方法論記事

慢性実験における実装電極やマイクロダイアリシスプローブ用光重合型歯科用接着性レジンの応用

DOI：

10.3791/249

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2007年7月30日

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1Laboratory for Behavior and Dynamic Cognition, Brain Science Institute, RIKEN, 2Laboratory for Biolinguistics, Brain Science Institute, RIKEN

この記事について

サマリー

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このレポートでは、我々は慢性実験で電極やマイクロダイアリシスプローブの取付ベース用光硬化性歯科用樹脂の新しいアプリケーションを提案する。この材料は、頭蓋骨に直接接合することができます。

要約

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慢性記録実験では、自己硬化性歯科用アクリル樹脂は、電極やマイクロダイアリシス-プローブの取付ベースとして使用されている。これらのアクリルが骨に結合しないので、ネジをアンカーとして使用されている。しかし、フィンチやマウスなどの小動物実験では、彼らのcraniumの複数形は非常に壊れやすく、成功したアンカーを保持することはできません。このレポートでは、我々は慢性実験で電極やマイクロダイアリシスプローブの取付ベース用光硬化性歯科用樹脂の新しいアプリケーションを提案する。この材料は、頭蓋骨に直接接合することができます。そのため、アンカーのネジは不要になり、手術野を大幅に削減することができます。過去の経験では、結合効果は2ヶ月以上保持することを示している。素材はしなやかと作業可能な時間の従来の樹脂の窓は数分です。しかし、これらの歯科用接着剤の作業時間のウィンドウが大幅に拡大して調整可能です。

プロトコル

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ステップ1。プローブ注入の準備

  1. 麻酔（ビデオには示されていません）

    外科麻酔の着実なレベルを生成するために腹腔内ケタミンの注射（12.5 mg / kg体重）及びキシラジン（25 mg / kg）を混合してそれぞれの鳥に麻酔。

  2. 定位フレームに頭部を固定する

    耳のバー"圧力の局所の痛みを減らすためにキシロカイン（TM）ゼリーを使用してください。鳥の頭部は耳のバーと45 °の角度で頭を保持するくちばしのホルダーで構成される定位固定装置に固定されています。移植のための定位手術中に、熱制御による外科的パッドで鳥の体を温める（温度= 34〜36 ° C）。

  3. 外科領域の消毒

    手術前にイソジン（TM）で手術野を消毒する。

ステップ2。定位位置

  1. 基準点の位置合わせ

    色素充填ピペットでラムダ（Y点）とマークY点にダミープローブを（ガラスマイクロピペット）に合わせます。最後のトレーサー試験の残りのデキストラン- TMRは、ビデオで使用されていました。

  2. 皮膚の切開

    皮膚を削除し、頭蓋の表面を露出。その後、綿棒で頭蓋の表面を清掃してください。

  3. ダミーカニューレの位置決め（水平方向）

    標的部位（AP軸と横方向の調整）にダミーカニューレを移動する
  4. 小開頭術と硬膜の切開。

    開頭術と硬膜の切開のための微細な注射針（30 G）のための微細な鉗子を使用してください。その後、頭蓋の表面を清掃してください。

  5. ダミーカニューレの最終的な位置決め（注入）

    マイクロダイアリシスプローブ意図したターゲットの地域上記の0.30ミリメートルで、ガイドカニューレの先端を見つけます。清潔で乾燥した表面はタフな接着のために必要とされているので最後に、、再び頭蓋の表面を清掃してください。

ステップ3。頭蓋表面の前処理

（歯科製品の"直接充填修復"のための同様の手順が採用されるものとする。）

  1. プライマー処理
    1. 皿にミックスPRIMARは液体Bで。
    2. 小さ ​​なブラシで頭蓋骨の表面に混合物を適用します。
    3. 30秒間おきます。
    4. 穏やかな空気の流れで乾燥させます。 （洗浄しないでください。）

  2. 接着剤のアプリケーション
    1. 小さ ​​なブラシで頭蓋骨の表面に接着剤を適用します。
    2. 穏やかな空気の流れを適用します。 （洗浄しないでください。）
    3. 20秒用光硬化。

ステップ4。コンポジットレジンの取り付け

  1. 普通の熱心な支持者を持つ樹脂をマウントします。

    平原栓をする人が利用できない場合は、マイクロスパチュラを代わりに使用できます。

  2. 光硬化
  3. 増分取り付け

    増分取付けは樹脂の完全な反応を確保することをお勧めします。

    増分取付の場合は、すべてのマウントの前に接着剤を適用する。

  4. 最終的な硬化用コンポジットレジンと光硬化性を成形。
  5. 手術の終わり

外科領域をきれいに、（ゲンタマイシン軟膏）抗生物質に適用され、定位炎から動物を取り外します。その後、熱制御室（温度= 33〜35 ° C）後の麻酔回復のために動物を保持。

ビデオに示すように、異常な動作は、手術の翌日に、動物のいずれにおいても観察されなかった。

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ディスカッション

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従来の自己硬化性アクリル樹脂のアプリケーションに比べて、導入手法にはいくつかの重要な利点があります。

1。ダイレクトボンディング：
自己硬化アクリルはしばらくの間、骨に接続することができますが、それは骨に付着していません。そのため、アンカレッジのネジが（図2a参照）取り付けベースを固定する必要があります。対照的に、光硬化樹脂は、骨に直接そのネジが必要とされない（図2B）に結合することができます。そのため、取付ベースのサイズを大幅に削減することができます。あなたがそれを"メタルプライマー"を使用した場合はさらに、光硬化樹脂はまた、ある種の金属に付着する。変数の材料への接着のこの機能は、私たちに幅広い用途が可能になります。

図2は、従来の自己硬化型アクリル樹脂（2A）と、光硬化接着性樹脂を（2B）を使用して注入を使用して注入を示しています。 2Aで、アンカーのネジは取付ベースを固定するために使用されます。 2Bでは、取付ベースのサイズは、光硬化樹脂は、頭蓋骨に付着し、そのようなネジが必要とされていないという事実のために大幅に削減することができます。

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開示事項

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実験は、動物の脳の実験科学研究所、理化学研究所（理研- BSI）と研究所の動物倫理委員会がそれらを承認するためのガイドラインに従って実施された。

謝辞

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我々は、この作業中に彼らの親切にサポートし、実り多いアドバイスに理研- BSIで私たちの仲間に感謝します。私は教授重見森、教授G BOR Juh SZ、博士に心から感謝の意を表したいと思います。 Kiyoji松山、総合研究大学院大学、日本の大学院コースの中にマイクロダイアリシス法を勉強する私に助言カタリンAK斯とRP D Dobolyi。最後に、我々は、ビデオ録画での彼らのサポートについては氏クリスSarneckyと博士林明高須に感謝。

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材料

写真1（a）は、マイクロダイアリシスプローブ（）、キャップナット（B​​）とガイドカニューレ（C）を示しています。この写真では、ガイドカニューレを直接頭蓋骨に付着する歯科用レジンに囲まれています。写真Bは、薬物灌流時の鳥を示しています。頭の上に、微細なテフロンチューブに接続されているマイクロダイアリシスプローブがあります。 Bの2 cmのスケールバー= 1 cmのそれぞれ。

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図1 -マイクロダイアリシスプローブ（A）と、薬物灌流時の鳥の写真（B）

参考文献

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  1. Adell, A., Artigas, F. In vivo Brain microdialysis: Principles and applications. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Boulton, A., Baker, G., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
  2. Kendrick, K. Microdialysis in large unrestrained animals: neuroendocrine and behavioral studies of acetylcholine, amino acid, monoamine and neuropeptide release in the sheep. Microdialysis in the Neuroscience. Robinson, T., Justice, J., Bateson, A. 7, Elsevier. Amsterdam. 327-348 (1991).
  3. Oakley, B., Schafer, R. Experimental Neurobiology: A laboratory Manual. , University of Michigan Press. Ann Arbor. (1978).
  4. Okumura, T., Yamashita, Y., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese Finch I. A Biological study. Soc. Neurosci Abst. 33, (2007).
  5. Boulton, A., Baker, G. The relation of brain electrical activity to behavior. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Robinson, T., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
  6. Yamashita, Y., Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese finch. Proceeding of the 2nd International Symposium on Mobiligence, , 101-104 (2007).

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