宿主-病原体相互作用研究のための溶血性 黄色ブドウ球 菌培養の準備

この記事について

要約

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このビデオでは、溶血性 黄色ブドウ球 菌培養を調製し、細菌の増殖を標準化し、宿主と病原体の相互作用研究のための代謝同期を達成する方法を示しています。

プロトコル

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細菌接種物の調製
1. 凍結グリセロールストックからの血液寒天培地で分離に注目されるストリーク ブドウ球菌株 。赤血球(RBC)を溶解し透明なゾーンを形成する能力から溶血表現型を37°Cで16〜24時間インキュベートします。
2. 各株の単一コロニーを、滅菌ガラス管内のトリプティック大豆ブロス(TSB)4mLに接種して一晩培養を開始します。チューブローラーを約70°角、毎分70回転(RPM)で設定し、37°Cで16〜24時間回転させます。
3. 分光光度計を使って、ステップ2.1.2の培養物の600 nm(外₆₀₀)での光学密度を測定します。滅菌培地を光学基準として使用してください(ブランク)。これらの細胞を、25mLの無菌トリプティック大豆ブロス(TSB)で_OD600 に希釈し、別々の125mLのDeLongフラスコ(フラスコ対体積比5:1)に置き、培養物を280 RPMで振って37°Cにセットして培養液を培養します。
  注: 接種物の増殖はさまざまな方法で行うことができます。細胞を指数位相に増殖させる方法の一つを紹介します。いずれにせよ、接種のために細胞を準備する際には一貫して同じ方法を使うことが重要です。

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材料

この記事で使用された材料の一覧

名前

会社

カタログ番号

羊の血5%

ハーディ・ダイアグノスティクス(カリフォルニア州サンタマリア)

A10

軌道揺れ水浴

ニューブランズウィック・イノーバ

トリプティック大豆ブロス

VWR

90000-376

紫外線可視分光光度計

ベックマン・クールター-DU350

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宿主-病原体相互作用研究のための溶血性黄色ブドウ球菌培養の準備