触覚馴応アッセイ:C.エレガンスにおける非連想学習の研究方法

要約

出典:Mersha, M. D., et al.低用量毒物への胚曝露の長期的な行動および生殖への影響。J. Vis. Exp.(2018年)。

このビデオでは、C. elegansが機械感覚を評価し、慣れまでの時間を定量化する行動法であるタッチアフォーチュエーションアッセイを紹介しています。

プロトコル

次のプロトコルは、Mersha et al. からの抜粋です。Long-term Behavioral and Reproductive Consequences of Embryonic Exposure to Low-dose Toxicants, J. Vis. Exp. (低用量毒物への胚曝露の長期行動的および生殖的影響), J. Vis. Exp.(2018年)

1. 前方接触慣れアッセイ
   1. 約10匹の同期した若成虫を、火で滅菌した30 Gプラチナワイヤーピックを使用して、新しい播種されていないNGMプレートに移します。ワームを5分間邪魔せずに放置し、新しいプレートに順応する時間を確保します。
   2. 慣れ反応は、木の串や爪楊枝の先に眉毛を付け、70%エタノールを浸して除菌します。糸くずの出ない清潔なティッシュで拭き取り、エタノールが蒸発するまで1分間待ちます。眉毛を使って頭(咽頭球の前方)のワームにそっと触れます。ワームが回復するのを待つために、タッチの間に10秒の間隔を空けて、タッチを繰り返します。
   3. ワームが後方に動かなくなるまで、触れ続けます(10秒のインタースティミュラスインターバルを許可します)。この時点で、ワームは刺激に慣れています。ワームが慣れるのに必要なタッチ数+ber
   を記録します。
   4. 治療されたコントロールと未治療のコントロールの平均慣れ率の差を、一元配置分散分析とそれに続くテューキーの事後検定を使用して分析します。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
EtOH	シグマ・アルドリッチ	64-17-5
N2(野生型C.エレガンス)ワーム	CGCの		ミネソタ大学のリポジトリ
プラチナワイヤーピック	ジェネシー・サイエンティフィック	59-AWPの
ペトリプレート	漁夫	07-202-011
解剖顕微鏡	アムスコープ	SM-2タイ