生物発光を用いたマウスモデルにおける尿路感染症の可視化

Abstract

出典: Luyts, N. ほか。 マウスにおける尿路感染症の縦断的追跡調査およびマウスにおける治療法。 J. Vis. Exp.(2021年)。

このビデオは、膀胱に注入した発光 性大腸菌 をマウスモデルで誘導し、細菌の付着、侵入、細胞内複製を誘導・追跡する方法を示しています。生物発光オペロンから放出される光は、感染進行中の細菌負荷のリアルタイムのマーカーとして機能します。

Protocol

動物モデルを含むすべての手技は、地域の施設動物管理委員会およびJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. 動物への予防接種

1. 動物の調理
   1. 研究課題やノックアウトラインの入手可能性、実験の詳細、UTI感受性の違いに応じて、望ましいマウス株を選択します。メスのマウスでは経尿道カテーテル挿入が比較的容易であることを覚えておいてください。8週未満の動物は免疫学的に未成熟であるため使用しないでください。ここでは、12週齢の雌のC57Bl/6Jマウスを使用しました。
   2. 動物は十分に前もって注文し、理想的には7日間慣れさせてください。グループ動物は個別に換気されたケージで、標準的な12時間の明暗条件下で飼育します。
   3. 動物の腹部を剃り、信号の喪失を抑えましょう。脱毛クリームは動物の皮膚をすぐに焼く可能性があるため、使用しないでください。利き手で剃りながら、利き手でない手で首根と後ろ肢をしっかり押さえて動物を拘束します。あるいは、イソフルラン麻酔下で剃る方法もあります。
      注: 動物は画像検査の2日前に剃られ、剃られた部分をさらにグルーミングする予定です。
   4. 実験中は水と通常の食事を 自由に 提供してください。ただし、膀胱容量を減らすために、挿入の2時間前からは動物に水分を与えないようにしてください。
   5. 滅菌された24Gの....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
麻酔用ヴェポライザー	ハーバード・アパラタス・リミテッド	該当なし	https://www.harvardapparatus.com/harvard-apparatus-anesthetic-vaporizers.html
ベイトリル 100 mg/mL	バイエル	該当なし	エンロフロキサシン
BD Insyte Autoguard 24 GA	BD	382912	黄色い血管カテーテル、挿入には滅菌プラスチックの先端を使います
C57Bl/6Jマウス	ジャンヴィエ	該当なし
遠心分離機5804R	エッペンドルフ	EP022628146
ドロップセンス16	アンチェインド研究所	トリニー	外径600nmを測定するために
ダルベッコのリン酸塩緩衝塩水、Gibco	サーモフィッシャー・サイエンティフィック	参考文献 14040-083
エタノール70%変性5L	VWRインターナショナル	85825360
Falcon 14ml 丸底ポリスチレンチューブ、スナップキャップ	コーニング	352057
Falcon 50ml cellstart	グライナー	227285
ハミルトンガスタイトシリンジ、PTFEルアーロック、100μL	シグマ・オルドリッチ	26203	50μLの細菌注入を遅くするために
接種ループ	ロス	6174.1	ホルダー:アート。番号6189.1
Iso-Vet 1000mg/g	デクラ獣医製品	該当なし	イソフルラン
IVISスペクトラムIn vivoイメージングシステム	パーキンエルマー	参考124262	イメージング装置