マウスモデルにおける経子宮胎児気管閉塞のモデリング:妊娠中のマウス内の胎児気管の結紮のための外科的処置

要約

出典:Aydın, E. et al.マウスの経子宮胎児気管閉塞モデル。 J. Vis. Exp.(2021年)

このビデオは、妊娠中のマウスのマウス胎児の経子宮気管閉塞手順を示しています。このモデルは、閉塞した気管が肺の発達に与える影響を研究するために使用できます。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. 開腹術

1. アルコールとポビドンヨードで腹部の表面をきれいにします。手術中は無菌状態を維持します。
2. 妊娠中の母の開腹術のために垂直切開を行います。すべてのレイヤーを別々にカットします。
3. 両側の子宮角を特定します。
4. 手術の候補となる胎児を決定します。
   手記：膣に最も近い胎児を手術しないでください。
5. 両側に偶数の胎児がいる場合は各子宮角に2人の胎児を手術し(ほとんどの場合4人)、子宮の数が奇数の場合は各子宮角に1人の胎児を手術します(ほとんどの場合3人)。

2. 気管閉塞(TO)

1. 視覚化には2.5倍の倍率メガネを使用してください。
2. 子宮角を横方向に配置します。
3. 子犬の目と尻尾を目安に、2本の指で上を向いて子犬を連れて行き、胎児の位置を決めます。
4. 子犬の頭に穏やかな圧力をかけて、頭を伸ばし、首を視覚化できるようにします。
5. 6.0ポリプロピレン製縫合糸と非外傷性針を使用してTOを行います(図1)。胎盤を横に保ち、針の入口と出口から遠ざけてください。
6. 針を子宮の側面から横方向に挿入し、胎盤から離れて首の1/3の前部を通って
挿入します。
7. 針を首の正中線まで静かに動かし、前部に向け、次に気管の間と頸動脈鞘と子宮の反対側で首を出します。
8. 縫合糸を結び、膜と子宮壁の完全性を維持し、結び目を作る間は臍帯を安全に保ちます。

>3. 腹壁閉鎖

1. 腹部の子宮角を交換します。
2. 閉鎖する前に、2 mLの温かい滅菌生理食塩水を腹腔に注入します。
3. ランニング5/0ポリグラクチン縫合糸を入れて腹壁を閉じ、ランニングしないシルク縫合糸で皮膚を閉じます。
4. 鎮痛のために0.1 mg / kgのブプレノルフィンを腹腔内に適用し、温かいインキュベーターでダムを回復させます。.

結果

図 1.気管閉塞。(A)頸部を通過する経子宮縫合糸。(B)縫合糸が結び目を通過した後、結び目の前の構造の概略図。略語:C =頸動脈;J = 頸静脈;T =気管;E =食道;V =椎骨。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
ブプレノルフィン	パー・ファーマシューティカル	NDCの42023-179-05	局所麻酔用
虫眼鏡	米国内科外科	一眼レフ-250LBLK	少なくとも2.5倍
シルク縫合糸	エチコン	VCP682G	4-0、24 mm、切断
イソフルラン	ハロカーボンライフサイエンスNDC	66794-017-25	局所麻酔用
ポリプロピレン縫合糸	エチコン	Y432H(イー432H)	6-0、13 mm 1/2cテーパーポイント