方法論記事

マイコバクテリウム・ブスペサスに感染したゼブラフィッシュ胚における宿主-病原体相互作用のライブ画像化

2026年1月30日

この記事について

要約

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出典: Bernut, A.ら。ゼブラフィッシュ胚における マイコバクテリア・アブスペル の病因解析および解析。 J. Vis. Exp. (2015年)

このビデオでは、蛍光マクロファージを発現し、蛍光性 のマイコバクテリウム・ブスペサス 菌の粗株に感染したトランスジェニックゼブラフィッシュ胚を用いて、宿主と病原体の相互作用を可視化するプロトコルを示しています。細胞外コードが免疫回避を可能にし、細菌の生存と宿主細胞の損傷を促進することを明らかにしています。

プロトコル

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. M. abscessus感染のライブ画像

  1. エピ蛍光顕微鏡観察前に、1%の低融点アガロースに35mmペトリ皿に置いたトリカイン麻酔胚をマウント。逆さま焦点顕微鏡にはガラス底盤、直立共焦点顕微鏡にはシングルキャビティ凹みスライドを使いましょう。胚を所定の位置に向き合わせ、固まったアガロースをトリカインを含む魚の水で覆います。
  2. 10倍対物レンズを持つエピ蛍光顕微鏡を用いて、胚全体の逐次蛍光取得と透過画像を撮影します。あるいは、40Xまたは63X対物レンズの共焦点顕微鏡を用いて、感染後の免疫細胞の活動を観察する方法もあります。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
低融点アガロースシグマ・オルドリッチ  
エチル3-アミノベンゾエートメタンスルホン酸塩(トリカイン)シグマ・オルドリッチA5040 

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Fluorescent MacrophagesFluorescence MicroscopyConfocal MicroscopyBacterial CordingImmune EvasionTransgenic Zebrafish

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