、400mlの滅菌水、および100mlの0.6%次亜塩素酸ナトリウム)をエタノールを噴霧して滅菌し、すぐにバイオセーフティキャビネットに入れます。UVライトで15分間滅菌します。
- 2回の次亜塩素酸ナトリウム洗浄のうちの最初の洗浄を開始するには、卵と一緒にブッシングを120mlの試料カップまたは他の滅菌容器に入れます。0.6% 次亜塩素酸ナトリウム溶液を ~90 ml をブッシングにゆっくりと注ぎ、縁のすぐ下まで注ぎます。
- 卵を2.5分間すすぎ、鉗子を使用して次亜塩素酸溶液中でブッシュを上下に動かすことにより、卵を定期的に再懸濁します。
- ブッシングを、バイオセーフティキャビネット内の90 ml漂白剤をあらかじめ充填した2つ目の....