方法論記事

脊髄抽出:In vitro研究のためのマウス脊髄を分離するためのプロトコル

2023年4月30日

この記事について

要約

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出典:Na'ara, S. et al. 癌性神経浸潤のインビトロモデリング:背根神経節モデル。J. Vis. Exp.(2016年)

このビデオでは、in vitro研究のためにマウスモデルから脊髄を分離するための段階的なプロトコルについて説明します。

プロトコル

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動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. 脊髄の採取

  1. CO2チャンバーを使用してマウスを安楽死させます。頸椎脱臼は、せん断力により神経節根に損傷を与える可能性があるため、避けてください。ここからは、すべてのステップを無菌条件下で行ってください。
  2. 動物を70%エタノールに浸します。このステップは、滅菌や髪の毛が内臓を引きずるのを防ぐために重要です。
  3. マウスをエタノールから乾かしておきます。神経毒性によるエタノールと内臓の接触を防ぎます。
  4. マウスを乾燥させた後、ピンを使用して腹臥位(下向き)に配置します。各後肢と前肢にピンを配置します。
  5. 鉗子を使用して、後頸部から腰椎まで頭蓋尾側に伸びる正中線切開を行います。次に、鉗子を使って真皮フラップを両側に上げ、皮下組織を露出させます。
  6. 頭蓋頸部接合部に到達するまでマウスの頭蓋骨を触診します。動物に垂直なハサミを使用して、重い鉗子を使用して、頭蓋頸部接合部(7番目の頸椎)で頸部の筋肉と脊椎を切り取ります。脊椎を尾側に解剖し、重い鉗子で腰椎レベル(後肢レベル)に達するまで脊椎を切除します。
  7. 重い鉗子を使用して、腰椎レベル(5番目の腰....

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開示事項

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利益相反は宣言されていません。

材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
鉗子 シグマ・アルドリッチ F4142
外科用ブレード シグマ・アルドリッチ Z309036
鋏 シグマ・アルドリッチ S3271
35 mmシャーレ、ガラス底 デ・グルート 〒60-627860
70%エタノール シグマ
コールドPBS バイオ産業 02-023-1A

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タグ

PBS

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