マウスにおける細菌性リポ多糖の腹膜内注射による全身免疫反応の研究

要約

出典: Radulovic, K. ほか 腸のバリア突破後に微生物由来産物の進入を模倣するためにマウスにリポポリサカリドを注射すること。 J. Vis. Exp.(2018年)

このビデオでは、マウスにリポ多糖(LPS)を腹腔内注射して全身炎症を誘発する段階的な手順を示します。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手技は、地域の施設動物管理委員会およびJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. マウスへのリポ多糖(LPS)腹腔内注射
   1. LPSの作動溶液を0.5mLのシリンジで30Gの針で層流中に吸引します。
   2. 生後6〜10週の雌のC57Bl/6マウスを体重測定し、注入されるLPSの量を計算します:体重10μL(2μg)/g。
      注: 例えば、マウスの重さが20 gの場合、20 g x 10 μL = 200 μL LPSの作動溶液を注入する必要があります。
   3. ネズミを優しく、しかししっかりと扱い、片手で拘束してください。動物が正常に呼吸できるようにしつつ、拘束中に体をひねったり体をひねったりしないようにしてください。
   4. 注射のために腹部を露出させるために、マウスの鼻を少し床に傾けます。腹部の正中ラインと注射場所を、正中線から左または右の下腹部に位置付けます。対照マウスにLPSの代わりに腹腔内(ip)リン酸緩衝生理食塩水(PBS)を注射します。
   5. 自由な手で、適切な体積(ステップ1.2で計算されたLPS作動溶液)を注入します。針が腹膜腔に入っていることを確認してください。そうでないと、腹部筋層への誤注射が起こり得ます。ただし、腹膜腔に針を深く刺さないように注意してください。その部位にある内臓を傷つけないように注意してください。
   6. 動物をケージに戻し、ケージにつき最大5匹のネズミを配置してください。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
LPS 大腸菌 O111:B4	Invivogen、カリフォルニア州サンディエゴ、アメリカ合衆国。	TLRL-EBLPS
オムニカン50 使い捨てインスリン注射器	B. ブラウン・メルスンゲン、ドイツ・メルスンゲン	9151125