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方法論記事

後肢骨格筋抽出術:マウスモデルから後肢骨格筋を切除する手順

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2023年4月30日

この記事について

要約

出典:Bonetto, A. et al.癌性悪液質の研究のためのモデルとしての結腸-26癌腫瘍担持マウス。J. Vis. Exp.(2016年)

この動画では、マウスモデルから後肢骨格筋を切除する手順を説明します。切除された筋肉は、さらなる下流の分析まで低温で保存することができます。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. 組織および臓器の切除

>注:生化学的または分子生物学的アッセイで組織を使用する場合は、各臓器と組織の重量を量り、フラグメントをすぐに事前に標識したクライオチューブに入れることを計画してください。液体窒素で凍結し、-80°Cで保存します。

  1. 組織サンプルが毛皮で汚染されるのを防ぐために、全身に70%エタノールをスプレーします。
  2. マウスを解剖ベッドに仰臥位で置き、足を高いビュレットクランプに取り付けて手足を垂直に伸ばします。
  3. デュモン鉗子で下肢の皮膚をつかみ、湾曲した細いハサミで皮膚と筋膜をやさしく取り除き、下肢の下層の筋肉腹を露出させます。
  4. 後下肢の腓腹筋は、後大腿骨の外側顆と内側顆での起点と、踵骨腱を介した踵骨への挿入によって識別します。
    1. 腓腹筋腱の切断に進みます。デュモン鉗子で腓腹筋の遠位端をつかみ、筋肉の腹をその起源に向かって引っ張ります。.はさみを使用して、大腿骨にできるだけ近い起点で筋肉を切ります。筋肉を皿に入れます。すぐに計量し、液体窒素のチューブで凍結します.
      手記:腓腹筋と一緒....

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開示事項

利益相反は宣言されていません。

材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
CD2F1マウスハーラン60
麻酔器具EZ-麻酔EZ-7000
10月ティッシュテック4583
クライオスタットライカCM1850
コルクディスク電子顕微鏡科学63305
マイクロテナーBDの 365873
スーパーフロストとスライドガラスVWRの48311-703
ストレプトマイシン-ペニシリンセルグロ30-002-CIの
名 名 の

タグ

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