妊娠初期の特性評価に基づく高周波超音波検査:妊娠中のマウスモデルにおける胚の着床と妊娠進行を研究する技術

要約

出典:Peavey, M. C. et al. マウスの妊娠初期特性評価のための三次元高周波超音波検査の新規使用。J. Vis. Exp.(2017年)

このビデオでは、妊娠マウスモデルの胚着床部位を画像化するための高周波超音波検査を実演します。このイメージング技術は、生存可能な妊娠を成功裏に検出し、マウスの妊娠初期における胚着床部位を特徴付けます。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. 妊娠中のマウスのイメージング

1. マウスを仰臥位でモニタリングプラットフォームに置きます。マウスは、ノーズコーンを介してイソフルラン麻酔薬(1.5〜2.5%)と酸素(1 L / min)を継続的に受け取ります。すべての足をプラットフォーム上の心拍数モニタリングパッドにそっとテープで固定します。
   1. 腹部に1〜2mLの超音波透過ジェルを塗布します。
2. 手動モーターステージを使用して、超音波プローブを下腹部に配置します。
   1. 膀胱の位置を確認します。膀胱は、膣口のすぐそばに液体で満たされた黒い円として表示されるはずです。
   2. 膀胱の位置が決まったら、プローブを非常にゆっくりと頭蓋骨に動かして、妊娠部位に丸い領域を持つ円筒形のように見えるはずの妊娠中の子宮を視覚化します。これは、チェーンにつながれた真珠のように見えると説明できます。
   3. 妊娠中の子宮が特定されたら、2Dイメージングを開始します。

>2. 2D超音波画像処理(図1)

1. 妊娠中の子宮が特定されたら、膀胱に最も近い妊娠部位から始めて、ゆっくりと順番にセファラドを動かして、妊娠部位の数と場所を決定します。
2. 腎臓、脾臓、または肝臓が視覚化されている場合は、ユーザーが頭蓋をしすぎたため、プローブを尾側(膀胱に近い)に再配置します。
3. 同様に、反対側の子宮角をイメージします。
4. 超音波フレームが移植/妊娠部位の中心にあるときに画像をフリーズして、後の分析や測定のために保存します
   注:画像がフリーズされ、後で分析するために保存されるまでに1秒もかかりません。
5. 高エコー脱落膜反応をマーカーとして使用して、最初に「測定」ツールを手動でクリックし、次に1つの移植部位の位置をクリックして、移植距離を測定します。次に、カーソルを次の移植部位にドラッグし、クリックして線を描き、コンピューターが自動的にその距離を報告します。その後、ソフトウェアは手動測定が何であるかを報告します。この手順はコンピュータ化されていませんが、ユーザーが脱落石されたサイト間に線を引くことにより、脱落石されたサイト間の距離をマークすることに依存しています。
6. 着床サイズ、妊娠嚢サイズ、および胎児極サイズを測定します。

結果

図 1: 移植部位の発達の高周波超音波検出と、妊娠期間中の胎児の成長のモニタリング 図 1A に示すように、5.5 d.p.c. では、より軽い高エコー性脱落膜化子宮内膜 (D) により、移植部位の数と間隔を定量化できます。図1Bに示すように、別の子宮角の脱落膜化部位(D)は子宮角(U)によって結合されています。7.5 d.p.c.までに、より暗い低エコー嚢(GS)と胎児極(F)は図1Cで容易に識別できる。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
VisualSonics Vevo 2100 超音波イメージングプラットフォーム/マシン	VisualSonics株式会社	VS-11945
Vevoイメージングステーション	VisualSonics株式会社	SA-11982
アクアソニック100超音波透過ゲル	パーカー	#SKU PLI 01-08
イソフルラン(IsoThesia)100mLボトル	ヘンリー・シェイン	#29404
PuraLuben動物眼科軟膏	デクラ	#12920060