マウスモデルにおける腰椎不安定性の外科的導入:マウスモデルにおける腰椎突起および連結靭帯の切除のための外科的処置

要約

出典:Liu, S. et al. A Mouse Model of Lumbar Spine Instability. J. Vis. Exp. (2021)

このビデオでは、マウスモデルで腰椎の不安定性を誘発する外科的手順について説明し、腰椎L3からL5の棘突起と棘上靭帯および棘間靭帯を切除します。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

>1. 手術前の準備

1. 器具の滅菌:手術前にオートクレーブ(121°Cで15分間)で手術器具を蒸気滅菌します。器具は金属製の容器に詰め、手術で使用するまで保管してください。
2. 手術プラットフォームのセットアップ:手術のために少なくとも60cm×60cmのベンチエリアを割り当てます。75%アルコールで領域の表面をきれいにし、使い捨ての医療用タオルで覆います。滅菌済みの手術器具パック、試薬、手術用品を、面積の上部1/3以内の使い捨て医療用タオルの上に置きます。残りの2/3の領域を外科手術のために清潔に保ちます。熱サポートのために外科用パッドの下にホットパッドを追加します。
3. 動物の調理法
   1. 動物(C57BL/6Jマウス、雄、8週齢)を誘導室に入れます。イソフルランの場合は4%、酸素の場合は4L / minの誘導レベルで気化器をオンにします。動物が完全に麻酔された後、手術中にノーズコーンで麻酔薬を維持し、手術中に麻酔薬の送達をイソフルランで1.5%、酸素で0.4L / minのレベルに保ちます。.動物の呼吸を監視します。
   2. 手術中の角膜の乾燥を防ぐために、クロルテトラサイクリン塩酸塩眼軟膏を塗布します。
   3. 背側表面の手術部位を胸部下部から仙骨部の上部まで、小動物用トリマーで削ります。剃った毛皮をティッシュペーパーで取り除きます。
   4. 脱毛クリームを剃った部分に塗布し、3分以内にそのままにし、クリームをガーゼで取り除き、2mLの0.9%滅菌生理食塩水で洗い流します。
   5. マウスの腹部の下にカスタムメイドの外科用円筒形パッド(図1A)を配置して、腰椎を持ち上げ、外科手術を容易にします。

2. 腰椎第3から腰椎第5(L₃–L₅)への棘突起の曝露

1. 人差し指を使って、より外側にある腰椎の皮下棘突起に触れ、胸椎や仙椎と比較して腰部を特定します。
2. 75%アルコールを使用して皮膚を洗い流します。メスの刃を使用して、胸部中央部から股関節までの腰部に3〜4cmの正中線皮膚切開を行い、筋膜を露出させます。
3. 棘突起の先端に挿入された後筋膜の形態によって腰椎を特定します。詳細には、第3腰椎(L₃)から第1仙骨(S₁)筋膜は、それらの「V」形状によって他の筋膜と区別されます。最後の「V」の先端は最初の仙骨(S₁)筋膜に接続し、最初の「V」の先端はL₃の棘突起に対応します(図1B)。
4. メスの刃を使用して、両側のL₃からL₅までの棘突起に沿って後棘筋を横方向に切開します(図1C)。ファセットに向かって切開の深さを制御して、出血を減らします。
5. 2つの眼科用鉗子を使用して筋肉層を分離し、L₃からL₅の棘突起と棘上靭帯を露出させます。

>3. L₃–L₅棘突起と靭帯の切除

1. Venusせん断を使用して棘間靭帯を切断することにより、個々の棘突起を分離します(図1D)。
2. L₃–L₅の棘突起と棘間靭帯をVenusせん断で切除します(図1E)。
3. 傍脊椎筋を再付着させることなく、滅菌シルク編組(縫合サイズ5.0)で皮膚切開部を縫合します。
4. クロルテトラサイクリン塩酸塩眼軟膏を手術部位に塗布します。.

結果

図1:L3-L5棘突起のばく露とLSI操作 (A)マウスの腹部の下に特注の円筒形パッドを装着。(B)腰椎筋膜の露出と「V」字型によるL3からS1への棘突起の同定。(C)L3からL5の棘突起の両側にある外側の傍棘筋切開。(D)棘間靭帯の切断による個々の棘突起の露出。(E)棘間靭帯および棘上靭帯によるL3–L5棘突起の切除。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
クロルテトラサイクリン塩酸塩眼軟膏	上海ゼネラルファーマシューティカル株式会社	H31021931	目の乾燥を防ぎ、創傷感染を防ぎます
C57BL/6J雄マウス	Tian-jiang Pharmaceuticals Company(中国江蘇省)	SCXK2018-0004	動物モデル
使い捨て医療用タオル	河南華域医療機器有限公司	20160090	外科手術用プラットフォーム
吸入麻酔器	ミッドマーク	マトルクス 3000	麻酔
イソフルラン	深センRWDライフテクノロジー株式会社	1903715	麻酔
リドカイン塩酸塩	山東華麓製薬有限公司 Shandong Hualu Pharmaceutical Co., Ltd.	H37022839	痛みの緩和
医療用縫合針	上海浦東金環医療製品有限公司	20S0401J	縫合皮
眼科用鉗子	Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. 手術器具工場	JD1050	スキンをクリップする
眼ハサミ(10cm)	Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. 手術器具工場	00030年	皮膚切開
シルク編み込み	上海浦東金環医療製品有限公司	11V0820	縫合皮
小動物用トリマー	上海飛池電気有限公司 (Shanghai Feike Electric Co., Ltd.)	FC5910	脱毛
滅菌外科用ブレード(12#)	上海浦東金環医療製品有限公司	35T0707	筋肉切開
Veet脱毛クリーム	レキットベンキーザー(インド)リミテッド	NAの	脱毛
金星ばさみ	Mingrenの医療機器	長さ:12.5cm	筋肉と棘突起をクリップします