レーザードップラープローブの位置決め:マウスモデルにおける血流計測のための中大脳動脈にプローブを埋め込む技術

要約

出典:Llovera, G., et al. マウスの脳卒中のモデリング:外頸動脈を介した一過性中大脳動脈閉塞。(2021年)。

このビデオでは、レーザードップラープローブをマウスの脳の中大脳動脈(MCA)に固定する外科的処置について説明しています。このプローブは、動脈内の赤血球の動きによって引き起こされるドップラーシフトを測定することにより、脳の微小血管系の血流を測定するのに役立ちます。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. レーザードップラーの準備と位置決め

1. 10μLのピペットチップ(長さ3〜5mm)の先端を切断して、レーザードップラープローブ用のホルダーを準備します><。 手記：すべての器具は、ホットビーズ滅菌器を使用して滅菌されます。また、手術の前後に微生物消毒スプレーで表面を消毒します。手術前に、マウスの頭部と胸部の周囲を創傷消毒スプレーで消毒します。
2. 手術の30分前にマウスに鎮痛剤を注射します(4 mg / kgカルプロフェンと0,1 mg / kgブプレノルフィン、腹腔内)。
マウスをイ
3. ソフルラン流量4%の誘導チャンバーに入れて、自発的な体の動きと振動が停止するまで麻酔をかけます。
4. マウスを手術エリアの腹臥位に置き、マウスの鼻を麻酔マスクに入れます。イソフルラン濃度をさらに1分間4%に保ち、その後、イソフルラン濃度を減らして2%に保ちます。
5. マウスの体温を37°Cに維持するために、関連するフィードバック制御加熱パッドをセットし、直腸プローブを静かに挿入して、手術中の温度を監視します。
6. 両目にデクスパンテノール眼軟膏を塗ります。.
7. 左目と耳の周りの皮膚と毛を70%エタノールで消毒します。
8. 左耳と目の間(長さ1cm)の頭皮を切開し、頭蓋骨を露出させます。
9. 側頭筋を切って引退させ、頭蓋骨の下のMCAを視覚化します。
10. レーザードップラープローブ/ファイバーを左MCAの上に保持している先端の外側部分を接着剤で固定します。次に、皮膚を接着して、チップホルダーの周りの傷を閉じます。硬化剤接着剤を2〜3滴塗布して、プロセスをスピードアップします。レーザードップラーファイバーが接着されておらず、いつでもチップホルダーから簡単に取り外せることを確認してください。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
45°傾斜	H&S Kunststofftechnik		高さ: 18 cm
5 mLシリンジ	ブラウン
イソフルラン麻酔システム	ドラゲ
ベパンテンポマード	バイエル
C57Bl/6Jマウス	チャールズ川	000664
エタノール 70%	CLNケミカリアンラボルベドルフ	521005
エタノール 96%	CLNケミカリアンラボルベドルフ	522078
エタノール99%	CLNケミカリアンラボルベドルフ	ETO-5000-99-1
フィラメント	ドッコル	602112PK5RE
細い45角度の鉗子	FSTの	11251から35
細い鉗子	FSTの	11252から23
ファインハサミ	FSTの	14094-11
膠	オレクセルン	BSI-112
硬化剤接着剤	ドレクセルン&メーア	BSI-151
ヒーティングブランケット	FHC DC温度コントローラー
イソフルラン	修道院長	B506
レーザドップラ	危険にさらされた	PF 5010 LDPM、ペリフラックスシステム 5000
レーザードップラープローブ	危険にさらされた	〒91-00123

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