マウスの尾からのゲノムDNAの単離

プロトコル

1. テールピース（3mm）及びマークの耳をカット。
2. 720 メートルリットルSTEおよび30 M LプロテイナーゼK（10 mg / mlストック）を追加します。
3. 55℃でインキュベート加熱ブロックとボルテックス10秒最高速度で3時間毎正時C。
4. ℃で5分間70℃プロテイナーゼKを不活性化する。
5. 氷上で5分間急冷する。
6. フルスピードで10分間尾DNAを遠心します。
7. 720 メートルリットルイソプロパノールを含む新しいチューブにデカント。  
8. チューブを反転させたり、ボルテックスでDNAを沈殿させる。
9. フルスピードで5分間、DNAをスピンダウン。 上清を取り除く。
10. 70％エタノールでペレットを洗浄します。
11. フルスピードでゲノムDNA 5分間スピンダウン。 上清を取り除く。
12. DNAは1〜2分間乾燥することができます。
13. ペレットのサイズに応じて100〜200 メートルのlで再懸濁し、DNA。
14. 55位のチューブ℃で1時間DNAの溶解を容易にする。  

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
STE	バッファー			100 mm Tris; pH 8.5 /5 mM EDTA /0.2% SDS /200 mM NaCl / in H2O
TE	バッファー			100 mM Tris; pH 5.0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl