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方法論記事

出生前マウス胚の回収:妊娠マウスから胚を採取する手順

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2025年7月8日

この記事について

要約

出典:Yun, K. メチレンブルー染料注入による尿路接合部閉塞欠陥の評価 J. Vis. Exp.(2017年)

このビデオは、妊娠中のマウスからの胚の回収を示しています。回収された周産期胚は、哺乳類の発生を研究するためのモデルシステムとして利用することができます。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. 出生前胚の解剖

  1. 70%エタノールで解剖はさみと鉗子をきれいにします。
  2. E18.5またはE19.5で周産期胚を採取するには、まず妊娠マウスをCO2吸入を用いて安楽死させ、次に倫理ガイドラインに従って子宮頸部脱臼を行う
    手記:妊娠中の雌マウスは通常、E18.5から出産しますが、腎臓が大きいほど操作が簡単です。したがって、出生に近いE19.5の腎臓は、この分析を実行しやすくなります。しかし、両側性尿路閉塞のある子犬は出生後に死亡します。実験マウスの特性に応じて、適切な採取日/時間を経験的に決定する必要があります。
  3. 腹側腹部表面に70%エタノールをスプレーし、解剖ハサミと鉗子を使用して腹側に腹腔を開きます。
  4. 子宮角の先端にある解剖ハサミで切って、子宮全体を持ち上げて体から分離します。
  5. ペトリ皿で子宮全体を1x PBSですすいでください。
  6. 解剖ハサミで子宮を分節的に切り取り、解剖鉗子で胎盤脱落膜を取り除き、卵黄嚢の胚を露出させます。
  7. 最初に卵黄嚢を切除し、次に解剖鉗子で羊膜を切除して周産期胚を放出します。

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開示事項

利益相反は宣言されていません。

材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
繊細な操作はさみロボズ手術器具株式会社RS-6702
マイクロ解剖鉗子ロボズ手術器具株式会社RS-5135
デュモンピンセット;パターン #5ロボズ手術器具株式会社RS-5045
Quality Biological Inc. ノーマル生理食塩水 - 500ML フィッシャーサイエンティフィック 50-983-204

タグ

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